侯桂琴
- 作品数：64 被引量：233H指数：9
- 供职机构：郑州大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- mTOR通路增强宫颈癌紫杉醇耐药细胞株HeLa/PTX对紫杉醇的敏感性被引量：6
- 2019年
- 目的探讨mTOR在宫颈癌紫杉醇耐药中的作用及mTORC1/2双重抑制剂OSI-027联用紫杉醇后HeLa/PTX细胞对紫杉醇(paclitaxel,PTX)敏感性的变化并对相关机制进行研究。方法用sh-RNA-Raptor及sh-RNA-Rictor质粒转染HeLa/PTX细胞以下调Rictor及Raptor的表达,采用western blot法检测mTOR信号通路相关蛋白(Raptor、Rictor、p-Akt(ser473)、Akt和p-p70S6K)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达情况;采用平板克隆形成实验、CCK-8法及Western blot法检测单用mTORC1/2双重抑制剂(OSI-027)、PTX及联用OSI-027和PTX后细胞克隆形成能力、增殖活力的变化并计算药物联用指数(combination index,CI)及mTOR信号通路相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达情况。结果与对照组相比,在HeLa/PTX细胞中下调Raptor后p-p70S6K表达显著降低(P<0.001),p-Akt(ser473)/Akt比率显著升高(P<0.001),Bcl-2/Bax比值无显著差异(P>0.05)。下调Rictor后p-p70S6K蛋白表达、p-Akt(ser473)/Akt及Bcl-2/Bax比值均显著降低(P<0.001);与单独使用OSI-027或PTX相比,联合用药组细胞的克隆形成能力及增殖活力均明显下降且两药联用具有协同作用;与空白对照组相比,单用PTX处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比率略降低(P<0.05),p-p70S6K表达无明显变化(P>0.05),而单用OSI-027处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比率及p-p70S6K表达均显著降低(P<0.001);与单用OSI-027及PTX相比,联合用药处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比值、Bcl-2/Bax比值及p-p70S6K蛋白表达均显著降低(P<0.001)。结论抑制mTORC2信号通路的活性可减弱mTORC1抑制引起的p-Akt(ser473)反馈激活可成为克服紫杉醇耐药的有效靶点;mTORC1/2双重抑制剂OSI-027与紫杉醇联用可产生协同抗肿瘤作用。
- 张艳刘耀基侯桂琴陈楠
- 关键词：宫颈癌紫杉醇耐药
- 检测外周血相关基因预测培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌疗效的研究
- 2015年
- 目的探讨培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效及预后因子。方法回顾性分析2008年3月-2010年3月在河南省人民医院接受培美曲塞联合顺铂一线化疗的56例ⅢB、Ⅳ期NSCLC患者。采用荧光定量PCR方法检测患者外周血TS、DHFR、GARFT基因表达情况,研究各项指标与客观缓解率、总生存期、无进展生存期的关系。结果56例患者客观有效率（完全缓解＋部分缓解）为39.2%（22/56）。中位无进展生存（PFS）为5.7个月（95%CI为5.01～6.40）,中位总生存期（OS）为12.0个月（95%CI为11.10～12.90）。卡方分析结果显示,年龄、淋巴结肿大、远处转移及TS基因扩增与疗效有关。单因素及多因素分析结果显示,是否远处转移、TS表达水平与无进展生存和总生存期相关（P〈0.01）。结论外周血TS可作为预测应用培美曲塞化疗晚期肺癌患者预后的分子标志。
- 刘明月侯桂琴崔瑶高天慧周云
- 关键词：培美曲塞非小细胞肺癌胸苷酸合成酶
- 雷帕霉素靶蛋白信号通路在食管癌细胞系中激活状态的研究被引量：5
- 2007年
