尹志奎
- 作品数：69 被引量：180H指数：8
- 供职机构：新乡医学院药学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- GST沉降技术验证弓形虫醛缩酶与肌动蛋白的相互作用被引量：6
- 2011年
- 目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析法纯化表达产物。采用腹部皮内多点注射免疫SD大鼠15只,首次免疫Actin-His6蛋白量为200μg/只,第2次起免疫蛋白量为100μg/只,共免疫4次,每次间隔7 d,末次免疫后5 d收集心脏血,制备Actin-His6抗血清。以纯化的GST-Aldolase蛋白作为探针蛋白与Actin-His6蛋白液进行GST沉降实验,实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果获得了弓形虫aldolase和actin基因序列,构建了相应的原核表达载体。表达并纯化了GST-Aldolase和Actin-His6蛋白。Actin-His6蛋白免疫SD大鼠后获得其抗血清,经抗体亲和纯化柱纯化,获得Actin-His6多克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,GST沉降实验产物中的蛋白条带可被Aldolase-His6多克隆抗体和Actin-His6多克隆抗体识别。结论弓形虫醛缩酶与肌动蛋白存在相互作用。
- 郑斌尹志奎何蔼李卓雅詹希美
- 关键词：刚地弓形虫醛缩酶肌动蛋白蛋白相互作用
- 牛心左心室的形态学观测及其临床意义
- 2014年
- 目的观测豫北地区黄牛心脏左心室的解剖学结构,比较与人心左心室的异同,重点分析假腱索的临床意义。方法 10%甲醛溶液固定新鲜黄牛心脏28例,解剖后观测左心室主要结构。结果黄牛心脏左心室呈锥体形,其室壁厚度为(24.51±4.29)mm,与其他哺乳动物相似,分为左心室流入道及流出道,流入道主要结构及参数分别为:二尖瓣环周径为(145.24±20.80)mm,二尖瓣前尖、后尖宽度及高度分别为(56.68±11.65)mm、(30.48±5.96)mm和(93.48±14.86)mm、(25.59±5.33)mm,前尖、后尖层数为(6.16±0.93)层、(6.52±1.12)层;前乳头肌为1群的有19例(67.86%),2群的有9例(32.14%),后乳头肌为1群的有11例(39.29%),2群的有17例(60.71%);左心室流出道主要结构及参数为:主动脉瓣环周径平均为(99.61±21.13)mm,左瓣高度、右瓣高度、后瓣高度分别为(32.58±6.90)mm、(33.12±3.74)mm和(35.32±5.46)mm,其宽度分别为(12.35±1.05)mm、(12.00±0.98)mm和(13.45±3.00)mm;前乳头肌腱索至外侧连合、前尖、后尖的条数依次为(1.48±0.85)条、(4.84±1.70)条、(3.35±1.36)条;后乳头肌腱索至后内侧连合、前尖、后尖的条数分别为(1.71±0.78)条、(5.23±1.41)条、(3.55±1.41)条;假腱索分布于乳头肌与室壁或室壁与室壁之间,出现率为100%,平均条数为(22.90±8.71)条。结论黄牛心脏左心室结构在二尖瓣复合体结构与人有一定相似性,假腱索出现率为高,是研究假腱索的良好模型。
- 尹志奎刘晓申彪许银辉
- 关键词：左心室假腱索黄牛
- 三聚氯氰促进的咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物的合成被引量：8
- 2014年
- 以三聚氯氰作为反应促进剂,在室温和CH3CN作为溶剂的条件下,利用取代2-氨基吡啶、醛和烷基异腈三组分缩合,高收率地实现了一系列咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物的合成.产物结构经1H NMR,13C NMR和元素分析等进行了表征.
