刘海英
- 作品数：11 被引量：25H指数：3
- 供职机构：暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>
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- 链脲霉素致大鼠妊娠糖尿病影响子鼠发育的实验模型研究
- 本研究通过SD大鼠腹腔注射链脲霉素(STZ)建立了妊娠糖尿病的实验动物模型，为研究妊娠糖尿病对胎儿发育影响提供了实验基础。
- 柳国胜赵立华刘海英康举龄关洁宾罗先琼聂川
- 关键词：新生儿疾病妊娠糖尿病胎儿发育
- 文献传递
- TGFβ1 shRNA靶向抑制离体胎鼠肺成纤维细胞TGFβ1基因表达
- 2009年
- 目的:探讨自行设计的TGFβ1 shRNA对离体胎鼠肺成纤维细胞TGFβ1基因表达的干扰作用,为研究纤维化病变的基因治疗提供技术基础和依据。方法:原代培养胎鼠肺成纤维细胞,并建立细胞高氧损伤模型。针对大鼠TGFβ1基因mRNA序列,设计、合成携带3条TGFβ1 shRNA绿色荧光蛋白融合表达质粒载体,并设阴性质粒组和空白组为对照,通过JetPEI包裹分别转染上述高氧损伤的胎鼠肺成纤维细胞。转染后24、48和72 h收集细胞,在荧光显微镜下观察干扰效果,采用实时荧光定量PCR检测TGFβ1基因表达情况,并计算干扰效率。结果:①成功培养胎鼠肺成纤维细胞,并建立细胞高氧损伤模型;②荧光显微镜下观察,可见转染后24、48和72 h TG-Fβ1 shRNA质粒组细胞绿色荧光强度均明显弱于阴性质粒组细胞,空质粒载体组未产生绿色荧光;荧光定量PCR检测转染后胎鼠肺成纤维细胞TGFβ1 mRNA表达量,转染后24、48和72 h TGFβ1shRNA质粒组TGFβ1 mRNA表达量均显著低于阴性质粒组(P<0.01),其基因干扰效率则依次递减,分别为97.3%、96.9%和71.7%。结论:本研究证明自行设计的TGFβ1 shRNA转染胎鼠肺成纤维细胞后24、48和72 h均能够高效干扰TGFβ1基因的表达,其基因干扰效率呈现一定的时间依赖性。
- 任建兵刘海英王志军罗瑶柳国胜
- 关键词：转化生长因子Β1RNA干扰肺成纤维细胞
- 链脲霉素实验性大鼠妊娠糖尿病对子鼠心肌细胞超微结构的影响被引量：8
- 2007年
- 目的:通过研究链脲霉素(streptozotoc in,STZ)实验性大鼠妊娠糖尿病对子鼠在不同孕期心肌细胞超微结构的影响,探讨妊娠糖尿病致胎儿心脏发育异常的发生机制。方法:将54只SD孕鼠分为STZ注射组(30只)和柠檬酸缓冲液注射组(24只)作对照观察,按取材时孕龄不同将两组又分为第13、16和19天3个亚组。对STZ注射组孕鼠,给予新配质量分数为2%STZ溶液,按STZ 40 mg/kg,一次性腹腔注射,3 d后空腹尾静脉采血监测血糖,并测尿糖、体质量。对照组用同样方法注射等量的柠檬酸钠缓冲液。孕鼠于孕龄第13、16、19天随机分批剖宫,取子鼠心脏组织做超微结构观察。结果:STZ注射组子鼠心肌细胞超微结构可见不同程度病理变化:细胞间连接较少、间隙宽窄不一,肌束排列不规整,胞膜结构不完整;胞质电子密度较高,线粒体肿胀呈空泡状气球样变,嵴减少,粗面内质网减少、扩张,可见脂质样小滴;胞核大小不一,不规则圆形,核膜结构不清,核染色质分布不均,可见异染色质;胞外基质可见有胶原纤维排列成束状,毛细血管腔外可见红细胞,有细胞器崩解痕迹。结论:STZ实验性大鼠妊娠糖尿病可致子鼠心肌发生超微结构的异常改变,可能为糖尿病母亲致儿心脏畸形的病理基础。
- 柳国胜罗瑶赵立华刘海英康举龄唐福星唐海兰郭祖文
- 关键词：糖尿病超微结构链脲霉素子鼠
- 链脲霉素致大鼠妊娠糖尿病子鼠心肌组织超微结构改变的研究
- 妊娠合并糖尿病是妊娠期最常见的合并症之一,它包括孕前患有糖尿病者妊娠(PGDM)和妊娠期糖尿病(GDM),国内目前报道的 GDM 发病率为1％～5％。母亲孕期糖代谢异常可导致胎儿发育异常,导致自然流产、巨大儿、胎儿官内发...
