吴丹
- 作品数：19 被引量：28H指数：3
- 供职机构：牡丹江医学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 一种神经连接蛋白1的截短蛋白及其应用
- 本发明涉及生物领域，具体讲，涉及神经连接蛋白1的截短蛋白及其应用。神经连接蛋白1的截短蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明经实验发现，通过筛选获得的截短蛋白能缓解Aβ1‑42对SH‑SY5Y细胞的增殖抑制...
- 吴丹郭艳芹袁晓环武艳史嘉翊张本卓黄青苏晓男
- 文献传递
- 姜黄素及其类似物抑制CCl4诱导大鼠肝纤维化的作用及机制研究被引量：2
- 2020年
- 目的研究姜黄素及其类似物抑制CCl4诱导大鼠肝纤维化的作用及机制。方法SD大鼠雄性40只,按体重随机分成模型组,对照组,姜黄素组,H8低、高剂量组,每组8只。模型组,姜黄素组和H8组腹腔注射40%CCl4橄榄油复制肝纤维化模型,8周后姜黄素组,H8低、高剂量组给予相应药物灌胃,同时每周腹腔注射40%CCl4橄榄油一次,共4周。处死大鼠后,检测血液生化指标,肝组织HE和Masson染色观察病理形态学变化,QPCR测Col1、纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA。结果模型组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清谷氨酰转肽酶(GGT)、肝脏系数、Col1、FN、TGF-β、α-SMA mRNA显著高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。姜黄素组,H8低、高剂量组血清ALT、AST、GGT、肝脏系数、Col1、FN、TGF-β、α-SMA mRNA显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素及其类似物H8对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有保护作用,且H8作用优于姜黄素。
- 王子恺毛泳彬孔力钟星孙晓雯吴丹袁晓环
- 关键词：四氯化碳肝纤维化病理形态学
- 截短型神经连接蛋白-1原核表达载体的构建、表达、纯化及其对阿尔茨海默症的初步治疗效果
- 2022年
- 目的克隆并构建5种截短型神经连接蛋白-1(tneuroligin-1,tNL-1)可溶性细胞外片段的原核表达载体,经表达、纯化后获得重组GST-tNL-1融合蛋白,初步探讨其对阿尔茨海默症(Alzheimer disease,AD)的治疗效果。方法对神经连接蛋白-1(neuroligin-1,NL-1)的结构特征及理化性质进行生物信息学分析。利用NL-1细胞外片段设计5个截短片段(tNL⁃1①~⑤),以NL-1细胞外片段1-691质粒为模板PCR扩增目的片段,构建pGEX-6P1-tNL⁃1原核表达载体,筛选最佳诱导条件后,表达重组tNL-1蛋白,经GST亲和层析法纯化重组蛋白。制备β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)寡聚体,并进行Western blot鉴定。将体外培养的人SHSY-5Y细胞随机分为3组:对照组(不加任何干预)、模型组(40μg/mL Aβ处理24 h)、实验组(Aβ与20、40、60μg/mL tNL-1②共处理24 h),MTT法检测tNL-1②对Aβ诱导的SHSY-5Y细胞的保护作用。结果NL-1有12个蛋白修饰位点,预测其中有8个修饰位点两两相关联,据此关联设计了5个截短体。质粒pGEX-6P1-tNL⁃1经双酶切及测序鉴定证明构建正确。最佳诱导条件为:37℃培养2 h,A600为0.8时降温至16℃,加入0.1 mmol/L IPTG诱导12 h。表达及纯化的重组tNL-1①~⑤蛋白相对分子质量分别约为68000、90000、66000、53000和62000,大小均与预期相符,且可被抗体特异性识别。制备的Aβ寡聚体在相对分子质量约4000和12000处条带明显,主要以单体和三倍体形式存在。MTT结果显示,与对照组相比,模型组细胞生存率明显下降(P=0.001);与模型组相比,实验组细胞生存率均明显升高(P<0.001)。结论Aβ对SHSY-5Y细胞存在毒性作用,制备的tNL-1能缓解Aβ对SHSY-5Y细胞模型的的增殖抑制作用。后续会将tNL-1蛋白应用于更多体内外试验中,为AD的治疗提供新思路。
- 苏晓男毕鹏翔李超黄青于欣洋吴丹郭艳芹
- 关键词：阿尔兹海默症纯化突触
- 基于创新型人才培养的基因工程课程教学实践与思考被引量：2
- 2022年
- 培养创新型人才顺应我国当前科学研究和创新发展的趋势,是我国当前社会进步和经济发展的必然要求。在当前时代背景下,普通高等院校基因工程课程也要进行教学内容更新与教学方法改革,以达到创新型人才的培养目标。本文对基于创新型人才培养的基因工程课程进行教学实践与思考。
- 吴丹史嘉翊宋旭东邱羽菲张羽飞武艳
- 关键词：创新型人才基因工程教学研究创新创业