- [目的]研究雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号传导通路在食管鳞癌细胞系EC9706和Eca109中的激活状态。[方法]采用细胞免疫组化检测mTOR及其下游靶分子(p70S6K)在两细胞系中的表达,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA水平及蛋白水平测定此通路的活性。[结果]mTOR在两种细胞系中均有表达,且在EC9706中的表达水平明显高于Eca109,mTOR下游靶点(p706S6K)的磷酸化水平也是EC9706明显高。[结论]mTOR信号通路在两种细胞系中都是特异性激活。激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度越低,通路的激活水平越高。
- 侯桂琴鲁照明穆欣刘洪涛刘兰琦许培荣薛乐勋王建人
- 关键词：食管肿瘤雷帕霉素靶蛋白细胞株
- EC9706和Eca109细胞中雷帕霉素靶蛋白信号通路激活状态观察被引量：11
- 2007年
- 目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA及蛋白水平检测此通路的活性。结果:在2种细胞中mTOR均有表达,且在EC9706细胞中的表达水平高于Eca109(P<0.05);EC9706细胞中mTOR下游靶点的磷酸化水平高于Eca109细胞(P<0.05)。结论:在2种食管鳞癌细胞中,mTOR信号通路均特异性激活;但激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度低者通路的激活水平较高。
- 侯桂琴范天黎鲁照明刘兰琦许培荣薛乐勋王建人
- 关键词：食管癌雷帕霉素靶蛋白EC9706细胞ECA109细胞
- 转基因微藻作为新型生物反应器的研究进展被引量：1
- 2006年
- 转基因微藻作为生物反应器生产生物活性物质已成为基因工程研究的热点之一。目前以转基因微藻作为生物反应器的技术并不十分成熟,然而许多科研人员及生物医药公司将微藻作为新型生物反应器生产有用的外源蛋白。本文对微藻生物反应器构建中的有效核转化方法的建立、转基因微藻中所用的启动子、筛选标记、稳定表达等问题进行了综述,同时介绍了目前转化成功的以及未来可能转化成功的有潜在应用价值的微藻。
- 刘红涛鲁照明侯桂琴李慎柯王建民薛乐勋
- 关键词：生物反应器启动子
- 杜氏盐藻psaB基因cDNA的克隆与序列分析被引量：5
- 2005年
- 根据真核生物莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)、Chlamydomonasmoewusii、Chlorellavulgaris以及Mesostigmaviride的psaB基因的氨基酸高度保守序列,设计一对简并引物,利用TRIzol试剂提取杜氏盐藻(Dunaliellasalina)细胞的总RNA,通过RT-PCR,得到的一段长为1·8kb左右的cDNA片段。PCR产物经T-A克隆并测序分析以及测序结果推导成氨基酸序列进行同源性比较,表明所克隆的1815bp序列为杜氏盐藻psaBcDNA片段,GenBank收录号为AY820754。根据已经得到的psaB序列推导成氨基酸序列与一些已知物种的psaB基因相比较,同源性分别为Chlamydomonasreinhardtii92%,Chlamydomonasmoewusii91%,Chlorellavulgaris86%,Mesostigmaviride85%,Physcomitrellapatenssubsp.Patens85%,Nephroselmisolivacea84%。据此可推断本实验中所克隆的序列为杜氏盐藻psaBcDNA序列。
- 刘红涛臧卫东鲁照明王宁侯桂琴李慎柯薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻CDNA
- 多西紫杉醇或伊立替康联合顺铂、5-氟尿嘧啶治疗进展期胃癌的疗效及安全性被引量：4
- 2012年
- 目的比较多西紫杉醇（Doc）或伊立替康（CPT-11）联合顺铂（DDP） 5．氟尿嘧啶（5一Fu）治疗晚期胃癌的疗效以及安全性。方法：采用前瞻性、随机、对照的临床研究方法，将符合标准的病例随机分为多西他赛、顺铂联合氟尿嘧啶方案（DCF）组和伊立替康、顺铂联合氟尿嘧啶方案（ICF）组，其中DCF组16例，ICF组15例，DCF组： Doctaxel 60mg/m2，静脉滴注，第1天；DDP 75mg/m2，分3天静脉滴注；5-FU 500mg/m2，静脉滴注第1～5天。ICF组：CPT-11 65 mg/m2,静脉滴注，第1、8天；DDP、5-FU用量用法同DCF组。如应用CPT – 11后出现乙酰胆碱能综合征, 则下一周期滴注前预防性给予阿托品0.5mg皮下注射。每3周重复，直至疾病进展或出现不可耐受毒副反应，最多6个周期。每2周期评价疗效。化疗结束后每月随访一次，用Kaplan—Meier法分析主要终点指标无进展生存期（PFS）及总生存期（OS）中位生存期。结果：DCF组与ICF组有效率分别为为40%（6/15）和38.46%（5/13）（X2=0.007，P=0.934）。DCF组与ICF组中位生存期分别为9.5个月和10.0个月（X2=0.39，P=0.5336），1年生存率为30.68%和26.43%。结论：两种方案治疗的近远期疗效相近，主要毒性是骨髓抑制和腹泻等，经对症处理后均缓解，未出现治疗相关死亡，是晚期胃癌的一线有效治疗方案，值得临床继续观察疗效。
