周春雷
- 作品数：18 被引量：32H指数：4
- 供职机构：天津市第一中心医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 葡萄糖水平对自噬的影响研究进展
- 2022年
- 葡萄糖是一种重要的营养物质,在维持机体正常生理活动过程中起重要作用。当机体由于糖代谢紊乱或限制碳水化合物摄入而处于高血糖或低血糖状态时,可影响细胞自噬。自噬有益或有害,细胞在不利环境压力下通过适度自噬维持稳态,但超过自噬阈值细胞会发生损伤甚至死亡。近年来,葡萄糖影响自噬具体机制的研究取得了一定成果,同时靶向自噬治疗疾病也成为一种有前景的发展方向。因此,全面总结葡萄糖水平影响自噬的相关文献不仅可为自噬机制研究提供新的理论依据,也可为临床治疗疾病提供新思路。
- 杨澜杨磊周春雷范彩红王东强穆红
- 关键词：葡萄糖自噬细胞凋亡
- PKG抑制剂KT-5823对宫颈癌HeLa细胞活力、凋亡、自噬的影响
- 2023年
- 目的:明确宫颈癌HeLa细胞对环鸟苷酸依赖性蛋白激酶(PKG)抑制剂KT-5823的敏感性,探究KT-5823对HeLa细胞活力、凋亡和自噬的影响及机制。方法:使用不同浓度的KT-5823干预HeLa细胞24 h,CCK-8、免疫印迹试验分别测定细胞活力、PKG1表达水平,进而确定后续药物刺激浓度。将HeLa细胞分为两组,即DMSO组(对照组)和KT-5823组(实验组),流式细胞术检测细胞凋亡,GFP-LC3B荧光斑点实验检测自噬斑点形成数量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PKG1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin1 mRNA的表达水平,免疫印迹试验检测PKG1、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、自噬相关通路蛋白蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2家族蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)蛋白的表达水平。增加自噬抑制剂SBI-0206965组观察自噬在此过程中的作用。结果:与对照组相比,实验组在3~100μmol/L刺激浓度下均可导致HeLa细胞活力降低(t=10.23~14.83,均P<0.05),PKG1蛋白表达水平逐渐降低(t=10.01~14.17,均P<0.05)。最终选取3μmol/L为刺激浓度,用于后续研究。与对照组相比,细胞凋亡增加(t=10.78,P=0.004),荧光自噬斑点数量增加(t=10.12,P=0.0005),PKG1 mRNA、蛋白的表达水平降低(t=13.56,P=0.0002;t=5.461,P=0.0055)、LC3Ⅱ、Beclin1 mRNA(t=8.359,P=0.0011;t=5.782,P=0.0044)、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1蛋白(t=6.924,P=0.0023;t=11.84,P=0.0003)的表达水平增加,p-Akt/Akt(t=5.194,P=0.0065)、p-mTOR/mTOR(t=12.78,P=0.0002)、Bcl-2/Bax(t=13.79,P=0.0002)的比值降低,Caspase 3表达增加(t=9.341,P=0.0007)。与实验组相比,30、50、70、100μmol/L自噬抑制剂SBI-0206965组可增加细胞凋亡(t=7.616,P=0.0016;t=15.43,P=0.0001;t=11.01,P=0.0004;t=15.39,P=0.0001)。结论:PKG抑制剂KT-5823可有效抑制HeLa细胞增殖、促进细胞凋�
- 杨澜周春雷王艺霖董贺楠杨磊穆红
- 关键词：PKG宫颈癌自噬凋亡
- Treg/Th17细胞在胆道闭锁儿童肝移植术后急性排斥反应中的变化被引量：6
- 2019年
