张兵
- 作品数：31 被引量：86H指数：5
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 禽腺病毒的分离鉴定及LMH细胞适应毒的生物学特性研究被引量：9
- 2018年
- 为了对采集自北京平谷某养殖场发病鸡中出现心包积液综合征症状的病料进行病毒分离和鉴定,将病料接种LMH细胞进行病毒分离,并在LMH上连续传代,取C5和C15代细胞毒分别接种3周龄SPF鸡进行致病性试验。根据分离病毒在LMH上的CPE特征、病毒血清中和试验、Hexon基因序列比对分析、SPF鸡致病性回归试验,表明从发病鸡病料中分离的一株病毒为血清4型禽腺病毒;病毒在LMH细胞盲传3代后,就能很好地适应细胞培养,出现禽腺病毒典型的CPE;培养至第10代,病毒在接种后72 h,病毒含量即可达到107.4TCID50/0.1m L的峰值滴度;接种细胞毒的SPF鸡出现4型禽腺病毒导致的典型临床症状和特异性剖检病理变化,两组接种鸡的死亡率分别为100%和70%。结果表明,研究分离到的4型禽腺病毒毒株对SPF鸡具有高致死率,但病毒经过细胞连续传代后对鸡的致死率降低。
- 陈玲张兵宋亚芬刘月焕蒋桃珍
- 关键词：禽腺病毒
- 3型鸭甲型肝炎病毒逆转录环介导等温扩增技术快速检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 为建立一种3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)的快速检测方法,本研究针对DHAV-3 VP1基因序列中的8个不同区段设计了3对特异性引物,并对反应体系进行优化,通过加入羟基萘酚蓝(HNB)实现对反应结果的可视化观察,建立了检测DHAV-3的逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)方法,采用已建立的方法对人工感染雏鸭的血清样品和病死鸭肝组织样品提取的核酸进行了检测。结果显示,该方法仅对DHAV-3的RNA进行扩增,而对1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)以及鸭常见的病原RNA均无扩增反应;可以检测出10拷贝/μL的DHAV-3 RNA,其敏感性为RT-PCR的1 000倍;最低能够检测到相当于1.1个DELD50的DHAV-3;能够检测到人工感染雏鸭血清和病死鸭肝组织中的DHAV-3;上述结果表明该方法能够特异、灵敏、快速地检测DHAV-3,而且使用方便。
- 张映范书才张兵陈玲秦义娴
- 关键词：RT-LAMP
- 鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2022年
- 为建立鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体的间接ELISA检测方法,应用原核表达的IBDV VP2蛋白作为包被抗原,经方阵试验确定间接ELISA试验的最佳反应条件:包被抗原的浓度为8μg/m L,标准阴、阳性血清的稀释度为1∶400,封闭液选用10%马血清,酶标抗体最佳稀释倍数为1∶15000,最佳抗原稀释液为0.01 mol/L PBS(p H7.2),抗原最佳包被条件为4℃过夜,待检血清和酶标二抗反应条件为37℃60 min,底物作用时间为15 min。待检血清的OD_(450nm)≥0.288判为阳性,反之判为阴性。结果显示,该方法的特异性好、敏感高、重复性好。用建立的间接ELISA方法与商品化IDEXX-ELISA试剂盒对临床血清样品进行检测,符合率为95.7%。该方法的建立为检测IBDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、方便经济的检测方法,为鸡传染性法氏囊病免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。
- 黄小洁吴华伟张兵杨承槐孔冬妮侯力丹杨飞薛麒刘丹
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒抗体VP2间接ELISA
- 鸭肝炎病毒分子流行病学分析
- 本研究用标准DHV-1抗血清和N-DHV抗血清对国内分离的7株鸭肝炎病毒(DHV)进行了血清中和试验。结果表明,PLK株和YB3株为1型DHV(DHV-1),YB1、YB2、YB5、HY2和HY3株为新型DHV(N-DH...