- 刘明月侯桂琴高天慧崔瑶李晓燕周云
- 关键词：抗肿瘤联合化疗方案
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白小分子干扰RNA对食管鳞癌细胞中mTOR-p70S6K信号通路及裸鼠移植瘤生长的影响被引量：2
- 2011年
- 目的 检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）小分子干扰RNA（siRNA）对食管鳞癌中mTOR-p70S6K信号通路的阻断作用以及对裸鼠移植瘤生长的影响.方法 以食管鳞癌细胞株EC9706为研究对象,采用siRNA干扰、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot、流式细胞术及CCK-8等方法,观察mTOR-p70S6K信号通路被阻断后,通路中各因子蛋白及mRNA表达的变化,及其对细胞增殖和凋亡的影响.进行裸鼠成瘤实验,观察mTOR siRNA对肿瘤生长的影响.结果 与未转染细胞相比,转染mTOR siRNA的细胞中mTOR和磷酸化p70S6K的表达水平降低（P〈0.05）,而pTOS6K的表达水平升高（P〈0.05）.转染mTOR siRNA后,细胞凋亡增加,细胞增殖能力降低,且对顺铂的敏感性增高,细胞被阻滞在G,期（P〈0.05）.mTOR siRNA能明显抑制裸鼠移植瘤的生长,siRNA组和siRNA＋顺铂组的肿瘤抑制率分别为50.9%和62.3%.结论 mTOR siRNA能有效抑制mTOR-pTOS6K信号通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,在裸鼠体内能显著抑制肿瘤的生长.mTOR-pVOSSK信号通路在食管鳞癌发生发展中起重要作用.
- 刘明月侯桂琴张艳贝维娟闫爱华
- 关键词：流式细胞术裸鼠
- miR-199a-3p在食管鳞癌细胞中的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨miR-199a-3p在食管鳞癌细胞中的表达情况及其对细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用Realtime PCR法检测miR-199a-3p在5株食管鳞癌细胞TE1、Eca109、EC9706、KYSE450、KYSE790中的表达。用siRNAMateTM转染试剂将人工合成的miR-199a-3p模拟物mimics转染Eca109、EC9706细胞后,采用Real-time PCR法检测miR-199a-3p的表达,采用克隆形成实验、CCK-8法及双染法检测细胞克隆形成能力、增殖能力和凋亡率,Western blot检测m TOR、p-p70S6K和Bcl-2蛋白的表达。以未转染细胞为空白对照,以转染mimics阴性对照的细胞为阴性对照。结果:miR-199a-3p在5株食管鳞癌细胞中均有表达,表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组和阴性对照组细胞相比,转染mimics的Eca109和EC9706细胞中miR-199a-3p相对表达量显著升高(P<0.001),细胞克隆形成能力降低(P<0.001),细胞增殖能力降低(P<0.001),细胞凋亡率增加(P<0.001),m TOR、p-p70S6K及Bcl-2蛋白表达水平降低。结论:miR-199a-3p可能是通过调节m TORC1/p70S6K信号通路来抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进细胞的凋亡。
- 高盼鲁照明刘襄艳张幸丽凡丞师莹莹侯桂琴
- 关键词：食管鳞癌细胞增殖细胞凋亡
- “互联网+”时代药事管理学教学现状研究及改革探索被引量：6
- 2016年
- "互联网+"时代的到来,给传统教育带来深远影响,这也使得药事管理学课堂教学迎来了新的机遇与挑战。本文首先分析了药事管理学学科发展现状及目前课堂教学中存在的主要问题,然后对药事管理课堂教学方法提出改革建议,以期提高药事管理学课程的教学效果。
- 鲁照明侯桂琴高钟丽
- 关键词：药事管理学教学改革
