刘红英 作品数:12 被引量:21 H指数:2 供职机构: 广东省中医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
穿心莲内酯对人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:5 2016年 目的 探讨穿心莲内酯(Andro)对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖及细胞周期的影响,为其应用于乳腺癌的治疗提供理论基础。方法 将实验分为对照组及Andro组,Andro组加入终浓度为10、20、40、60、80、100μmol/L的Andro[Andro粉末先用DMSO溶解,再用培养基稀释至细胞处理浓度,控制DMSO的含量为0.1%(v/v)],对照组仅用0.1%DMSO溶剂。采用CCK8检测Andro不同浓度及不同处理时间(24、48、72 h)对MCF-7细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测两组细胞周期分布情况;应用预胶化淀粉细胞块制作方法,将两组细胞制作成石蜡切片,应用免疫组织化学方法检测切片中MCF-7细胞增殖相关的核抗原Ki67及细胞周期相关抗原周期素D1(Cyclin D1)及周期素依赖性激酶4(CDK4)的表达。结果 CCK8检测结果显示Andro浓度为10、20、40、60、80、100μmol/L显著抑制MCF-7细胞的增殖,IC_(50)值为25μmol/L,并且在IC_(50)浓度下24、48、72 h Andro均显著抑制MCF-7细胞的增殖,并随着作用时间的延长,抑制作用越明显。细胞周期检测结果 Andro处理后G_0/G_1期细胞数量达(75.51±1.56)%,与对照组(49.16±1.35)%比较,显著升高(P〈0.05),而S期的细胞数量仅为(12.69±0.87)%,与对照组(44.07±0.98)%比较,显著降低(P〈0.05)。细胞块免疫组织化学结果显示对照组与Andro组Ki67的表达分别为(91.77±2.75)%、(78.05±2.61)%,显著降低(P〈0.05),Cyclin D1的IOD值分别为(2.14±0.17)×10^7、(1.27±0.22)×10^7,显著降低(P〈0.05),CDK4的IOD值分别为(1.14±0.014)×10^7、(1.16±0.024)×10^7,无明显差异。结论 Andro可通过抑制MCF-7细胞的增殖及抑制Cyclin D1的表达从而阻断MCF-7细胞的细胞周期进程从而发挥抗肿瘤作用,Andro不能通过影响CDK4的表达发挥阻断MCF-7细胞周期。 刘红英 何青莲 周大磊 黄镇栋 罗碧怡 彭燕 李楚天 闫岩 郑广娟关键词:穿心莲内酯 MCF-7细胞 细胞增殖 细胞周期 一种冰冻托盘的设计与应用 2021年 随着医疗技术的进步,多个不同领域的学科相互合作已成为对疾病诊疗的趋势,冷冻切片技术[1]正在不断地为各种术中活检标本提供快速而准确的诊断报告,通常要求在30min内完成病理诊断,而整个过程包括:核对验收、组织取材[2]、冰冻切片[2]、冰冻染色[2]和病理诊断,繁杂的操作步骤和严格的时间限制使参与整个过程的病理医生和技术员都格外紧张忙碌。 李明显 李晓 郑广娟 刘红英 郑细闰 何青莲外源基因转染血管内皮细胞条件优化 2013年 目的探讨阳离子脂质体及电穿孔法介导外源基因转染血管内皮细胞的转染效率并进行条件优化。方法采用绿色荧光蛋白基因为报告基因,分别采用Lipofectamine^(TM)2000阳离子脂质体为载体以及电穿孔方法,转染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)。培养48 h后,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在HUVEC内的表达及转染效率。结果 Lipofectamine^(TM)2000阳离子脂质体介导组有少量细胞可见弱荧光信号,而电穿孔法转染组可见较强荧光信号,其中以电击条件为电场强度1100 V、脉冲时间20 ms、电击2次的转染效率最好。结论电穿孔法介导的血管内皮细胞基因转染效率较高,可作为血管内皮细胞的外源基因转染的方法。 