- 目的探讨胆道闭锁儿童肝移植术后急性排斥反应中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞17(Th17)的变化。方法以天津市第一中心医院2016年7月至2017年4月肝移植术后存在排斥反应的12例患儿作为排斥组,以肝移植术后存活1年以上、肝功能稳定的22例患儿作为稳定组。患儿术前原发病均为胆道闭锁、胆汁淤积性肝硬化。另以10例健康儿童作为对照组。排斥组患儿在出现肝功能异常后于抗排斥治疗前以及排斥治疗后1周分别留取外周血样;稳定组患儿在随访复查时采集静脉血样;对照组儿童于同期采集外周血样。所有样本于取血当日行流式细胞仪检测Treg细胞与Th17细胞比例。结果发生排斥反应时,无论是排斥组还是稳定组,Treg细胞比例均低于对照组(P<0.05)。但排斥组与稳定组比较差异无统计学意义(P>0.05)。排斥组的Th17细胞比例高于稳定组、对照组(P<0.05),稳定组高于对照组(P<0.05)。发生排斥反应的患儿治疗前CD3+CD8+CD28+T淋巴细胞比例明显高于对照组(P<0.05)。抗排斥治疗后Treg细胞与Th17细胞比例均较治疗前降低(P<0.05)。结论胆道闭锁儿童在肝移植术后发生急性排斥反应时,伴有Treg/Th17平衡失调。此种改变在抗排斥治疗后早期不能恢复正常。
- 王凯刘凯周春雷刘伟吴斌高伟
- 关键词：肝移植移植物排斥调节性辅助性T细胞17胆道闭锁儿童
- 不同浓度骨髓间充质干细胞对大鼠Treg / Th17平衡的影响被引量：5
- 2019年
- 目的探讨不同浓度骨髓间充质干细胞(BMSCs)对调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg / Th17)的影响。方法 SPF级雄性Wistar大鼠,选择3周龄、体重约50 g大鼠体外分离培养BMSCs,待细胞传代培养至第4代时进行鉴定;另选择6周龄、体重约200 g大鼠分离CD4^+ T淋巴细胞,用流式细胞仪检测细胞纯度。按BMSCs细胞浓度分为0.5倍浓度组、基础浓度组、2倍浓度组和4倍浓度组,细胞浓度分别为每孔1×10^5、2×10^5、4×10^5、8×10^5个,分别与CD4^+ T淋巴细胞混合培养72 h。用流式细胞仪检测各组Treg和Th17细胞比例,用流式微球分析技术检测相关细胞因子含量。结果 BMSCs和CD4^+ T淋巴细胞的纯度均在95%以上。不同浓度BMSCs与CD4^+ T淋巴细胞共培养后,Treg细胞比例在不同浓度BMSCs组间差异有统计学意义(F=10.071,P=0.001),以2倍浓度组BMSCs对Treg细胞的促增殖作用最强,Treg细胞比例明显高于0.5倍浓度、基础浓度和4倍浓度组〔(9.24±2.68)%比(3.87±0.38)%、(5.16±1.69)%、(3.86±0.36)%,均P<0.01〕。Treg相关因子白细胞介素-10(IL-10)水平在0.5倍浓度组最低,且明显低于基础浓度、2倍浓度和4倍浓度组(ng/L:39.80±14.48比148.43±64.49、156.40±59.27、126.92±42.95,均P<0.05);转化生长因子-β(TGF-β)水平在基础浓度组最高,且明显高于0.5倍浓度、2倍浓度和4倍浓度组〔ng/L:3.17(1.88,5.74)比0.71(0.32,1.38)、1.22(0.47,2.97)、0.52(0.37,1.23),均P<0.05〕。Th17细胞比例在不同浓度组间差异有统计学意义(F=21.069,P=0.000),以基础浓度组Th17细胞比例最高,且明显高于0.5倍浓度和4倍浓度组〔(0.89±0.08)%比(0.64±0.15)%、(0.37±0.10)%,均P<0.01〕,而与2倍浓度组〔(0.83±0.06)%〕比较差异无统计学意义(P>0.05)。Th17相关因子IL-17、IL-6水平在不同浓度组间差异均无统计学意义(IL-17:χ^2=0.550,P=0.760;IL-6:χ^2=0.010,P=0.995)。结论适中浓度的BMSCs 〔(2~4)×10^5个〕对大鼠Treg、Th17细胞均有促进作用,但浓度过
