刘静
- 作品数：22 被引量：103H指数：4
- 供职机构：中国科学院成都生物研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院西部之光基金四川省科技计划项目河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 重叠延伸PCR克隆三孢布拉霉carRA基因及其功能活性检测系统的构建被引量：3
- 2011年
- 三孢布拉氏霉菌CarRA蛋白,既有番茄红素环化酶功能活性又有八氢番茄红素合成酶功能活性,为了对CarRA蛋白进行双功能活性分析,及探测CarRA蛋白的番茄红素环化酶功能活性位点,构建了在大肠杆菌体内通过颜色互补检测两种酶活性的系统。通过重叠延伸PCR的方法克隆得到了carRA基因,并构建原核表达载体pET28a-carRA,与携带crtI/crtB/crtE基因簇的质粒pAC-LYC共转化BL21(DE3),验证番茄红素环化酶功能活性;与以pAC-LYC为基础构建的携带crtI/crtE基因簇的质粒pAC-LYC△(crtB)共转化BL21(DE3),验证八氢番茄红素合成酶功能活性。通过颜色互补的初步鉴定,再以HPLC对代谢产物进行分析,明确了实验中的CarRA蛋白功能活性检测系统的可靠性,为定点突变番茄红素环化酶活性位点而不影响八氢番茄红素合成酶功能活性提供了筛选模型。
- 汤晖石楠于淼刘龙刘静贾颖牛宏彦张利平
- 关键词：重叠延伸PCR八氢番茄红素合成酶
- 甘草根愈伤组织诱导与可溶性蛋白含量变化被引量：4
- 2018年
- 利用胀果甘草无菌苗根作为外植体诱导愈伤组织,经过多次继代培养筛选出4种类型的愈伤组织,并以不同质量浓度的NaCl胁迫处理Ⅰ型愈伤组织.测定了在根愈伤组织诱导过程中,不同类型愈伤组织继代培养中和Ⅰ型愈伤组织在NaCl胁迫处理条件下的生长情况及可溶性蛋白含量的变化情况.结果显示,以苗龄10d的无菌苗根为外植体可以诱导产生愈伤组织,以MS培养基附加1.0mg/L 2,4-D和0.2mg/L6-BA时,根愈伤组织的诱导率最高,继代培养生长状况良好为Ⅰ型愈伤组织;根外植体两端开始形成愈伤组织时可溶性蛋白含量最高,为2.01mg/g;不同培养基上继代培养的根愈伤组织生长状态不同,可溶性蛋白含量也有不同,以Ⅰ型愈伤组织中可溶性蛋白含量最高;Ⅰ型愈伤组织在5g/L NaCl胁迫下,继代培养21d后,愈伤组织生长量明显提升,在14~21d愈伤组织可溶性蛋白含量明显提高.本研究表明甘草愈伤组织对低质量浓度的盐胁迫有一定的适应性,使其可溶性蛋白含量升高,在可溶性蛋白含量剧烈变化期间,愈伤组织生长量明显提高.
- 马健梁玉玲潘笑刘静
- 关键词：胀果甘草愈伤组织盐胁迫可溶性蛋白
- 基于线粒体DNA控制区的斑翅草螽不同地理种群遗传分化研究被引量：1
- 2013年
- 采用PCR扩增结合DNA克隆测序技术,分析了斑翅草螽Conocephalus maculates 9个地理种群mtDNA控制区序列的变异及遗传多样性。切除侧翼RNA基因序列后,最终获得的斑翅草螽mtDNA控制区比对后全长为676 bp,平均碱基组成T(37.8%),C(11.7%),A(41.3%)和G(9.1%)。共检测到98个可变位点,占总位点数的14.5%,其中,9处碱基插入/缺失,74处转换(40个T/C,34个A/G),50处颠换(18个A/T,11个T/G,15个A/C,6个C/G)。共定义46个单倍型,其中,4个为种群间共享单倍型(H02、H05、H08和H10),其余42个为各种群独有单倍型,包括6个种群内共享单倍型(H09、H11、H15、H18、H26和H38)。单倍型总数占实验个体总数的69.7%,除四川峨眉山外,其余种群单倍型百分比均﹥50%。通过两两地理种群间的FST值差异显著性检验,将这些群体分为4组,分别为SC+CQ,GX+FLB+HN+YN,XZ和HB。以长瓣草螽C.gladiatus、峨眉草螽C.emeiensis、悦鸣草螽C.melaenus、竹草螽C.bambusanus为外群,构建的斑翅草螽mtDNA控制区单倍型NJ法系统树形成3个自举支持度较高的分支,其中,分支A由28种单倍体组成,包括本研究中除四川峨眉山(SC)和重庆万州(CQ)以外的7个种群;分支B由12种单倍体组成,包含除菲律宾拉乌尼翁(FLB)和江西南昌(JX)以外的7个种群;分支C由6种单倍型组成,全部来自西藏林芝(XZ)的单倍型。聚类结果表明,斑翅草螽不同地理种群间的遗传分化并不明显,即使是两两群体间FST值差异显著的群体,也未能形成完全独立的分支。
- 周志军尚娜刘静常岩林石福明
- 关键词：线粒体DNA控制区系统进化
- 一种检测小麦高籽粒蛋白质含量的引物、试剂盒、检测方法及其应用
- 本发明公开了一种检测小麦高籽粒蛋白质含量的引物、试剂盒、检测方法及其应用；所述引物的上游引物序列如SEQ ID NO：Ⅰ所示，下游引物序列如SEQ ID NO：Ⅱ所示。本发明所提供的检测小麦高GPC的方法可靠、简便、实用...
