庄亮
- 作品数：49 被引量：259H指数：8
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划吴阶平医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 原代胃癌干细胞CD44表达意义探讨被引量：7
- 2017年
- 目的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)在恶性肿瘤的发生发展中起着重要作用,且是肿瘤耐药及复发的根源。本研究探讨CSCs表面标记蛋白CD44在分离及鉴定胃癌干细胞中的重要作用。方法收集2015-11-06-2015-12-01华中科技大学同济医学院附属同济医院3例胃癌患者手术标本。首先采用胶原酶消化法获取胃癌细胞,部分细胞分别贴壁及悬浮培养,并采用免疫荧光及流式分析的方法检测胃癌球形体中CD44的表达情况。部分细胞采用流式细胞仪分选得到CD44^+及CD44^-胃癌细胞,并通过无血清悬浮培养法比较两群细胞的球形体形成能力。结果免疫荧光显示,CD44蛋白在球形体中高表达;流式分析发现,贴壁的原代胃癌细胞中CD44^+细胞的比例为(30.73±7.6)%,而球形体中CD44^+细胞的比例高达(56.4±5.58)%,差异有统计学意义,P=0.009。球形体形成实验结果表明,与CD44^-细胞相比,CD44^+胃癌细胞具有更强的球形体形成能力,1 000个CD44^+及CD44^-胃癌细胞分别形成(14.33±2.52)和(1.67±0.58)个球形体,差异有统计学意义,P=0.001。通过比较发现,球形体培养对胃癌干细胞的富集效率为0.3%,而CD44对胃癌干细胞的富集效率为1.4%。结论 CD44是胃癌干细胞的表面标记蛋白,其可能成为胃癌靶向治疗的可靠靶标。
- 彭平汪蕾蒋继宗晁腾飞庄亮
- 关键词：肿瘤干细胞CD44球形体
- Survivin基因RNA干涉对MCF-7乳腺癌细胞紫杉醇敏感性的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨Survivin短发卡状RNA抑制Survivin的表达对人乳腺癌MCF-7细胞紫杉醇敏感性的影响。方法通过脂质体介导将Survivin短发卡RNA表达质粒pSurvivin shRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7并检测Survivin mRNA及蛋白的表达情况;噻唑蓝(MTF)比色法和An- nexin-V法分别检测紫杉醇处理后转染pSurvivin shRNA细胞、未转染细胞以及转染阴性对照质粒细胞的增殖和细胞凋亡的变化;采用Western blot法观察紫杉醇作用过程中Survivin表达的变化。结果与未转染细胞及转染阴性对照质粒细胞比较,转染pSurvivitt shRNA质粒的细胞Survivin mRNA和蛋白表达明显下降;在同一紫杉醇作用浓度下,细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显增高。此外在紫杉醇作用的早期(6h内),转染阴性对照质粒细胞以及未转染细胞均出现了Survivin表达一过性增加,而转染pSurvivin shRNA的细胞中未观察到Survivin表达的增加。结论短发卡状RNA干扰技术阻抑乳腺癌细胞中Survivin的表达,可增强乳腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。
- 熊慧华庄亮于世英熊华
- 关键词：SURVIVIN脱噬作用化疗敏感性
- 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药机制研究进展被引量：5
- 2009年
- 含有表皮生长因子受体突变的非小细胞肺癌患者中70%～80%对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼和厄洛替尼敏感,但最终仍会出现耐药导致肿瘤进展。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药分为原发耐药和继发耐药,继发耐药机制主要包括表皮生长因子受体二次突变(T790M)、HER2及HER3的代偿作用、MET扩增、胰岛素样生长因子受体结合蛋白缺失及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路活化。
- 曹喆庄亮陈元
- 关键词：非小细胞肺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂
- 吉非替尼对肺癌细胞株HCC827和H358放射敏感性的影响及其机制研究被引量：5
- 2012年
- 背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的一个重要因素,其过表达或是下游通路的激活与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤的放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路可能会增强放疗敏感性。本研究旨在探讨小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼能否增加肺癌细胞株HCC827和H358的放疗敏感性及其可能的机制。方法选取HCC827和H358这两个非小细胞肺癌细胞株,分为单纯X线组和X线+吉非替尼两组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经1μmol/L吉非替尼作用24h后再行X线照射。