常金丽
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种人肿瘤坏死因子α衍生物及其制备方法
- 一种人肿瘤坏死因子α衍生物a及其制备方法。人肿瘤坏死因子α即hTNFα来源于人体内，难以获得足够数量的天然来源TNF供临床使用，基因工程的hTNFα其价格也十分昂贵，并有较大毒副反应，影响疗效。本发明的hTNFαDa是以...
- 赵寿元李昌本蔡武城常金丽
- 文献传递
- PHA诱导人外周血淋巴细胞产生IL2的方法学及影响因素探讨被引量：3
- 1989年
- 本文借用IL-2依赖细胞CTLL测定IL-2生物活性实验,检测了人外周血单个核细胞(PBM)在PHA促分裂剂的刺激下,上清内IL-2含量,并建立了一个微量的体外诱导人PBM产生IL-2的方法。实验结果示,体外诱导人PBM产生IL-2的最佳PHA浓度为1:250稀释,培养时间以44～48小时为宜。由于采用96孔板培养,诱生时需血量小。实验结果还示,诱导IL-2产生的PHA终浓度范围窄(1:250～1:500),而淋转相对宽(1:250～1:5000),单核细胞对IL-2的诱生似具有负调节作用,表现为去单核时诱生的IL-2活性增高。粗制的IL-2上清除能维持CTLL生长外,也能维持人PBM体外培养。
- 常金丽王喻康臧人杰
- 关键词：白细胞介素PHAT细胞
- 酵母菌重组白细胞介素2生物学活性鉴定
- 1990年
- 利用IL-2依赖细胞系CTLL检测酵母菌系统表达的人rIL-2生物活性。结果证实,酵母菌 rIL-2 能明显刺激 CTLL细胞的生长。用进口的 rIL-2作为标准,测定所表达的 rIL-2活性单位为 33u/ml。单克隆抗体中和实验证实,酵母菌 rIL-2 能特异地和天然 IL-2单抗结合,抑制其本身诱导的 CTLL细胞增殖。这种抑制是由 IL-2单抗参与的,因为鼠正常血清没有这种抑制作用。此外,经蛋白A 柱层析纯化后的单抗在 0.27μg/孔时就能表现明显地抑制,提示该抗原抗体反应的特异性和专一性。
- 常金丽金建平章道立陶无凡李育阳
- 关键词：白细胞介素酵母菌生物活性
- 人TNFα分子N末端、C末端结构的修饰与生物活性的关系被引量：8
- 1995年
- 通过对人肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα）──ＴＮＦα分子的Ｎ末端第４、５、１０位以及Ｃ末端第１５７位氨基酸的修饰，由ＴＮＦα原型序列Ｓｅｒ（４）、Ｓｅｒ（５）、……Ａｓｐ（１０）改为Ｃｙｓ、Ｔｈｒ、……Ａｒｇ，Ｃ末端１５７位Ｌｅｕ改为Ｐｈｅ，研究了ＴＮＦα分子结构改变与其生物活性的关系。从ＴＮＦα分子的一级结构和高级结构得知，分子的Ｎ末端可能参与对受体的识别，而Ｃ末端对稳定ＴＮＦα分子的活性形式──三聚体起主要作用，因而将分子修饰部位选在Ｎ、Ｃ末端。采用ＰＣＲ定位突变方法，构建了ＴＮＦα衍生物１０（ＴＮＦαｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ１０－ＴＮＦａＤ１０）的表达载体，观察两个部位数个氨基酸改变后对整个ＴＮＦα分子生物活性的影响。实验结果表明：Ｎ、Ｃ末端数个氨基酸的置换并未明显提高ＴＮＦα的表达量，但却提高了其体外细胞毒功能，为原型ＴＮＦα的１０倍左右。原因可能系Ｎ末端第４位由丝氨酸改成半胱氨酸，使ＴＮＦαＤ１０的表达产物呈多聚体状态。ＨＰＬＣ检测示表达产物为三聚体单一峰，在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳还原条件下仍可见到三聚体的蛋白条带为以上推测提供了证据。此外，由于Ｃ末端第１５７位由原型ＴＮ?
- 常金丽李新何晓龙吕群喻红蔡武城李昌本赵寿元
- 关键词：肿瘤坏死因子结构修饰
- 3′端非翻译区影响TNFα cDNA在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 1995年
- 采用PCR方法改变了表达构建物pRL-rhTNF中的结构,即去掉rhTNFαcDNA3＇端非翻译区序列110bp(命名为pRL-rhTNFα2),转入大肠杆菌后,观察数个阳性转化子的表达情况,并与原型pRL-rhTNFα的表达进行比较。结果表明,去掉3＇端非翻译区的pRL-rhTNFα2能稳定表达rhTNFα,其发酵及纯化产品的生物学特征均等同于原型的,且其表达量比原型的有提高,提示3＇端非翻译区序列对表达有影响。3＇端非翻译区内存在一个相似于TA的重复序列——TTTA TTA七聚体。这可能是本研究中影响TNFα表达量的原因之一。
- 常金丽蔡武城徐立峰李昌本赵寿元
- 关键词：肿瘤坏死因子ACDNA基因工程
- 人肿瘤坏死因子衍生物cDNA的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 1993年
- 蔡武城何晓龙常金丽吕群喻红陆惠萍李昌本赵寿元
- 关键词：衍生物聚合酶肿瘤
- 一种新型人TNF表达质粒的构建及在大肠杆菌中的高表达被引量：7
- 1994年
- 在详细分析ＴＮＦ结构及前人有关ＴＮＦ结构与功能关系研究的基础上，应用ＰＣＲ技术构建了一种新型人肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）分子的编码基因，并将该编码基因插入表达质粒，转化大肠杆菌，通过温度诱导获得了高表达，活性测定的结果表明，新型人ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性较原型人ＴＮＦ升高了１０￣３数量级．
- 何晓龙常金丽蔡武城喻红吕群赵寿元王成海林葆城朱鹤年
- 关键词：肿瘤坏死因子抗癌药聚合酶链反应
