冯舒
- 作品数：8 被引量：17H指数：2
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
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- 血管内皮祖细胞移植对大鼠重症急性胰腺炎肾损伤的保护作用
- 2014年
- 目的:探讨内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)合并肾损伤的保护作用。方法:通过共沉淀法制备超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO);密度梯度离心法分离培养SD大鼠骨髓来源EPCs;使用SPIO标记EPCs;将72只SD大鼠随机分为对照组、SAP组和SPIOEPCs组,采用胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型。对照组和SAP组经尾静脉注射生理盐水,SPIOEPCs组注射等量的SPIO-EPCs;分别于造模2,6,12 h检测各组大鼠血清中淀粉酶、尿素氮、肌酐和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;苏木精染色观察肾组织各时相病理变化及进行病理评分,普鲁士蓝染色观察肾组织各时相铁颗粒含量。结果:SAP组2,6,12 h的血清淀粉酶、尿素氮、肌酐和TNF-α的水平较对照组明显升高(P<0.01);而SPIO-EPCs组均显著低于SAP组(P<0.01)。与对照组比较,SAP组2,6,12 h肾病理改变明显加重,肾病理评分明显提高(P<0.05);与SAP组比较,SPIO-EPCs组肾病理改变明显减轻,肾病理评分明显降低(P<0.05)。普鲁士蓝染色见SPIOEPCs组在2,6和12 h肾组织血管内皮铁颗粒含量逐渐增多。结论:移植EPCs可减少炎症介质释放,减轻SAP肾的血管内皮损伤,对大鼠SAP肾损伤具有保护作用。
- 党胜春王平江曾艳华陈荣芳王豪冯舒崔磊张建新
- 关键词：内皮祖细胞重症急性胰腺炎肾损伤超顺磁性氧化铁
- 髓系细胞触发受体-1对大鼠肠巨噬细胞凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨髓系细胞触发受体-1 （triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1）的表达对大鼠肠巨噬细胞凋亡的影响.方法 体外培养肠巨噬细胞,实验3分组,每组6孔：对照组、LPS组及LPS＋LP17组.加入药物LPS（1 mg/L）和LP17 （0.1 mg/L）,培养6h后用TUNEL试剂盒及流式细胞仪对大鼠肠巨噬细胞凋亡进行检测,利用SPSS 18.0软件进行统计分析.结果 细胞生长状态良好,分布均匀,细胞活力约为80％～85％,CD14免疫荧光鉴定证实为肠巨噬细胞.经药物处理后,TUNEL检测细胞凋亡情况：LPS组（44.33±7.74）％较对照组（19.17±6.01）％明显增多（P=0.000）,LPS＋ LP17组（28.33±6.53）％的凋亡细胞比LPS组（44.33±7.74）％明显减少（P =0.004）,对照组（19.17 ±6.01）与LPS＋ LP17组（28.33±6.53）％的凋亡细胞差异无统计学意义（P =0.050）.采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况：LPS组（16.47±1.66）％较对照组（7.70±1.52）％明显增多（P=0.000）,LPS＋LP17组（11.47±3.12）％的凋亡细胞比LPS组（16.47±1.66）％明显减少（P=0.018）,对照组（7.70±1.52）％与LPS＋ LP17组（11.47±3.12）％的凋亡细胞差异无统计学意义（P =0.061）.结论 LP17能抑制肠巨噬细胞TREM-1的表达,减少肠巨噬细胞凋亡.
- 党胜春冯舒刘彬陈志明王平江顾敏张建新
- 关键词：髓系细胞触发受体-1凋亡脂多糖肠黏膜屏障TUNEL流式细胞
- 一氧化氮合酶基因转染小鼠内皮祖细胞的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨利用脂质体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因体外转染小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)的可行性。方法密度梯度离心法分离ICR小鼠骨髓来源单个核细胞培养制备小鼠EPC并鉴定;构建、扩增、提取并纯化pcDNA3.0/eNOS基因质粒;用EPC培养基配成2×105·mL-1细胞悬液,按0.6 mL/孔重新铺6孔板,待细胞生长至80%左右融合时,用脂质体LipofectamineTM2000体外转染eNOS基因至EPC。转染48 h后,采用RT-PCR检测EPC中eNOS的表达,硝酸还原酶法检测EPC中一氧化氮(NO)的含量,荧光探针DCFH-DA活性氧检测氧自由基(ROS)的含量。结果成功培养EPC,成功构建pcDNA3.0/eNOS基因载体。转染48 h后,EPC中eNOS表达量明增加(P<0.01),NO含量明显升高(P<0.01),ROS含量明显降低。结论脂质体介导eNOS基因能够有效转染小鼠EPC,并能在EPC中有效表达。
- 党胜春陈荣芳王平江冯舒张建新
- 关键词：内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶基因一氧化氮氧自由基
- LP17对大鼠肠巨噬细胞超微结构的影响
- 2015年