克隆形成实验比较两株细胞中不同分组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中的磷酸化H2AX(γ-H2AX)及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中,H358细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.355和0.433;HCC827细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.223和0.242,差别不明显。激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后各时间段实验组H358细胞核中g-H2AX斑点相比对照组要多,且持续时间更长。而对照组和实验组的HCC827细胞g-H2AX斑点在各时间段并无明显差异;激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后对照组H358的EGFR蛋白在1h内入核,而经吉非替尼处理后EGFR蛋白几乎不入核;实验组及对照组HCC827细胞的EGFR表达位置均在细胞质中,胞核中很少或者没有,可以认为并无入核现象;Western blot结果显示,H358细胞在经4Gy放射处理后有入核现象,而预先经吉非替尼处理后,EGFR蛋白几乎不在核内表达而仍位于细胞浆内。对于HCC827细胞,实验组及对照组的EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中很少或没有,且两组并无明显差异。结论吉非替尼可增加肺癌细胞株H358的放射敏感性,这可能与其阻止放疗后E
- 高子夜庄亮陈元
- 关键词：表皮生长因子受体肺肿瘤辐射耐受性吉非替尼
- Chk1/2和Plk1蛋白在宫颈良恶性病变组织中的表达及其意义被引量：12
- 2007年
- 背景与目的:Chk1/2(checkpoint kinase 1/2)和Plk1(polo-like kinase 1)是各细胞周期检测点启动DNA损伤修复的主要激酶。本研究主要探讨3种激酶蛋白在宫颈良恶性病变中的表达差异、与宫颈癌临床病理特征的关系及3种激酶在宫颈癌组织中表达之间的相互关系。方法:应用免疫组化SP法检测43例宫颈癌组织和20例慢性宫颈炎性组织中Chk1、Chk2和Plk1蛋白的表达情况。结果:Chk1、Chk2和Plk1蛋白在宫颈癌患者中的阳性率分别为76.7%、60.5%和32.6%,在慢性宫颈炎患者中的阳性率分别为30.0%、35.0%和0;Chk1和Plk1蛋白在宫颈癌组织中的表达显著高于慢性宫颈炎组织(P<0.01),而Chk2的表达差异无显著性(P>0.05)。Chk1、Chk2和Plk1蛋白的表达在不同年龄、病理类型和临床分期的宫颈癌患者中差异无显著性(P>0.05);但Chk1和Plk1的表达在不同分化程度的宫颈癌患者中差异有显著性(P<0.05)。Spearman等级相关分析,在43例宫颈癌患者中,Chk1与Chk2的表达呈正相关(r=0.492,P=0.001)。结论:Chk1和Plk1可能成为比较理想的宫颈癌治疗靶点。
- 黄晓园高庆蕾庄亮曹阳马全富周剑峰马丁
- 关键词：CHK1CHK2PLK1
- DNA双链断裂修复蛋白表达水平与肿瘤细胞放射敏感性的关系研究被引量：2
- 2007年
- 目的:检测肿瘤细胞株中DNA双链断裂修复蛋白(Ku80、DNA-PKcs和ATM)的表达水平和放射敏感性参数,探讨3个蛋白预示肿瘤细胞放射敏感性的价值。方法:培养4株人宫颈癌细胞HeLa、SiHa、C33A和Caski,3株人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453,及1株人肺癌细胞A549,Western blot检测这8株细胞中Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白的表达水平;流式细胞仪检测X线(10 Gy,6 MV)照射48 h后的凋亡率;克隆形成实验检测SF2(surviving fraction at 2 Gy)值和α、β值;Pearson线性相关分析蛋白表达水平与照射后凋亡率、SF2值和α/β比值的相关性。结果:3种蛋白在同一株细胞中的表达及同一蛋白在不同细胞株的表达均存在明显差异;DNA-PKcs的表达水平与SF2之间存在正相关关系(r=0.723,P=0.043);Ku80和ATM的表达与SF2值间无明显相关关系(P>0.05)。3种蛋白与凋亡率和α/β比值均无相关性(均P>0.05)。结论:DNA-PKcs蛋白表达越高,细胞对放射线越抵抗,其表达水平可能成为指示肿瘤细胞放射敏感性的指标。
- 庄亮于世英黄晓园曹阳熊慧华
- 关键词：DNA修复酶类放射耐受性KU80DNA-PKCSATM
- AG825对乳腺癌细胞的辐射增敏作用被引量：5
- 2008年
- 目的:通过体外实验观察酪氨酸蛋白激酶抑制剂AG825对人类表皮生长因子受体2(ERBB-2)高表达乳腺癌细胞的生长抑制作用和辐射增敏作用,并从DNA双链断裂(Double strand break,DSB)损伤修复的角度初步探讨AG825辐射增敏机制。方法:首先通过MTT比色法观察了不同浓度AG825对ERBB-2高表达乳腺癌细胞系MDA-MB-453生长抑制作用。然后将细胞设为空白对照组,单纯放射组,AG825预处理组。通过克隆形成实验观察AG825预处理组和单纯辐射组乳腺癌细胞辐射后生存分数(Survivial fraction,SF)的差异。并且通过单细胞中性凝胶电泳分析了AG825预处理对辐射诱导的DSB的影响。同时用免疫印记法分析AG825预处理后MDA-MB-453细胞在辐射后不同时间DSB修复的关键激酶DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA dependent protein kinase catalytic sub-unit,DNA-PKcs)蛋白的表达情况。结果:MTT比色法显示AG825对MDA-MB-453生长抑制作用随AG825浓度增高而增加。辐射后单纯放射组MDA-MB-453细胞生存分数较空白对照组明显下降。AG825预处理组辐射后生存分数较单纯放射组进一步下降,同时DSB较单纯放射组增加。免疫印记显示单纯放射组DNA-PKcs蛋白表达在辐射后较空白对照组增加,而AG825预处理组DNA-PKcs表达较单纯放射组下降。结论:AG825对ERBB2高表达乳腺癌细胞具有生长抑制作用。并且其对ERBB2高表达乳腺癌细胞具有辐射增敏作用,其辐射增敏机制可能与AG825抑制DNA-PKcs蛋白表达而减少辐射后DSB修复有关。但还需进一步的体内实验来评价AG825辐射增敏作用。