- 尹志奎田拴宝
- 关键词：三聚氯氰多组分反应
- α-硫辛酸对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用被引量：13
- 2005年
- 尹志奎郑斌崔旭黄能慧李诚秀
- 关键词：Α-硫辛酸脑缺血再灌注损伤凋亡
- D-二聚体在肝硬化和肝细胞癌患者血浆中的含量分析被引量：3
- 2005年
- 目的探讨肝硬化(LC)和肝细胞癌(HCC)患者血浆D-二聚体(D-dimer)含量与临床分期的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测40例LC和57例HCC的血浆D-dimer。结果与正常对照组相比,LC组和HCC组的血浆D-dimer含量均显著升高(P<0.05,P<0.01),特别是HCC组中同时伴有LC的患者。在LC组中,代偿期患者的D-dimer血浆含量明显低于失代偿期(P<0.01);在HCC组中,血浆D-dimer含量随肿瘤分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)的逐步进展而升高(P<0.05,P<0.01)。结论LC和HCC患者血浆D-dimer含量的异常与临床分期密切相关,提示其可作为评价患者病情和鉴别诊断的参考指标。
- 范秉琳尹志奎马军陈香宇刘涌涛朱武凌
- 关键词：肝硬化肝细胞癌D-二聚体
- 弓形虫肌动蛋白表达及其抗血清制备
- 2013年
- 目的体外制备弓形虫肌动蛋白(actin)及其多克隆抗体。方法以弓形虫cDNA链为模板,PCR扩增actin基因,亚克隆至pET30a载体,转化到大肠埃希菌BL21中;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达actin-His6蛋白;用纯化的蛋白加免疫佐剂免疫SD大鼠,收集抗血清,制备多克隆抗体,抗体亲和纯化柱纯化并分析抗体的效价。结果 actin基因的PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳,结果显示,在1 000 bp附近有一条带,与目的基因(actin cDNA长度为1 131 bp)大小相符;actin/pET30a重组质粒经BamHI和XhoI双酶切,1.0%琼脂糖凝胶电泳分析酶切产物,在1 000和5 000 bp附近可见条带;actin-His6蛋白在3～4 h时表达量达到峰值;蛋白可溶性分析显示,actin-His6蛋白主要以包涵体的形式存在;获得了抗actin-His6蛋白的大鼠源性抗血清。结论弓形虫actin蛋白在原核系统中得到了表达,用该蛋白免疫动物后获得了抗血清。
- 尹志奎赵林静郑斌
- 关键词：弓形虫肌动蛋白蛋白表达多克隆抗体
- 加强师资建设 提高办学水平
- 2014年
- 现在许多学校都提出要建设成为一座教学研究型大学,把建设一所教学研究型大学确定为一个学校建设的目标,本文从人才队伍的建设入手,探讨对于建设一座教学研究型大学应该需要一支什么样的人才队伍,才符合教学研究型大学的需要。
- 郑斌尹志奎
- 关键词：教学研究型
- 一种具有治疗结肠癌功能的NAT10抑制剂类似物及其应用
- 本发明提供了一种具有治疗结肠癌功能的NAT10抑制剂类似物及其应用，涉及生物医药技术领域。本发明所述类似物具有抑制结肠癌细胞增殖和促进结肠癌细胞凋亡的效果，且与空白对照组相比，细胞存活率从剂量8μmol/L开始出现显著性...
- 宋宇律海峡孙堂强段迎超房立真白素平尹志奎张慧
- 垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用被引量：25
- 2003年
- 目的:观察垂体腺苷环化酶激活肽(pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide,PACAP)对缺血再灌注脑神经元凋亡的防治作用。方法:利用四血管结扎法,建立老龄大鼠脑缺血再灌注模型,侧脑室注射PACAP,观察脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧物酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,计数海马CA1区存活和凋亡神经元数目,电镜观察神经元的超微结构变化。结果:PACAP治疗后脑组织MDA含量为(1.35±0.39)nmol/mg,SOD和GSH-Px活性分别为(115±20)NU/mg、(10.3±2.0)U/mg,与缺血再灌注组有明显差异(P<0.05),海马CA1区存活和凋亡神经元数目为48.8±4.3,14.3±2.9,能促进神经元存活和减轻凋亡损伤(P<0.01),保护超微结构。结论:PACAP的保护作用可能与其降低脑组织氧自由基水平,提高抗氧化酶活性,防止神经元凋亡有关。
- 刘宪霜崔旭王鲁宁李文彬韩志涛房征宇尹志奎
- 关键词：脑缺血再灌注损伤
- 定点突变技术鉴定弓形虫微线体蛋白6与醛缩酶的作用位点被引量：1
- 2014年
- 目的利用定点突变技术鉴定弓形虫微线体蛋白6(MIC6)与醛缩酶的作用位点。方法根据GenBank中的弓形虫RH株MIC6基因序列(登录号为AF110270)及C端序列设计特异性引物,将MIC6蛋白羧基端(MIC6C)348位色氨酸(W348)的密码子碱基突变为缬氨酸(V)的碱基,PCR扩增MIC6C W/V突变体基因片段,克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1,转化至大肠埃希菌BL21(DE3);0.8 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST-MIC6C W/V突变体蛋白,亲和层析法纯化表达产物。以GST-MIC6C W/V突变体蛋白为探针蛋白,GST-MIC6C蛋白为对照蛋白,分别与弓形虫速殖子裂解液进行GST沉降实验,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析实验产物。分别以GST-MIC6C W/V突变体蛋白和GST-MIC6C蛋白为探针蛋白和对照蛋白,与弓形虫醛缩酶蛋白液进行GST沉降实验,SDS-PAGE分析实验产物。结果获得了MIC6C W/V突变体基因片段,构建了相应的原核表达载体,表达并纯化了GST-MIC6C W/V突变体蛋白。GST-MIC6C W/V突变体蛋白与弓形虫速殖子裂解液的GST沉降产物中未见蛋白条带,而GST-MIC6C蛋白的沉降产物中可见一蛋白条带,且能被抗醛缩酶抗体特异识别;GST-MIC6C W/V突变体蛋白与弓形虫醛缩酶蛋白液的GST沉降产物中未见蛋白条带,而GST-MIC6C蛋白的沉降产物中可见一蛋白条带。结论色氨酸(W348)为MIC6与醛缩酶的作用位点。
- 郑斌尹志奎詹希美
- 关键词：刚地弓形虫醛缩酶定点突变技术
