周转
- 作品数：23 被引量：51H指数：4
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- 食管癌侵袭转移功能性抗体的制备被引量：1
- 2009年
- 目的:本研究旨在研制抗人食管癌侵袭转移功能性单克隆抗体,确定其抑制食管癌转移的特性。方法:用5例新鲜肺转移性食管癌原发瘤标本中分离的有核细胞免疫6只BALB/c小鼠。选择高血清效价小鼠脾细胞与S/P20细胞融合,采用HAT在甲基纤维素中选择培养。使用活细胞免疫荧光,迁移、侵袭、黏附、细胞增殖等方法筛选和鉴定有治疗价值的功能性单克隆抗体。结果:细胞融合挑选单个集落1260个。经活细胞免疫荧光筛选获得545株识别食管癌细胞膜蛋白的单抗。再通过免疫组化筛选获得了485株不与正常人食管组织反应的相对特异的单抗。通过对迁移、侵袭、黏附、增殖等功能筛选获得70株抑制迁移、32株抑制肺内皮黏附的相关单抗。结论:采用高通量制备、筛选、鉴定功能性单克隆抗体技术,获得了多株能够显著抑制食管癌细胞转移相关生物学行为和功能的单抗。
- 遇珑胡海周转潘建杨治华冉宇靓
- 关键词：食管癌
- 2006-2007年我院病原菌流行情况及耐药性分析被引量：2
- 2009年
- 周转李军民苗新平
- 关键词：病原菌耐药性
- DNA微阵列技术检测HLA-DRB1基因分型被引量：1
- 2009年
- 目的采用DNA微阵列分型方法,对HLA-DRB1基因进行分型研究。方法设计分型检测寡核苷酸探针,制备HLA-DRB1基因分型微阵列。设计PCR引物,以1:20引物比例不对称扩增HLA-DRB1基因的第2外显子,Cy3荧光标记扩增产物,作为杂交模板。用差异选择法杂交信号强且特异性好的探针。Cy3荧光标记PCR扩增产物与微阵列探针杂交反应,结果经荧光扫描,并用分型软件分析判断阳性探针和HLA-DRB1基因型。结果10例临床血样的DNA微阵列分型结果与PCR-SSP分型结果相符,20例未知血样的DNA微阵列分型结果与DNA测序分型结果符合率为97%。结论DNA微阵列技术具有高通量、简便、低成本的优势,采用DNA微阵列分型方法,对HLA-DRB1基因进行分型研究,表明HLA-DRB1DNA微阵列分型为一种可行的基因分型新技术。
- 周转胡守旺张帆
- 关键词：HLA-DRB1基因分型DNA微阵列PCR-SSP
- 抑制食管癌与肺血管内皮黏附的功能性抗体的制备被引量：6
- 2006年
- 目的制备抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性单克隆抗体,为研究食管癌转移的靶向治疗剂打下基础。方法以人食管癌新鲜组织分离的肿瘤细胞免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合后,采用活细胞荧光、ELISA、免疫组化、肿瘤细胞-内皮细胞黏附实验、Weasternbloting等方法筛选并鉴定抑制肿瘤细胞黏附的功能性单克隆抗体。结果共融合获得了1134株杂交瘤克隆,在能与食管癌细胞膜反应的486株克隆中,有294株与正常食管上皮不反应或低反应;筛选到15株单抗显著地抑制食管癌细胞与人正常肺血管内皮黏附,其中2株单抗识别的黏附分子相对分子质量分别为30000和60000。结论成功获得了多株具有抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性抗体,其中2株单抗具有治疗食管癌转移的潜在应用价值。
- 遇珑潘健周转冉宇靓胡海娄晋宁杨治华
- 关键词：食管癌肺血管内皮细胞功能性单克隆抗体
- 慢性乙型肝炎患者血清转化生长因子β_1、血小板衍生生长因子BB、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶抑制因子1与肝纤维化的关系研究被引量：2
- 2009年
- 周转
- 关键词：乙型转化生长因子Β1
- microRNA-10a对胃癌细胞系BGC823迁移和侵袭能力的影响被引量：16
- 2008年