- 罗波于世英庄亮夏曙赵臻荣磊
- 关键词：敏感性
- 辐射对宫颈癌细胞EGFR核转运的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察辐射对宫颈癌细胞表皮生长因子受体（EGFR）核转运的影响，并初步探讨EGFR核转运在宫颈癌细胞辐射抵抗当中的作用。方法通过免疫印记检测法分析了EGFR在宫颈腺癌细胞HeLa和Siha以及宫颈鳞癌细胞Caski中的表达，以及X线照射4Gy后Caski细胞核内EGFR和细胞浆内EGFR不同时间点的表达。并且分析了Cetuximab（C225）对辐射诱导的Caski细胞EGFR核表达影响及其生存分数的影响。结果3株宫颈癌细胞中Caski细胞系EGFR呈高表达。受照的Caski细胞核内EGFR受体表达随时间增多，胞质内EGFR受体减少。C225预处理后，辐射诱导的EGFR核表达明显降低并且生存分数降低。结论辐射能够诱导宫颈癌细胞EGFR核转运，并且EGFR核表达可能和放疗抵抗相关，核内EGFR在宫颈癌细胞放疗抵抗中的作用尚需进一步研究。
- 于世英罗波庄亮夏曙赵臻荣磊
- 关键词：人类表皮生长因子受体宫颈癌
- PNI对呋喹替尼三线治疗晚期结直肠癌患者的预后生存分析
- 2022年
- 目的探讨预后营养指数(PNI)对呋喹替尼三线治疗晚期结直肠癌患者疗效的预后分析。方法选取2017年11月至2020年6月华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心消化肿瘤科及荆州市中心医院肿瘤科收治并接受呋喹替尼三线治疗的晚期结直肠癌患者33例,计算PNI、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)以及淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)等营养免疫评估指标。采用Cox比例风险回归模型(简称Cox回归)及Kaplan-Meier曲线Log-rank检验评价相关免疫营养指标对于患者生存的影响。结果根据总生存(OS)期的受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析,PNI最佳截止点为46.95;单因素Cox回归分析结果显示,PNI、NLR及LMR是OS的影响因素,多变量Cox分析显示PNI是OS期的独立预后因素。低PNI患者1年生存率为9.894%(95%CI=8.300~23.566),中位总生存(mOS)期为6.700个月(95%CI=5.524~7.876),高PNI患者1年生存率是42.218%(95%CI=22.496~46.378,P<0.05),mOS期为11.400个月(95%CI=6.123~16.677,P<0.05);PNI低的患者中位无进展生存(mPFS)期为2.200个月(95%CI=1.278~3.122);PNI高的患者mPFS期为3.067个月(95%CI=1.095~5.039,P>0.05)。结论PNI可作为呋喹替尼三线治疗晚期结直肠癌患者的生存预后因素。
- 邱萍唐曦徐炎华庄亮邱红戴宇翃
- 关键词：结直肠癌预后营养指数
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂提高腺病毒对K562细胞转染及杀伤效率的研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究通过观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素 A(TSA)对人类白血病细胞系 K562柯萨奇-腺病毒受体(CAR)表达水平的影响,并探讨 HDAC 抑制剂在以腺病毒为载体的基因治疗中的应用价值。方法在 mRNA 和蛋白水平检测 TSA 处理 K562细胞前后 CAR 的表达情况,采用流式细胞术测定病毒的转染效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测腺病毒及其携带的基因的体外抗瘤效应。结果 TSA 处理后,K562细胞 CAR 的 mRNA 和蛋白表达明显增高;流式细胞仪分析ADV-GFP 转染 K562后 GFP 的表达发现:未处理组的转染率为(8.74±0.34)%,1、10和100 nmol/LTSA 处理细胞48h 后的转染率分别为(12.26±0.55)%、(20.83±1.22)%和(28.66±0.43)%。未处理组与处理组间及各处理组间转染效率的差异有统计学意义(P<0.05)。MTT 结果表明腺病毒 M1介导的体外杀伤效应 TSA 处理组比未处理组增强(P<0.05),TSA 各处理组间的体外杀伤效应随 TSA 浓度的提高而增强(P<0.05)。结论低浓度的 TSA 可以增强腺病毒对 K562细胞的感染及杀伤效率,可以提高以腺病毒为载体的血液肿瘤基因治疗的疗效。
- 曹阳黄晓园庄亮李伟周剑峰
- 关键词：组蛋白脱乙酰基酶类TRICHOSTATIN腺病毒转染
- 全文增补中