- 王凯李亚光周春雷刘伟吴斌高伟
- 关键词：间充质干细胞调节性T细胞辅助性T细胞17
- 尿道致病性大肠杆菌毒力因子与其抗生素耐药性之间的 关系被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨细胞毒性坏死因子1(CNF1)、溶血素A(HlyA)和菌毛蛋白FimH 3种毒力因子在尿道致病性大肠杆菌(UPEC)中的表达与其抗生素耐药性之间的关系。方法:选取天津市第一中心医院84例尿道感染(UTI)患者尿液样本中分离的UPEC,通过PCR实验检测其毒力因子基因的表达,并通过药物敏感性实验分析其耐药性,进一步探索UPEC毒力因子的表达与其抗生素耐药性之间的关系。结果:本研究通过PCR实验在71例(84.52%)UPEC分离株中检测到毒力基因的表达,其中cnf1^(+)UPEC菌株10例(11.90%),hlyA^(+)UPEC菌株9例(10.71%),fimH^(+)UPEC菌株69例(82.14%)。观察到45例(53.57%)UPEC为超广谱β-内酰胺酶(ESBL)阳性。cnf1^(+)UPEC菌株中ESBL阳性为6例(60.00%),hlyA^(+)UPEC菌株中ESBL阳性为7例(77.78%),fimH^(+)UPEC菌株中ESBL阳性为38例(55.07%),ESBL阳性率均高于其相应的阴性菌株。表达毒力因子CNF1、HlyA、FimH的UPEC分离株对多种抗生素的耐药率均高于其阴性分离株。结论:毒力因子的表达与UPEC对多种抗生素的高耐药性之间存在相关性。
- 王景雨周春雷王猛江雁董贺楠穆红
- 关键词：尿道感染毒力因子耐药性
- 新型冠状病毒肺炎疫情下检验科生物安全管理的实践与探索——以天津市第一中心医院为例被引量：7
- 2021年
- 对新型冠状病毒肺炎疫情下检验科生物安全管理工作进行总结与思考,为进一步工作提升奠定基础。以天津市第一中心医院检验科生物安全管理体系为例分析总结。通过加强生物安全管理,建立了完善的实验室生物安全管理体系,配备了符合标准的硬件设施和防护物资,完善了检验科内部、外部人员培训,完善了人员档案,完成了检验全过程的生物安全评估,加强了实验室消毒与清洁管理。新型冠状病毒肺炎疫情的发生对医院检验科的生物安全管理工作提出了前所未有的高标准,检验科对该方面工作应不断完善,并总结今后应对类似突发公共卫生事件的有效方法.
- 郑健穆红周春雷刘萍
- 关键词：检验科生物安全安全管理
- Treg/Th17细胞在胆道闭锁儿童肝移植围手术期的变化
- 2019年
- 目的探讨胆道闭锁患儿肝移植围手术期内CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)与辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)的表达规律。方法手术观察组患儿分别在肝移植术前1周内、术后2周、术后4周时,留取外周血标本。并选取术后1年以上的随访患儿及健康儿童作为对照。应用流式细胞仪检测肝移植术前后外周血中Treg细胞、Th17细胞比例。结果胆道闭锁患儿肝移植术前及术后早期各时间点的CD4+T淋巴细胞比例均高于健康对照组(P<0.05)。肝移植术前Treg细胞比例(4.04±0.71)%高于术后2周(2.16±0.72)%、术后1个月[(2.37%±0.79)%,P<0.01],但术后2周与术后1个月Treg细胞比例差异无统计学意义(P>0.05),术前及术后早期各时间点Treg细胞比例均低于健康对照组[(5.06±1.33)%,P <0.05)]。术后2周的Th17细胞比例(1.43±0.45)%与1个月的比例(1.17±0.47)%均高于健康对照组[(0.76%±0.30)%,P <0.05],但术前Th17细胞比例(1.09±0.46)%与健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后存活1年以上患儿的Treg细胞比例高于术后早期患儿(P<0.01),但Th17细胞的比例在两者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在胆道闭锁儿童中,肝移植术前的Treg细胞比例偏低,其在肝移植术后1个月内呈下降趋势;而Th17细胞比例在肝移植前较高,术后1个月内仍呈上升趋势。这种改变主要与胆道闭锁自身免疫失衡及肝移植术后移植物的刺激导致炎性反应相关。