- 目的:通过观察LP17对体外培养的大鼠肠巨噬细胞超微结构的影响,探讨LP17对激活的肠巨噬细胞的作用机制,寻找对肠黏膜屏障功能障碍的可能治疗方法。方法:体外分离、培养大鼠肠巨噬细胞分为对照组[未加脂多糖(LPS)和LP17处理],及实验组[包括LPS组(用LPS处理)和LPS+LP17组(用LPS及LP17处理)]。给药浓度为LPS 1 mg/L,LP17 0.1 mg/L,培养6 h后用0.25%胰酶消化收集细胞。Tecnai 12透射电镜观察实验组及对照组大鼠肠巨噬细胞的超微结构变化。结果:经药物处理后,电镜下观察,对照组为正常巨噬细胞,实验组中LPS组巨噬细胞内出现大量溶酶体,LPS+LP17组巨噬细胞出现凋亡小体。结论:LP17能促使被激活的巨噬细胞凋亡。
- 张建新陈志明党胜春冯舒王平江
- 关键词：髓系细胞触发受体-1肠黏膜屏障功能障碍
- 髓系细胞触发受体-1对大鼠肠巨噬细胞氧化应激的影响被引量：6
- 2015年
- 目的:探讨髓系细胞触发受体(triggering receptor expressed on myeloid cells,TREM)-1的表达对大鼠肠巨噬细胞氧化应激的影响。方法:体外培养肠巨噬细胞,随机分3组,对照组常规培养,脂多糖组和脂多糖+LP17组分别于培养基中加入脂多糖(1 mg/L),脂多糖(1 mg/L)+LP17(0.1 mg/L),培养6 h,反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞TREM-1及TNF-α的表达,活性氧荧光探针(DHE)检测细胞活性氧含量的变化。结果:与对照组比较,脂多糖组和脂多糖+LP17组肠巨噬细胞TREM-1及TNF-α的基因及蛋白表达明显增加(P均<0.05),且脂多糖+LP17组明显低于脂多糖组(P<0.05)。与对照组比较,脂多糖组和脂多糖+LP17组活性氧含量明显增加,且脂多糖组高于脂多糖+LP17组。结论:抑制肠巨噬细胞TREM-1的表达可减轻氧化应激对肠黏膜屏障的损伤。
- 胡蓉吴朝阳党胜春崔磊王豪冯舒张建新顾敏
- 关键词：髓系细胞触发受体-1氧化应激
- 巨噬细胞表型在重症胰腺炎肾损伤中的表达被引量：7
- 2014年
- 目的 探讨巨噬细胞（Mφ）表型在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）急性肾损伤中的机制.方法 雄性Wistar大鼠64只,随机（随机数字法）分为对照组（SO组）和SAP组,每组32只,采用逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型,于造模后2、6、12及24h分别取血和肾组织.自动生化分析仪测定血液中尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）的改变.逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测肾组织IL-12、TNF-α、IL-10及TGF-β的mRNA的表达水平.蛋白质印迹法检测CD68、iNOS、Arg-1的表达.结果 SAP组各时点BUN、Cr的浓度均高于对照组（P ＜0.01,P＜0.05）;SAP组各时点肾组织IL-12、TNF-α、IL-10、TGF-β的mRNA的表达水平较对照组显著增高,差异具有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）; SAP组各时点CD68、iNOS、Arg-1表达量均高于对照组.结论 SAP时炎症反应及炎症失衡是急性肾损伤的可能病理因素.
- 党胜春冯舒王平江沈耀张建新
- 关键词：重症急性胰腺炎肾损伤巨噬细胞CD68
- 小鼠骨髓源性内皮祖细胞的体外培养及标志物鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨小鼠骨髓来源的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的体外培养、诱导分化及表面标志物的鉴别。方法:收集ICR小鼠骨髓EPCs,Ficoll分离单核细胞,使用含有血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)的培养基培养。分别在细胞培养5,10,15及20 d后检测细胞表面的内皮细胞标志物。结果:培养5 d后细胞开始出现上皮细胞的形态,有伪足出现;培养10 d,细胞开始增殖,成圆形,出现梭形细胞;培养15 d,细胞出现较为典型的内皮细胞形态,铺路石状;培养20 d,细胞出现长梭形拉网状,即类似成熟内皮细胞形态。免疫荧光染色及流式定量检测结果显示,CD34在EPCs中的表达随培养时间延长有渐变减弱的趋势;血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)在EPCs的表达随培养时间延长有渐变增强的趋势。结论:骨髓EPCs在特定诱导条件下可分化出典型的成熟内皮细胞,取材方便,扩增能力较强。
- 党胜春陈纪芳冯舒刘彬王平江张建新
- 关键词：骨髓内皮祖细胞体外培养
- 纳米空心羟基磷灰石-氯磷酸二钠对重症急性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨空心羟基磷灰石(HAP)作为clodronate的载体对SAP肺损伤时AM凋亡的影响。方法将SD大鼠随机分为SAP组(C组)、SAP+HAP组(P组)、SAP+HAP-clodronate组(T组),每组8只。氯胺酮肌肉注射进行麻醉2mg(mg/kg)。各组麻醉后开腹胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠(4mL/kg)制作SAP模型,6h后处死动物。利用肺泡灌洗液,经差时贴壁法分离、纯化,并进行原代培养,用苏木素、吖啶橙荧光染色对所分离的细胞进行凋亡鉴定。结果细胞荧光(AO)染色和苏木素染色可以明确HAP为载体clodronate对细胞凋亡的影响,C组及P组未见明显凋亡。结论空心HAP可作为clo-dronate的载体,可以诱导SAP大鼠AM细胞凋亡。
- 党胜春陈纪芳王平江冯舒
- 关键词：羟基磷灰石肺泡巨噬细胞