- 对瘢痕成纤维细胞生长具有抑制作用的蛋白质的应用
- 本发明提供了如SEQIDNO：3所示序列的蛋白质及其在制备抑制瘢痕成纤维细胞生长和/或瘢痕形成的药物中的应用。
- 初彦辉刘海峰王小花袁晓环赵冰海刘洁婷郭冉吴丹
- 中药治疗肿瘤研究概况被引量：8
- 2011年
- 癌症已成为人类面临的一大杀手。近年来国内外抗癌药物的研究已逐渐转向天然动植物,中医药治疗肿瘤渐渐成为肿瘤治疗领域的一个新途径。国内外临床研究表明:单独使用中药治疗或中西医结合治疗肿瘤具有确切的疗效,同时能有效降低放疗、化疗的毒副作用。本文就对近年来中药治疗肿瘤的研究进展作简要介绍。
- 吴丹李洪志刘洁婷袁晓环初彦辉
- 关键词：中药肿瘤细胞凋亡
- 一种新型的截短型转化生长因子-βⅡ型受体的构建被引量：1
- 2011年
- 目的设计并构建一种新型的截短型转化生长因子-βⅡ受体(tTGF-βRⅡ)。方法 RT-PCR方法扩增TGF-βⅠ的CDS序列、tTGF-βRⅡ,并将其分别克隆至pGBKT7和pGADT7载体中。利用酵母双杂交和GST-pulldown试验检测tTGF-βRⅡ与TGF-βⅠ间的相互作用。人工合成该tTGF-βRⅡ多肽。结果成功地设计并克隆了一种新的tTGF-βRⅡ,其可以与配体TGF-βⅠ结合。结论制备的tTGF-βRⅡ可以作为TGF-βRⅡ的拮抗剂,竞争性的与TGF-βⅠ结合,为瘢痕治疗奠定了基础。
- 吴丹刘洁婷李洪志赵冰海袁晓环初彦辉
- 关键词：转化生长因子Β酵母双杂交
- Neuroligin-1细胞外域的表达、纯化与鉴定
- 2021年
- 目的克隆神经连接蛋白-1(Neuroligin-1,NL-1)细胞外基因片段1-691aa(NL1/1-691),插入载体pGEx-6p-1,并进行表达、纯化与鉴定。方法优化并常规合成基因NL1/1-691,添加5'BamHI和3'XhoI酶切位点,将基因通过5'BamHI and 3'XhoI酶切位点克隆至载体pGEX-6p-1(氨苄青霉素抗性)上,构建质粒pGEX-6p-1-NL1/1-691,筛选阳性克隆,转化至大肠杆菌C43感受态细胞中,蛋白质纯化筛选最佳诱导表达条件并获得目的蛋白;通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)对蛋白进行鉴定。结果经质粒双酶切鉴定、菌液PCR鉴定后,pGEX-6p-1-NL1/1-691原核表达载体构建成功。各个温度诱导下NL1/1-691蛋白均呈包涵体表达,表达优化后可将NL1/1-691从GST磁珠上纯化下来,得到部分可溶性蛋白,Western blot鉴定纯化蛋白为带GST标签的目的蛋白NL1/1-691。结论本实验室成功得到NL1/1-691重组蛋白,NL1/1-691最佳纯化条件为:37℃培养3 h加IPTG诱导为最佳诱导时机,IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L,最佳诱导时间为12 h。将其应用到后续实验,有望为阿尔兹海默病的治疗提供新的思路。
- 苏晓男毕鹏翔黄青于欣洋吴丹吴丹
- 关键词：阿尔兹海默病蛋白表达纯化
- 原发性肝癌患者外周血中TGF-β1 mRNA表达水平的检测及其临床意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨在原发性肝癌外周血TGF-β1 mRNA表达水平对肝癌发病的影响及其诊断和鉴别价值。方法采用RT-PCR方法检测72例原发性肝癌患者和70例正常对照者外周血中TGF-β1 mRNA的表达水平。结果肝癌患者组与健康对照组TGF-β1 mRNA水平差异显著(P<0.05),早期肝癌与中晚期肝癌TGF-β1 mRNA水平比较差异显著(P<0.05),肝细胞癌组与其他类型肝癌的TGF-β1 mRNA水平比较无显著差异。结论 TGF-β1 mRNA表达水平升高与原发性肝癌的发病相关,且随病程发展会逐渐升高。
- 武艳袁晓环张羽飞刘海峰包海花吴丹初彦辉
- 关键词：原发性肝癌外周血TGF-Β1MRNA
- 重组人转化生长因子β1原核表达及多克隆抗体制备
- 2012年
- 目的克隆人转化生长因子β1(TGF-β1)基因,原核表达TGF-β1蛋白,制备兔抗人TGF-β1多克隆抗体。方法应用RT-PCR技术扩增人TGF-β1基因序列,构建pET-28a-TGF-β1重组质粒。转化至E.coli BL21(DE3)中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。Western-blot检测目的蛋白的抗原性。免疫新西兰白兔,获得兔抗人TGF-β1多克隆抗血清。饱和硫酸铵盐析法纯化多克隆抗体,间接ELISA法检测多克隆抗体效价,Western-blot技术进行抗体特异性检测。结果获得了TGF-β1编码序列和表达载体,目的蛋白主要存在于超声破碎后的包涵体中;经Western-blot检测目的蛋白存在抗原性;获得纯化的兔抗人多克隆抗体效价达1∶10 000。结论获得的兔抗人TGF-β1多克隆抗体效价较高,具有良好的特异性。
- 郭冉刘洁婷吴丹刘海峰初彦辉
- 关键词：转化生长因子Β1抗纤维化原核表达多克隆抗体