章倩倩 丁一 刘红英 刘翼龙 陈胜霞 胡曦文 王丽京关键词:人脐静脉血管内皮细胞 基因转染 阳离子脂质体 电穿孔 穿心莲内酯对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及其机制研究 被引量:11 2019年 【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖的影响;采用Annexin V—碘化丙啶(PI)双染法、Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测凋亡相关蛋白如Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PAPR),周期相关蛋白如周期素B1(cyclin B1)、周期素依赖性激酶1(CDK1)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白如m TOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的表达。【结果】穿心莲内酯5、10、20、30、40、50μmol/L组24、48、72 h MHCC97H细胞增殖率下降,且随着Andro浓度、处理时间的增加而逐渐降低。Andro 25、50μmol/L组12、24、48 h MHCC97H细胞凋亡率均升高,呈浓度和时间依赖性。Andro 50μmol/L组48 h MHCC97H细胞发生G2/M期阻滞。与溶剂对照组比较,Andro 50μmol/L组中促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达升高(P<0.05或P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01),周期蛋白cyclin B1和CDK1表达及mTOR信号通路蛋白mTOR、p70S6K的磷酸化水平均下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】Andro可能通过调控MHCC97H细胞凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP、Bcl-2及周期相关蛋白cyclin B1、CDK1的表达及抑制mTOR-p70S6K信号通路的激活,促进细胞凋亡及细胞周期阻滞,从而发挥体外抗肝癌作用。 刘红英 王协奇 袁丽娜 刘影 彭燕 罗碧怡 何青莲关键词:穿心莲内酯 肝癌 细胞增殖 细胞周期 MTOR信号通路 商品化HE染色试剂的高效利用 被引量:1 2015年 高质量的HE染色切片是病理医师做出准确诊断的重要条件。HE染色的主要材料为苏木精、伊红,目前多数医院病理采用人工配制,其缺点是费时,染液质量不稳定。而商品化的苏木精、伊红染料质量稳定,可省去配制的时间,使用起来非常方便,但却因价格贵而应用较少。 罗碧怡 何青莲 李楚天 彭燕 闫岩 黄镇栋 刘红英关键词:HE染色 穿心莲内酯对前列腺癌细胞的增殖及神经内分泌分化的抑制作用 被引量:2 2016年 目的探讨穿心莲内酯(Andro)对前列腺神经内分泌癌细胞增殖及神经内分泌分化的影响。方法Andro处理前列腺癌细胞(PC3),用MTT法检测48 h时Andro作用的最大效应浓度及对PC3细胞增殖的时间依赖性;进一步提取细胞蛋白,通过Western blotting检测神经内分泌分化标志物(NSE、Cg A)表达情况。结果 Andro作用48 h时7.5μmol/L达到最大效应浓度,且随着时间的延长Andro抑制PC3细胞增殖的作用越显著;Andro能明显抑制PC3细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性。Western blotting检测结果显示,NSE、Cg A是PC3细胞中神经内分泌的标志物,Andro能显著抑制NSE、Cg A的表达。结论Andro可抑制PC3细胞增殖及神经内分泌分化。 周大磊 章倩倩 刘红英 段有发 王丽京关键词:穿心莲内酯 前列腺癌 细胞增殖 神经内分泌分化 TRAMP小鼠前列腺癌发生的病理进程观察 2014年 目的探讨不同周龄转基因前列腺癌小鼠模型(transgenic adenocarcinoma of mouse prostate,TRAMP)的病理学特点。方法TRAMP小鼠饲养于SPF级环境中,记录其生存周期;通过组织病理学切片、HE染色及免疫组化法观察不同周龄TRAMP小鼠前列腺的病理学变化、SV40Tantigen(Tag)表达及细胞增殖。