- 柳国胜罗瑶赵立华刘海英康举龄唐福星唐海兰郭祖文
- 文献传递
- 氧诱导视网膜病变小鼠模型的建立与评价被引量：3
- 2011年
- 目的:建立氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型,并对模型进行整体评价。方法:7日龄清洁级C57BL/6J小鼠随机分为实验组(高氧组)与对照组(空气组),实验组置于体积分数为75%高氧环境中饲养5d后回到空气中继续饲养,对照组则始终在空气环境中饲养。两组小鼠分别于生后第7(P7)、12(P12)、14(P14)、17(P17)、22(P22)、25(P25)及30(P30)天处死取材,观察视网膜病变。视网膜铺片ADP酶染色了解视网膜血管形态学改变;HE染色计数突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目,定量反映视网膜血管的增生情况;VG(Van Gieson)染色及I/III型胶原纤维免疫组织化学染色判断视网膜后期纤维化情况。结果:①成功建立了OIR小鼠模型;对视网膜血管增生定量分析显示实验组小鼠P17平均每只眼球每张切片中新生血管内皮细胞核数目达(32.88±5.843)个,而对照组不足1个,差异具有统计学意义(P<0.000 1)。②探索了OIR小鼠视网膜晚期纤维化情况:视网膜新生血管P17后逐渐消退;视网膜组织VG染色及I/III型胶原纤维免疫组织化学染色结果皆为阴性。结论:OIR小鼠模型较好地复制了临床早产儿视网膜病(ROP)中血管阻塞、新生血管形成等急性病变,但对严重ROP中的视网膜纤维化、牵引性视网膜脱离未能呈现。
- 孟凡星王志军罗瑶刘海英任建兵柳国胜
- 关键词：早产儿视网膜病变动物模型视网膜新生血管化纤维化
- 链脲霉素致大鼠妊娠糖尿病影响子鼠发育的实验模型研究被引量：13
- 2008年
- 目的建立SD大鼠腹腔注射链脲霉素(STZ)致妊娠糖尿病的实验动物模型,为研究妊娠糖尿病对胎儿发育影响提供实验基础。方法将54只SD孕鼠随机分为STZ注射组(30只)和柠檬酸缓冲液注射对照组(24只),两组又按取材时孕龄不同随机分为第13、16天和19天3个亚组。对STZ注射组孕鼠,给予新配2%STZ溶液,按STZ40mg/kg,一次性腹腔注射,3d后空腹尾静脉采血监测血糖、尿糖和体重。对照组用同样方法注射等量的柠檬酸钠缓冲液。孕鼠于孕龄13、16、19d随机分批剖宫,观察完全流产、吸收胎、死胎及存活胎数等情况,检查子鼠的外部形态,测量子鼠体重。子鼠心脏切片经常规HE染色后,进行病理分析。结果STZ注射组孕鼠用药后出现"三多一少"现象,3d后血糖水平明显高于对照组(14.65±1.12)mmol/L比(3.06±0.39)mmol/L,t=48.29,P<0.01,尿糖均阳性,体重明显低于对照组(260.7±14.0)g比(273.7±16.7)g,t=3.11,P<0.01;13、16d和19d流产率均高于对照组,χ2分别为4.37、7.51和11.05,P<0.05;子鼠液化吸收胎、死胎、畸心胎例数较相应对照组高,χ2=77.21,P<0.01。STZ注射组子鼠心脏发育异常数较对照组多,F=196,P<0.01。结论该动物实验模型与人类妊娠糖尿病(GDM)拟合较好,且操作简便,重复性高,是研究妊娠糖尿病致胎儿发育异常较理想的实验模型。
- 柳国胜赵立华刘海英康举龄关洁宾罗先琼聂川
- 关键词：链脲菌素
- 腹腔注射EGF对新生大鼠高氧损伤肺组织EGFR及EGFmRNA表达的影响
- 目的:探讨外源性表皮生长因子(EGF)对新生大鼠高氧伤肺组织EGFR及EGFmRNA表达的影响。方法:取胎龄21天剖宫产出生的新生Sprague dawley(SD)大鼠持续吸入95％的O2制作未成熟肺高氧损伤模型,随机...