- 目的:研究人微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对胃癌细胞系BGC823迁移和侵袭能力的影响。方法:利用Transwell小室对胃癌细胞系BGC823进行侵袭筛选,获得高侵袭能力的BGC823-P3亚系;通过miRNA芯片差异分析发现miR-10a在高侵袭能力BGC823-P3细胞的表达显著高于BGC823细胞。通过化学方法合成成熟型的人miR-10a,以脂质体包裹合成的miR-10a(25、50、100、150nmol/L)转染BGC823细胞,并设空白转染、无关序列转染对照组;Real-timePCR分别检测以上各组细胞miR-10a的表达。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测miR-10a对细胞增殖的影响,流式分析检测miR-10a对细胞凋亡的影响,Transwell小室检测miR-10a对细胞的迁移和侵袭能力的影响。结果:化学合成的成熟型miR-10a转染后,BGC823细胞miR-10a表达的提高以100nmol/LmiR-10a转染组最佳,较无关序列转染组提高了2.06倍。miR-10a(100nmol/L)的转染对胃癌细胞系BGC823的增殖和凋亡无明显影响,但对BGC823的迁移和侵袭能力有明显的促进作用,促进率分别为(88.34±0.61)%和(56.02±3.13)%。结论:转染成熟型人miR-10a能使胃癌细胞系BGC823中miR-10a的表达提高,并能显著促进胃癌细胞系BGC823的迁移和侵袭。
- 彭亮潘健胡海孙力超周转冉宇靓杨治华
- 关键词：胃癌细胞迁移
- 2001-2002年我院病原菌流行情况及耐药性分析被引量：4
- 2003年
- 周转李军民
- 关键词：病原菌流行病学耐药性抗菌药物
- 一种尿红细胞畸形率检测方法及系统
- 本发明属于医学技术领域，公开了一种尿红细胞畸形率检测方法及系统，尿红细胞畸形率检测方法首先进行样本图像采集和图像处理；然后执行图像读入，分割；消除杂质；标记；定位；诊断及报告，实现尿液红细胞的畸形形态分类和畸形率计算。本...
- 刘伟周转梁宝慧张有才何全利郭林张增增
- 文献传递
- 气管切开术后痰培养结果分析被引量：1
- 2008年
- 周转李军民苗新萍
- 关键词：气管切开术痰培养病原菌
- 靶向HER2的抑制胃癌细胞功能性单抗的制备和鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:制备可特异识别人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)膜抗原的单克隆抗体,筛选出亲和力较高并对胃癌细胞有明显抑制作用的克隆。方法:以高表达HER2膜抗原的人胃癌细胞系NCI-N87免疫BABL/c小鼠,免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,ELISA法筛选出HER2反应阳性克隆株,活细胞免疫荧光法检测获得膜阳性克隆株,使用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定抗体亚型,MTT法检测抗体对NCI-N87细胞增殖的抑制,采用与群司珠单抗的夹心ELISA和竞争抑制ELISA鉴定单抗结合HER2抗原的表位,免疫组化、Westernblotting进一步检测抗HER2抗体在不同条件下与HER2抗原反应情况。结果:细胞融合产生1442个单个集落的杂交瘤,重组HER2抗原ELISA筛选出HER2反应阳性克隆79株,活细胞免疫荧光检测获得较强膜阳性克隆7株,并测定其亚型,其中命名为15C15的1株属IgG1κ类单抗,免疫竞争及结合实验显示15C15与群司珠人源化抗体识别不同的表位。细胞增殖筛选显示15C15能显著抑制人胃癌NCI-N87细胞的增殖,在80μg/ml时抑制率可达34.8%。免疫组化显示15C15能识别部分石蜡包埋的HER2抗原,Westernblotting显示15C15不能结合电泳条件下变性为线形结构的HER2抗原。结论:建立了高通量制备、筛选和鉴定靶向HER2抑制胃癌细胞生长的功能性单抗技术,获得1株可特异识别HER2抗原的明显抑制胃癌细胞增殖的IgG1类单抗15C15,具有人源化改造后用于治疗的应用潜力。
- 孙立新冉宇靓胡海遇珑周转赵西路杨治华
- 关键词：胃癌NCI人表皮生长因子受体-2单克隆抗体