- 王凯刘凯周春雷刘伟吴斌高伟
- 关键词：儿童肝移植胆道闭锁TH17细胞调节性T细胞
- 利用API 3200MD检测脂溶性维生素的方法学评价
- 2021年
- 目的对API 3200MD质谱仪检测脂溶性维生素的方法学特征进行评价。方法利用岛津高效液相色谱仪与API 3200MD串联,建立同时检测血清脂溶性维生素(维生素A1、25羟维生素D_2、25羟维生素D3、α维生素E和维生素K_1)的方法,评价该检测体系的定量限、精密度和准确度。结果API 3200MD检测维生素A_1、25羟维生素D_2、25羟维生素D_3、α维生素E和维生素K_1的定量限分别为<5.0 ng/mL、0.5 ng/mL、0.5 ng/mL、<0.1μg/mL和0.1 ng/mL。高中低三个浓度的日内CV为2.7%~11.9%,日间CV为3.3%~12.3%,均小于15.0%。两个浓度的正确度为88.3%~115.0%,偏差均未超过15.0%。结论API 3200MD质谱仪可用于脂溶性维生素的临床检测。
- 郑健李馨穆红周春雷
- 关键词：LC-MS脂溶性维生素
- 罕见血红蛋白变异体J-Sardegna干扰HbA1c检测1例报道
- 2024年
- 糖化血红蛋白(glycated hemoglobin A1c,Hb A1c)是血红蛋白β链-N端缬氨酸与葡萄糖结合而形成,反映近2~3个月血糖平均水平,是诊断糖尿病和评价糖尿病患者血糖控制情况的重要指标[1]。有多种因素可影响Hb A1c的检测,如红细胞寿命改变、恶性肿瘤或严重的肝肾疾病,以变异体的存在较为常见,常见的血红蛋白(hemoglobin,Hb)变异体包括Hb S、Hb E、Hb C和Hb D。随着临床对Hb A1c的关注,越来越多新的Hb变异体被发现,如Hb J-Bangkok、Hb New York、HbBeijing和HbG-Taipei。因此,在日常工作中识别新的变异体,并评估其对常用Hb A1c检测方法的干扰,是对检验科工作人员的考验。目前,Hb A1c检测方法分为两大类:1)基于Hb A1c与非Hb A1c所带电荷不同,如离子层析法、电泳法;2)基于Hb糖化基团的结构特点,如亲和层析法、离子捕获法和免疫法;高效液相色谱法和毛细管电泳法为推荐的参考方法。Hb变异体的干扰取决于所使用的检测方法和变异体的类型,天津市第一中心医院利用3种不同原理(高效液相色谱、硼酸盐亲和层析、毛细管电泳)的4种检测方法对Hb A1c进行检测,并通过测序确定位点突变和变异体类型,确诊1例罕见的Hb变异体病例。现介绍如下。
- 岳莹莹周春雷梁娜穆红
- 关键词：糖化血红蛋白糖尿病
- miR-155通过调控Smad2的表达抑制TGF-β的活性被引量：1
- 2013年
- 目的探讨miR-155对Smad2表达的调控及对TGF-β活性的影响。方法本研究以人单核细胞系THP-1为研究对象,利用miR-155 mimic改变miR-155的表达水平,用实时荧光定量PCR与Western Blot方法观察miR-155对Smad2表达的影响;以IL-1β激活THP-1细胞,用TGF-β抑制IL-1β介导的IL-6的分泌,利用miR-155 mimic提高miR-155的表达量,研究不同miR-155水平对TGF-β抑制活性的影响;利用双荧光素酶报告基因分析系统验证miR-155与Smad2 3'UTR区域的互补结合,以证实Smad2是miR-155下游的作用靶点。结果 miR-155可与Smad2 3'UTR区域互补结合,抑制THP-1细胞内Smad2 mRNA与蛋白的表达,部分逆转TGF-β对IL-6分泌的抑制作用。结论 miR-155通过调控Smad2的表达抑制TGF-β的活性,这可能是miR-155发挥促炎症作用的机制之一。
- 周春雷
- 关键词：MIR-155SMAD2TGF-Β炎症反应
