向柱方
- 作品数：8 被引量：21H指数：2
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌蛋白A与HIV-1 gp41的酿酒酵母表面展示及应用
- 酵母表面展示技术在各种功能蛋白质的展示与应用研究中取得很大的进展,将功能蛋白展示在酵母细胞表面,在抗体筛选、制备和检测中得到了应用。
艾滋病(AIDS,acquired immunodeficiency syn...
- 向柱方
- 关键词：酵母细胞酵母基因组免疫荧光染色阴性对照兔血清
- 一株可利用甘蔗渣水解液发酵酒精的菌株筛选被引量：8
- 2004年
- 甘蔗渣是一种制糖工业废料 ,主要含有丰富的纤维素类物质 ,纤维素类物质由五碳糖和六碳糖组成 ,通过粉碎 ,用 1%NaOH碱预处理 2 4h ,在 12 1℃、pH1 0的条件下水解 1h ,不同的酵母利用水解液发酵生产酒精的研究结果表明 :假丝酵母 1779能高效地利用水解液中的葡萄糖、木糖 ,转化生产酒精 ,发酵 4 8h ,测得发酵液中的酒精含量达 0 978g/ 10 0mL ,折合成干物质转化率为 13 0 4 %。
- 张聚宝林影向柱方吴晓英
- 关键词：酒精甘蔗渣菌株筛选纤维素木糖
- HIV-1 gp41的酵母表面展示及表达优化被引量：2
- 2008年
- 以His标签检测蛋白的表达,利用酿酒酵母表面展示系统,成功地将HIV-1 gp41片段锚定在酵母表面,并检测到gp41的活性。以pMD18T-gp41为模板,通过PCR技术克隆了gp41基因,将gp41基因通过双酶切连接到载体pICAS-His上,构建了gp41酵母表面展示载体,并将其转化至酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)MT8-1中。重组菌经培养,利用免疫荧光染色方法进行染色,显微镜观察发现重组酵母细胞表面有绿色荧光,流式细胞仪结果进一步证实gp41正确折叠展示于酵母细胞表面。采用不同浓度的葡萄糖培养基进行表达优化。当葡萄糖浓度为1%时,82.46%的酵母细胞表达了gp41抗原;随着葡萄糖浓度升高,蛋白表达受到抑制。
- 向柱方林影叶波韩双艳赵树进
- 关键词：HIV-1GP41免疫荧光染色流式细胞仪
- 酵母细胞表面展示HIV-1 gp41用于血清中抗体的检测的研究(英文)
- 2008年
- 以Hexa-His和Flag为标签,利用酵母表面展示技术将HIV-1囊膜蛋白gp41展示于酿酒酵母(Saccharomycws cerevisiase)细胞MT8-1表面.流式细胞测定结果表明His标签成功展示于重组酵母细胞MT8-1/pICAS-His和MT8-1/pICAS-His-gp41表面;活性的gp41成功展于重组酵母MT8-1/pICAS-His-gp41表面,荧光显微镜观测结果表明了这一点;Flag标签可以在TM8-1/pICAS-Flag表面检测到,但Flag和gp41均不能在MT8-1/pICAS-Flag-gp41表面检测到活性.利用展示在酵母表面的gp41蛋白建立酵母细胞CbELISA体系,可成功用于检测单克隆抗体,其浓度达到了10 ng/mL,此体系可用于检测血清中的抗体.
- 向柱方赵树进杜红丽林影
- 关键词：HIV-1GP41免疫荧光标记
- 假丝酵母Candida sp.木糖发酵生产乙醇被引量：9
- 2006年
- 研究了供氧水平、培养基初始pH值、木糖质量浓度等条件对假丝酵母1779A木糖发酵生产乙醇的影响.结果表明:在温度(30℃)、转速(150 r/m in)恒定的条件下,假丝酵母木糖发酵生产乙醇适宜在半好氧条件下进行,乙醇产生的最适初始pH值为5.0,最适木糖质量浓度为60 g/L,最大乙醇转化率为62.1%.假丝酵母木糖发酵生产乙醇存在葡萄糖效应,以葡萄糖与木糖的质量比3∶1混合发酵生产乙醇时的产量比单独木糖发酵生产时的高57.6%.
- 林影张聚宝向柱方
- 关键词：假丝酵母木糖乙醇
- 金黄色葡萄球菌功能蛋白的酵母表面展示被引量：2
- 2007年
- 利用酿酒酵母表面展示系统,成功地将金黄色葡萄球菌功能蛋白ZZ锚定在酵母表面,并进一步用展示有蛋白ZZ的酵母细胞纯化出兔IgG.以pEZZ18为模板,通过PCR技术克隆了ZZ基因,将ZZ基因通过双酶切连接到穿梭载体pICAS,构建了酵母表面展示载体pICZZ,并将其转化至酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)MT8-1中.核酸电泳结果表明ZZ基因成功整合到了酵母基因组中.重组菌经培养,利用免疫荧光染色方法进行染色,显微镜观察表明ZZ蛋白已经展示在酵母细胞表面,流式细胞仪分析结果证实80.4%的酵母细胞表达了ZZ蛋白.利用展示有蛋白ZZ的酵母细胞吸附兔血清中的IgG,洗脱后进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电脉,并进行W estern blot免疫印迹,结果表明,此重组酵母细胞纯化的兔IgG比标样兔IgG纯度更高.
- 向柱方林影王小宁赵树进韩双艳
- 关键词：酿酒酵母免疫荧光染色流式细胞仪
- 酵母细胞表面展示技术在抗体筛选中的应用
- 本文主要介绍了抗体scFv和Fab片段在酵母表面的展示体系,以及进一步利用荧光活性细胞分选技术进行人源抗体筛选、抗体体外成熟和抗体酶的进化的实例。
- 林影向柱方张聚宝吴晓英
- 关键词：酵母细胞抗体酶
- 文献传递网络资源链接
- HIV1 gp41核心结构域在酿酒酵母的表面展示
- 艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种后天性人类免疫缺陷综合症。HIV属于囊膜病毒,其囊膜蛋白复合物控制着病毒进入靶细胞的关键步骤,即决定着病毒趋向性和促进病毒基因组进入靶细胞以及感染细胞与邻近的...
- 林影叶波向柱方梁书利韩双艳
- 文献传递
