刘丽赏 作品数:5 被引量:8 H指数:2 供职机构: 庆熙大学 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 湖南省教育厅科研基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 理学 更多>>
一种基于磁富集靶序列PCR的扩增方法及其灵敏度检测 2012年 以亲和素修饰的磁性纳米颗粒γ-Fe2O3为载体,提出了基于磁富集靶序列PCR扩增方法。首先将结合有生物素标记特异性引物的靶序列富集到亲和素修饰的γ-Fe2O3纳米颗粒表面,然后通过变性获取单链的靶序列,再进行PCR扩增。同时,优化了靶序列和特异性引物杂交的最适温度和磁性纳米颗粒γ-Fe2O3的最佳用量,并对该方法的灵敏度进行了检测。通过实验得出:该方法中,最适的杂交温度为53℃,磁性纳米颗粒的最佳用量为90μg,靶序列的最低检出浓度为5×10-10ng/mL。 牟贤波 刘洪娜 李松 刘丽赏关键词:Γ-FE2O3 杂交 PCR 一种基于磁性颗粒和通用连接子扩增技术的单核苷酸多态性分型方法 2009年 提出了一种应用磁性颗粒和通用连接子扩增技术(Linker-PCR)的多位点单核苷酸多态性(SNP)分型方法.该方法首先通过酶切将样本基因组DNA打断,然后将通用连接子通过T4DNA连接酶与各个酶切片段连接,利用生物素标记的通用引物将样本进行全基因组扩增.扩增后,将生物素标记的Linker-PCR扩增产物固定到亲合素修饰的磁性颗粒表面,通过与双色荧光标记的等位基因特异性探针杂交,对待测位点进行分型.利用该方法,我们对10个样本MTHFR基因上的2个SNP位点进行了分型,分型结果准确、正错配信号比大于3.由于利用Linker-PCR技术来实现对靶序列的全基因组扩增,该方法非常适用于大量样本的多基因多位点的SNP分型研究. 刘洪娜 李松 刘丽赏 田岚 邓燕 李智洋 戴亚斌 何农跃关键词:磁性颗粒 SNP分型 基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交的单核苷酸多态性分型方法研究 被引量:3 2010年 基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交,建立了单核苷酸多态性(Single nucleoitide polymorphism,SNP)分型方法。将利用不对称扩增得到的含有待检测位点生物素标记的单链PCR产物固定在链亲和素修饰的金磁纳米颗粒(Gold magnetic nanoparticles,GMNPs)表面;将ssDNA-GMNPs混合物点样在底部固定有磁铁的载玻片上构建磁性颗粒微阵列,然后在基因框中与双色荧光探针杂交;杂交完全后,充分洗涤,通过扫描获得分型结果。通过优化不对称PCR的扩增条件,直接扩增出产量较高的单链DNA作为靶序列用于分型。利用本方法对24个样本MTHFR基因的C677T位点多态性进行了检测。实验证明,本方法步骤简单,易实现自动化操作、非常适用于分子诊断与法医鉴定。 刘洪娜 李松 刘丽赏 田岚 贾英英 李智洋 邓燕 何农跃关键词:单核苷酸多态性 功能磁性纳米颗粒在原发性高血压易感性研究中的应用 研究复杂疾病背后的遗传作用有助于有效药物的开发。原发性高血压是最常见的心血管疾病,其发病率逐年上升,是遗传因素与环境因素综合作用的结果,原发性高血压呈家族聚集现象进一步说明遗传基因的存在。而肾素-血管紧张素系统(Reni... 刘丽赏关键词:原发性高血压 易感性 用于生物检测的链霉亲和素修饰γ-Fe_2O_3@Au复合颗粒的制备与表征 被引量:5 2010年 制备了粒径为30nm左右的γ-Fe2O3磁性颗粒,利用巯基硅烷(MPTES)的偶联作用最终制备了粒径约为35.9nm的金磁复合颗粒.用X射线粉末衍射仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、紫外可见吸收光谱(UV-Vis)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、振动样品磁强计(VSM)等方法对所得金磁颗粒的表面形貌、大小、结构、光学和磁学性质进行了表征.结果表明:金成功地包覆到了γ-Fe2O3颗粒的表面,所得金磁颗粒具有超顺磁性.利用静电吸附作用,链霉亲和素有效修饰到了γ-Fe2O3@Au复合磁性颗粒表面.通过扫描仪检测其捕捉Cy3标记寡核苷酸序列后的荧光信号,证明了链霉亲和素修饰的γ-Fe2O3@Au复合磁性颗粒有生物活性,且没有荧光背景,在生物检测领域表现出了很大的应用前景. 刘丽赏 刘洪娜 李松 邓燕 李小龙 何农跃关键词:生物检测 生物电子学