- 柳国胜刘海英邱锐琴聂川赵小朋康举龄关洁宾
- 文献传递
- 妊娠期糖尿病母鼠血清晚期糖基化终产物与子鼠心脏发育异常的关系被引量：1
- 2009年
- 目的探讨妊娠期糖尿病（GDM）母鼠血清晚期糖基化终产物（AGE）在GDM致胎儿心脏发育异常中的作用。方法54只SD孕鼠随机分为GDM组（30只）和对照组（24只）。GDM组孕鼠给予2％链脲霉素40mg／kg，对照组注射等量柠檬酸缓冲液。孕鼠于孕13、16、19d随机剖宫取胎，观察胚胎心脏异常情况，检测母鼠血清AGE水平、免疫组化法检测AGE受体（RAGE）在子鼠心脏组织的表达情况。结果GDM组各时间点子鼠心脏发育异常比例较对照组高（P〈0．01）。GDM组孕鼠用药3d后血糖水平明显高于对照组（P〈0．01），尿糖均阳性。GDM组AGE水平在孕13、16和19d时E（5．72±0．68）AU／mg、（7．31±0．29）AU／mg和（7．77±0．39）AU／mg]较对照组[（4．45±0．27）AU／mg、（4．71±0．35）AU／mg和（4．37±0．44）AU／mg]显著升高（t=6．142、16．295和9．399，P均〈0．01）；孕鼠AGE水平与孕鼠血糖（r=0．717，P=0．000）及子鼠心脏畸形数（r=0．994，P=0．000）呈正相关。子鼠心脏RAGE表达与心脏畸形数呈正相关（r=0．638，P=0．004）。结论孕鼠血清AGE升高可能是胚胎心脏发育异常的重要因素。
- 柳国胜吴瑕刘海英赵立华康举龄李小毛肖作源
- 关键词：糖尿病糖基化终产物糖尿病心脏缺损
- 表皮生长因子对新生未成熟大鼠高氧性损伤肺组织纤维化的影响
- 2007年
- 目的 探讨外源性表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）对新生大鼠高氧性损伤肺组织纤维化的影响。方法 取胎龄21d剖宫产出生的新生Sprague-dawley（SD）大鼠持续吸入95％的O2制作未成熟肺高氧性损伤模型，随机分为高氧＋EGF组和高氧＋生理盐水（NS）组，另设空气＋NS对照组；所有组按给药（或NS）时间分为3个亚组，即：a亚组（1—3d）、b亚组（4～6d）、c亚组（1～6d）；各亚组均于生后3、7、14d分批处死采取肺组织标本。应用Masson三色染色、纤维化评分及羟脯氨酸含量测定判断肺组织纤维化的程度。结果 空气＋NS组未见胶原沉积增多现象，高氧＋NS组生后7d胶原沉积明显增多，14d程度加重，7、14d高氧＋EGF组较高氧＋NS组胶原沉积明显减少；羟脯氨酸（HYP）的含量和纤维化评分也表明7、14d时高氧＋EGF组胶原纤维的含量较高氧＋NS组明显减少（P〈0．01）；在高氧＋EGF组中b亚组效果不及a亚组和c亚组。结论 表皮生长因子可以减轻新生未成熟大鼠高氧性损伤肺组织纤维化程度，在肺损伤早期应用效果更好。
- 柳国胜刘海英邱锐琴刘晓红杨慧聂川罗先琼康举龄
- 关键词：表皮生长因子高氧症肺纤维化肺损伤
- 表皮生长因子对新生大鼠高氧损伤肺组织EGFR及EGF mRNA表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨外源性表皮生长因子(EGF)对新生大鼠高氧损伤肺组织EGFR及EGF mRNA表达的影响。方法:取胎龄21d剖宫产出生的新生Sprague dawley(SD)大鼠持续吸入95%的O2制作未成熟肺高氧损伤模型,随机分为高氧表皮生长因子(EGF)组和高氧生理盐水(NS)组,另设空气NS对照组;所有组按给药(或NS)时间分为3个亚组,即:a亚组(1-3d)、b亚组(4-6d)、c亚组(1-6d);各亚组均于生后3、7、14d分批处死取肺组织。应用免疫组化观察各组肺组织EGF-R的表达,RT-PCR方法检测EGF-mRNA的表达。结果:EGFmR-NA的表达随着日龄增加而递增,生后7、14d高氧组EGF-R及EGF mRNA的表达高于空气对照组,14dEGFa和c亚组EGF-R的表达均明显高于相应的高氧NS组(P<0.05),14d时EGF组内源性EGF mRNA的表达较NS组明显增加(P<0.01)。结论:早期应用EGF可促进肺泡上皮细胞EGF-R的表达,改善高氧所致肺发育受阻,对未成熟肺高氧损伤有一定的保护作用。
- 柳国胜刘海英邱锐琴聂川赵小朋康举龄关洁宾
- 关键词：高氧症肺损伤表皮生长因子