- 王涛冯波金秀锋徐智斌樊小莉刘静
- 小麦株高性状的全基因组关联分析
- 株高是影响小麦产量潜能的重要因素,且为多基因控制的数量性状。本研究利用高密度的小麦90K SNP芯片对西南麦区192份小麦品种(25份合成六倍体,80份地方品种,87份育成品种)进行株高性状的全基因组关联分析。结果共发现...
- 刘静冯波徐智斌樊小莉王涛
- 关键词：小麦株高全基因组关联分析
- 文献传递
- 一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法
- 本发明涉及石斛无性繁殖技术领域。目的是提供一种育苗周期短、幼苗形成率高、操作流程简单的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法。采用的技术方案是：通过植株筛选，从长势健壮的铁皮石斛上取茎尖或是带一个茎节的茎段作为外植体。制备培养基...
- 胡亚东淳泽张雪琴刘静赵若茜郑世刚
- 文献传递
- 一种石斛单细胞悬浮培养的方法
- 本发明属于植物细胞生物工程领域，具体涉及一种石斛单细胞悬浮培养的方法。包括一种细胞培养液，及用该细胞培养液培养石斛细胞的方法。细胞培养液的组分为：1/2MS、MES、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、CaCl<Sub>2</Sub>...
- 胡亚东淳泽刑嘉懿刘静赵若茜郑世刚
- 一种新型细胞固定剂
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种新型细胞固定剂。采用的技术方案是：将L‑抗坏血酸作为一种新型细胞固定剂，应用于免疫荧光技术。本发明首次报道了L‑抗坏血酸可以作为细胞固定剂对细胞进行固定。经L‑抗坏血酸固定的细胞不仅能...
- 胡亚东刘静淳泽赵若茜郑世刚
- 中国鲷科鱼类骨骼系统比较及属种间分类地位探讨
- 为进一步探讨鲷科鱼类分类和系统进化关系长期存在的争议问题，本文采用常规方法制备采自中国沿海鲷科5属8种鱼类的骨骼标本，并进行比较分析。依据尾舌骨腹缘是否分叉、前颌骨犬牙数目、筛骨背面中央为纵嵴或为凹窝、蝶耳骨后侧缘是否与...
- 陈咏霞刘静刘龙
- 关键词：鲷科骨骼系统形态学
- 迭鞘石斛乙醚提取物对肺癌细胞抑制机制的定量蛋白质组学研究被引量：7
- 2019年
- 迭鞘石斛Dendrobium denneanum作为名贵中药材具有悠久的使用历史,研究发现其乙醚提取物相比传统的醇或水提取物对肺癌细胞具有更强的抑制作用,具备更好的开发前景。该研究采用基于SILAC(stable isotope labeling with amino acids incell cultures)的定量蛋白质组学方法,从蛋白质组层面对迭鞘石斛乙醚提取物抑制人肺癌细胞A549的作用机制进行了系统研究,共检测到A549细胞的4 855种蛋白。数据分析显示迭鞘石斛乙醚提取物导致A549细胞中237种蛋白的表达出现明显差异,其中193种蛋白含量出现明显的上调,44种蛋白含量出现明显的下调。差异表达蛋白主要与细胞内生物大分子的合成运输及代谢、分子伴侣、DNA修复、氧化还原酶、细胞黏附、细胞周期、细胞凋亡与自噬等功能相关。结果显示,迭鞘石斛乙醚提取物会严重紊乱肺癌细胞内蛋白等物质的代谢过程,诱发内质网应激反应,同时使细胞的自我修复机制出现异常,导致细胞的黏附与增殖功能受损。另一方面,乙醚提取物会引起肺癌细胞内ROS水平的剧烈升高,同时使细胞内的氧化还原系统发生紊乱。在上述多重因素的影响下,肺癌细胞启动细胞凋亡和细胞自噬等多种进程,加速细胞的死亡。该研究结果从蛋白质组层面系统阐释了迭鞘石斛乙醚提取物抑制肺癌细胞的作用机制,为迭鞘石斛乙醚提取物的抑癌作用研究提供了理论基础,有利于从迭鞘石斛乙醚提取物中开发出新型的抗癌药物。
- 张雪琴李莹刘静刘静赵若茜郑世刚淳泽淳泽
- 关键词：迭鞘石斛乙醚提取物肺癌细胞定量蛋白质组学
