周继勇 作品数:333 被引量:753 H指数:16 供职机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 理学 更多>>
传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的遗传稳定性与免疫原性 被引量:20 2000年 将传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) JD1 、JD2 、NB变异毒株直接适应于鸡胚成纤维细胞上致弱。 3个毒株2 1代和 3 5~ 3 8代细胞毒分别连续回归鸡体 5代。结果表明 ,IBDV JD1 株 2 1~ 3 5代、JD2 株 3 7代、NB株 3 8代细胞毒对雏鸡已基本失去致病力 ,是毒力相对稳定的弱毒株。 IBDV JD1 、JD2 、NB变异株弱毒以 3 0 0 0TCID5 0 、50 0 0 TCID5 0 、1 0 0 0 0 TCID5 0 、1 50 0 0 TCID5 0 4个不同免疫剂量免疫 SPF鸡后的攻毒试验结果表明 ,JD1 、NB毒株的免疫效果明显优于 B87、Bursine3毒株疫苗 ,具有优良的免疫原性。JD1 、NB毒株的最佳免疫剂量分别为 50 0 0 TCID5 0 、3 0 0 0 TCID5 0 。抗体消长规律表明 ,JD1 株疫苗一次免疫后的有效保护期为 2 1 4d,最低有效中和抗体保护效价为 1∶ 4 0 71。 周继勇 李建荣关键词:传染性法氏囊病病毒 变异株 免疫原性 一种无毒Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用 本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株... 周继勇 李海敏 顾金燕 颜焰 董伟仁鸡CD25的克隆及组织表达分析 为更好地研究鸡IL-2与其受体(CD25)之间的相互作用机制,我们通过RT-PCR的方法从鸡脾单个脾细胞中克隆获得了由1027bp组成的chCD25的cDNA序列,并获得其mRNA的组织分布:在正常鸡的心肌、肺、肾、脑、... 滕巧泱 吴佳俊 方杰 郭军庆 周继勇关键词:白细胞介素-2受体 基因克隆 文献传递 抗重组鸡IL-2单克隆抗体的制备与鉴定 2004年 以纯化的重组鸡IL-2蛋白(rchIL-2)为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞进行筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,最终获得4株持续且稳定分泌抗鸡IL-2单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为:1A12、4A3、3E7和4E1.4株MAb的抗体类型均为IgG1,轻链为κ;MAb的ELISA效价分别为5.12×105、1.02×106、2.56×105和4.09×106.Western-blot分析表明,所获得的1A12、4A3、3E7和4E14株单克隆抗体与rchIL-2均有反应.MAb的制备成功为进一步开展chIL-2的功能研究奠定了基础. 李增魁 龚辉 陈吉刚 吴建祥 周继勇关键词:IL-2 单克隆抗体 实验性雏鸭隐孢子虫病病理学研究 被引量:7 1993年 30只10日龄无隐孢子虫感染的雏鸭口腔和气管内接种隐孢子虫卵囊,于接种后不同时期观察临床症状和扑杀,进行病理组织学和电镜观察。结果表明:隐孢子虫仅寄生于雏鸭呼吸系统、法氏囊皱褶粘膜上皮细胞的游离面和法氏囊固有层内淋巴滤泡的皮质和髓质交界处未分化上皮细胞表面,引起上皮细胞大量增殖、坏死、剥脱及真性细胞浸润,导致雏鸭细胞增生性气管炎、支气管肺炎和法氏囊炎。 周继勇 黎晓敏 聂奎 唐发书 曾子建 李安兴关键词:雏鸭 隐孢子虫病 病理组织学 鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离及分子特征研究 被引量:5 2013年 为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒(IBv)分子生物学特征及其变异情况,本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象,进行基因2~基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基因编码特征5’.S.3a.3b.E.M.5a.5b.N.3’,S蛋白裂解位点为ⅫRRSRR,,与美国株Gray、Holte、JMK、Conn46和韩国株SNU8067的s蛋白裂解位点相同。同源性比较和系统进化分析显示,WF2011分离株与常见的参考病毒株的同源性普遍较低,s1基因的同源性在49.7%~86.0%之间,并且与LX4、SAlBK和Mass类型的病毒株存在较大的遗传距离。WF2011是一株变异程度比较大的IBV变异株。 边葶苈 朱林文思 雷静 任景乐 李烨 周继勇 廖敏关键词:鸡传染性支气管炎病毒 变异株 遗传进化分析 一种禽流感H5、H7和NP蛋白抗体检测试剂盒及其应用方法 本发明公开了一种禽流感H5、H7和NP蛋白抗体检测试剂盒及其应用方法,其包括,单克隆抗体H5‑M5、H7‑M4和NP‑M1。本发明蛋白抗体诊断芯片用于快速地确定不同种属动物体内是否存在禽流感病毒NP蛋白抗体,且能同时区分... 周继勇 闫丽萍 肖倩文献传递 狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因在大肠埃希氏菌中的高效表达 被引量:11 2006年 为获得狂犬病病毒(RV)糖蛋白抗原,采用RT-PCR方法从狂犬病病毒ERA株中扩增了编码RV糖蛋白的全长基因,将其克隆于pMD18-T载体,再经PCR扩增出糖蛋白全长基因和膜外区基因,将其分别亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)、pET-32a(+)和pGEX-4T-1中,经PCR 和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21 (DE3)中进行表达,结果显示,克隆到pET-32a(+)的糖蛋白膜外区基因表达量最高,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45.4%。经Western-blotting检测,不同载体表达的糖蛋白膜外区产物均可与兔抗RV多抗发生特异性反应,表明,重组蛋白具有良好的反应原性。 蔡月琴 叶菊秀 李玲燕 周继勇关键词:狂犬病病毒 猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望 被引量:21 2015年 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引起猪的免疫抑制,是猪圆环病毒相关性系统疾病(PCV2-systemic disease,PCV2-SD)的主要病原,给养猪业带来了巨大的经济损失。文中从PCV2的进化历程、编码蛋白、对免疫系统的影响及技术防控四方面入手,对PCV2及PCV2-SD进行了全面回顾与展望。 顾金燕 邢刚 雷静 刘斐 周继勇关键词:PCV2 进化历程 编码蛋白 传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的培育及免疫原性 传染性法氏囊病病毒三个变异野毒株(IBDV-JD1、JD2、NB)和两个经典血清型Ⅰ毒株(HZ1、SC)直接在鸡胚成纤维细胞上传代,均能不同程度地产生细胞病变效应(CPE)。将五个毒株21代 周继勇 李建荣 王涟文献传递