刘安定
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：绍兴文理学院附属第一医院更多>>
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- siRNA沉默hTERT基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
- 人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶的蛋白催化亚基,其表达是端粒酶活性的限速步骤。hTERT在正常组织中几乎不表达,而绝大多数肿瘤细胞中都有...
- 刘安定董学君杨明峰郑专陈建军
- 文献传递
- siRNA干扰抑制乳腺癌细胞hTERT基因表达提高阿霉素化疗的敏感性被引量：2
- 2009年
- 目的应用小干扰RNA(siRNA)干扰乳腺癌MCF-7、MDA-MB-453细胞hTERT的表达,探讨hTERT-siRNA联合阿霉素对人乳腺癌细胞株的增殖和凋亡的影响,研究hTERT基因在化疗增敏中的作用。方法体外化学合成针对hTERT基因的小干扰RNA(siRNA)序列,在脂质体介导下转染MCF-7、MDA-MB-453细胞,实时定量PCR检测hTERTmRNA表达水平,western blot检测hTERT蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)及流式细胞分析法分别测定hTERT-siRNA联合阿霉素后对细胞增殖及凋亡的影响。结果靶向hTERT的siRNA可以有效抑制乳腺癌MCF-7、MDA-MB-453细胞株hTERT的表达;hTERTsiR-NA和阿霉素均可抑制MCF-7、MDA-MB-453细胞增殖并诱导其一定程度的凋亡,当联合应用靶向hTERT的siRNA和阿霉素时,上述作用显著加强(P<0.05)。结论体外化学合成的hTERTsiRNA可以有效地抑制乳腺癌MCF-7、MDA-MB-453细胞hTERT的表达,hTERT表达受抑制后,可增强阿霉素作用乳腺癌MCF-7、MDA-MB-453细胞的敏感性。
- 董学君刘安定郑海斌周国忠杨明峰郑专陈建军倪铁钧
- 关键词：小干扰RNAHTERT基因乳腺癌细胞阿霉素化疗敏感性
- 体外RNA干扰人乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶基因表达及促凋亡的研究被引量：1
- 2008年
- 我们以乳腺癌MDA-MB-453细胞株为模型，用小片段RNA（siRNA）特异性抑制人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的表达，了解其促肿瘤细胞凋亡的效果。
- 郑专董学君刘安定杨明峰陈建军
- 关键词：人端粒酶逆转录酶人乳腺癌细胞基因表达RNA干扰促凋亡体外
- 小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性被引量：2
- 2009年
- 人端粒酶逆转录酶（hTERT）是端粒酶活性的限速酶。抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性，增加化、放疗的敏感性。本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后，阿霉素化疗敏感性的变化。
- 董学君刘安定郑海斌周国忠杨明峰郑专陈建军倪铁钧
- 关键词：人端粒酶逆转录酶化疗敏感性阿霉素细胞端粒酶酶表达
- 体外siRNA抑制乳腺癌细胞株端粒逆转录酶基因的表达被引量：3
- 2008年
- 目的:筛选能高效抑制乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453端粒逆转录酶(hTERT)基因表达的RNA干扰靶点,为乳腺癌的基因治疗提供依据.方法:构建针对hTERT基因的三种siRNA(siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3),分别转导入乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453,同时以无同源性的siRNA-hTERT4作阴性对照,含GFP基因的载体作阳性对照.应用实时聚合酶链反应(real-timePCR)和WesternBlot技术检测siRNA处理前后hTERT基因表达变化;MTT法检测细胞生长率;流式细胞术分析基因沉默对细胞凋亡的影响.结果:与阴性对照组相比,siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3三个实验组siRNA转染细胞后,hTERT的mRNA表达量下调至21%～40%,蛋白表达下降至50%,而三个实验组间差异无统计学意义(P>0.05).转染48h后,MCF-7细胞抑制率分别为(57±4.3)%,(61±4.3)%,(65±6.0)%;MDA-MB-453细胞抑制率分别为(45±5.1)%,(45±4.1)%,(50±4.0)%.流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率有所增加,MCF-7细胞为(18.90±0.11)%,(27.30±0.18)%,(27.00±0.16)%;MDA-MB-453细胞为(12.25±0.17)%,(17.80±0.19)%,(20.60±0.21)%.结论:经siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2,siRNA-hTERT3处理均可明显抑制MCF-7和MDA-MB-453乳腺癌细胞的增殖及hTERT基因的表达,能够明显促进细胞的凋亡.
- 杨明峰刘安定郑专陈建军董学君
- 关键词：乳腺肿瘤端粒酶逆转录酶RNA干扰
- siRNA沉默hTERT基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的应用小干扰RNA（small interferingRNA，siRNA）抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT的表达，探讨其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的效应。方法体外化学合成针对hTERT基因的siRNA序列，在脂质体介导下转染MCF-7细胞，实时定量PCR检测hTERTmRNA表达水平，Westernblot检测hTERT蛋白表达水平，流式细胞仪检测细胞凋亡状况，MTT法检测细胞增殖活性，平板克隆形成实验检测克隆形成率。结果所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比均可有效抑制hTERT的表达，hTERTsiRNA转染MCF-7细胞48h后，siRNAl-siRNA3组hTERTmRNA表达分别为（35．3±4．2）％、（30．7±2．8）％、（31．3±3．6）％，与阴性对照组（96．4±2．8％）相比，差异有统计学意义。MTT结果显示MCF-7细胞增殖能力显著降低，转染48h后，siRNAl～siRNA4细胞抑制率分别为（57．6±3．6）％、（61．3±4．3）％、（65．6±6．3）％和（3．1±4．5）％，细胞克隆形成能力下降，凋亡率明显增加。结论体外化学合成的hTERTsiRNA可以有效地抑制MCF-7细胞hTERT的表达，从而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。
- 刘安定董学君杨明峰郑专陈建军
- 关键词：小干扰RNAHTERT基因乳腺癌MCF-7细胞