结果TRAMP小鼠普遍生存周期为30~55周,随着周龄的增加其前列腺异型增生程度愈加明显,16周左右处于明显增生期,24周左右发生腺瘤,32周左右出现低分化癌,55周时发现明显的前列腺癌神经内分泌分化现象。免疫表型:随着周龄的增加,TRAMP小鼠前列腺上皮细胞Tag的表达增强且增殖明显。结论TRAMP小鼠可稳定自发前列腺癌,出现前列腺上皮内瘤、高分化腺癌、低分化癌和神经内分泌癌的病理学特点,可作为人类前列腺癌研究的经典动物模型。 刘红英 章倩倩 周大磊 雷岩 胡曦文 何晓东 张钰 王丽京关键词:前列腺肿瘤 病理进程 ^(1)H NMR代谢组学在筛选乳腺浸润性导管癌HER2阳性表达代谢标志物中的应用 被引量:1 2022年 目的分析乳腺浸润性导管癌患者人类表皮生长因子受体2(HER2)基因表达阳性组与阴性组血清代谢组上的差异,为临床HER2表达的准确判读提供参考。方法选取经乳腺穿刺活检被确诊为浸润性乳腺癌的68例女性患者作为研究对象,根据免疫组织化学染色(IHC)结果将其分成两组,包括HER2表达阳性组26例,HER2表达阴性组42例。采用核磁共振波谱仪对两组患者的血清进行图谱采集,应用正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)分析两组间的代谢差异,并使用SPSS软件对代谢物对应图谱的积分面积进行统计分析。结果OPLS-DA分析显示乳腺浸润性导管癌患者HER2表达阳性组与阴性组之间的血清代谢特征存在明显差异。与HER2表达阴性组患者相比,HER2表达阳性组患者血清中亮氨酸/异亮氨酸、丙氨酸、醋酸、谷氨酸盐、牛磺酸的含量显著升高(P<0.05);而3-羟基丁酸、脂质(主要是VLDL)、乳酸的含量显著下降(P<0.05)。结论乳腺浸润性导管癌患者HER2表达阳性与阴性在血清代谢组上差异明显,差异代谢物或可作为潜在的代谢标志物,为临床HER2表达的准确判读提供辅助参考。 刘影 阳宇 郑细闰 刘红英 吴云山 郑广娟关键词:代谢组学 乳腺浸润性导管癌 p110δ突变失活的Apc^(Min/+)结直肠癌癌前病变小鼠模型的建立 被引量:1 2014年 目的:建立p110δ突变失活的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型,为研究p110δ在小鼠结直肠癌癌前病变中的作用提供实验模型。方法:将C57BL/6J背景的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠与p110δ突变失活小鼠(p110δD910A/D910A)进行杂交建系,通过PCR技术鉴定子代小鼠基因型,获得p110δ突变失活的ApcMin/+小鼠。对适龄小鼠进行肠道取材,亚甲蓝染色后,观察肠道结构,对腺瘤和微腺瘤进行统计。肠道组织进行石蜡包埋、切片,做HE染色进行进一步观察。结果:获得p110δ突变失活的ApcMin/+杂交鼠(ApcMin/+;p110δD910A/D910A)并得以稳定传代。ApcMin/+;p110δD910A/D910A杂交小鼠的肠道组织中,腺瘤数目和体积比ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠均有减少。结论:成功建立p110δ突变失活的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型,并得到小鼠肠道肿瘤的初步表型,为进一步研究p110δ在肠道肿瘤发生发展中的作用提供重要的工具动物。 胡曦文 章倩倩 雷岩 刘红英 周大磊 陈佳园 王丽京关键词:转基因小鼠 一种生物色标在冰余石蜡制片中的应用体会 被引量:1 2022年 近年来随着医疗水平的迅速发展,术中冷冻技术成为病理诊断不可或缺的手段之一,但由于冷冻制片的局限性,术中冷冻病理诊断存在一定的误诊率[1-2]。冰余术后石蜡切片技术能够明确诊断,并进一步佐证术中冷冻诊断的准确性,为临床后续治疗提供可靠依据。实际工作中有时会出现两者诊断相悖的情况[3],这是因为冰余组织经脱水后难以还原冷冻的情况,从而导致原冷冻切面中具有诊断意义的病灶在石蜡切片中无法体现。为解决上述问题,本科室通过不断实践,运用生物色标来标记乳腺癌切缘标本的冷冻样本头,其能够有效提高冰余包埋及切片的工作质量和效率,从而提高冷冻诊断与石蜡诊断的符合率,现介绍如下。 李晓 曹卓 李明显 刘红英 黄镇栋 郑广娟 何青莲关键词:符合率