- 袁率珍范书才李虹姜畔张兵
- 关键词：鸭肝炎病毒VP1基因
- 文献传递
- 非洲马瘟病毒VP7蛋白研究进展
- 2023年
- 非洲马瘟(African horse sickness, AHS)是由非洲马瘟病毒(African horse sickness virus, AHSV)引起的一种通过库蜢等昆虫传播的、主要感染马科动物的传染病。我国是世界动物卫生组织认可的非洲马瘟无疫国,随着AHS疫情在东南亚的传播,增大了疫情传入我国的风险。AHSV编码了7种结构蛋白(VP1~VP7),其中VP7是病毒内衣壳蛋白的主要组成部分,在AHSV 9个血清型中高度保守,常作检测的靶标。此外,VP7蛋白的自组装特点对于AHSV亚单位疫苗和病毒样颗粒疫苗(VLP)的研究有基础性作用。对当前AHSV VP7蛋白相关研究进展进行了综述,以期为AHSV检测方法及疫苗等研究提供参考。
- 张桂铭张兵张敏宋亚芬王磊杨承槐
- 关键词：VP7疫苗
- 用于检测鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒、鸭甲型肝炎病毒1型和鸭甲型肝炎病毒3型的多重qPCR引物探针组、检测体系和应用
- 本发明提供了一种用于检测鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒、鸭甲型肝炎病毒1型和鸭甲型肝炎病毒3型的多重qPCR引物探针组、检测体系和应用，属于病毒检测技术领域。本发明所述多重qPCR检测引物探针组包括检测鸭坦布苏病毒的上游引物...
- 毛娅卿翟天舒王嘉许冠龙刘丹陈晓春宋亚芬张兵汪溪严琳杰
- 禽网状内皮组织增生症病毒和A亚群禽白血病病毒共感染对疫苗免疫鸡生长性能和免疫器官的影响被引量：4
- 2022年
- 为分析不同免疫状态下禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)和A亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-A)共感染对鸡生长性能及免疫器官的影响,通过对1日龄和10日龄常规疫苗免疫鸡群、1日龄灭活疫苗免疫鸡群、1日龄活疫苗免疫鸡群进行REV与ALV-A单感染或共感染,于不同日龄称重,采集免疫器官,对生长性能、免疫器官比重进行比较和分析。结果显示,1日龄鸡单感染或共感染REV和ALV-A均会引起发病、死亡及体重下降,REV、ALV-A单感染组及共感染组平均病死率依次为27.6%、11.6%及31.9%,表明,疫苗免疫刺激增强了REV与ALV-A感染的致病性。10日龄鸡REV、ALV-A单感染及共感染于81日内病死率分别为13.3%、6.7%及20%,低于1日龄感染各相应组,体重下降程度也低于1日龄感染鸡,表明鸡的日龄越高对REV、ALV-A感染的抵抗力越强。活疫苗与灭活疫苗免疫的比较显示,两种疫苗免疫应激均能引起鸡体重下降明显,且活疫苗免疫对体重的抑制作用更明显。REV单感染和共感染对生长发育的抑制作用高于ALV-A单感染,尤其是共感染对鸡体重的抑制作用最明显。对免疫器官比重的影响方面,1日龄感染时,共感染组胸腺比重显著降低,10日龄感染影响不显著,表明鸡日龄越大对病毒感染的抵抗力越强;常规免疫可引起法氏囊比重下降,但对法氏囊的影响是可恢复的,而REV单感染和共感染会加重常规免疫对法氏囊的损伤,且损伤更持久或不可恢复;ALV-A单感染对法氏囊的损伤影响不明显;单感染和共感染对脾脏比重的影响均不显著。本研究为深入研究REV和ALV-A单感染或者共感染诱导鸡群发生免疫抑制机制积累了重要的实验数据。
- 黄小洁刘丹孔冬妮张兵吴华伟薛麒杨飞侯力丹薛青红李俊平
- 关键词：REV共感染免疫器官
- 新型鸭肝炎病毒的分离鉴定被引量：26
- 2009年
- 对从广东地区流行鸭肝炎病例中分离到的1株病毒(命名为"GD株")进行了鸭胚(DE)传代培养。DE2～DE6代鸭胚毒的ELD50在10-5.17/0.2mL～10-6.38/0.2mL之间。DE6代毒回归雏鸭后可以产生与1型鸭肝炎病毒(DHV)相同的临床症状和解剖病变。鸭肝组织毒对4日龄、8日龄和16日龄雏鸭的LD50分别为10-6.5/0.5mL、10-5.38/0.5mL和10-4.83/0.5mL。病毒对氯仿、乙醚和胰酶不敏感,能够耐受pH3.0酸处理,62℃30min不能被完全灭活。病毒核酸类型鉴定为RNA病毒。生物学和理化学特性鉴定结果表明,GD株为强毒DHV。使用标准1型DHV阳性血清进行的交叉中和试验和交叉被动保护试验表明,GD株病毒在抗原性上与1型DHV无关。对DHV抗原相关的VP1基因序列分析和同源性比较表明,GD株与DHV-1的VP1核苷酸序列同源性为69.82%,氨基酸序列同源性为71.77%。GD株属于一种在我国流行的新型DHV强毒(暂命名为"CN-DHV")。
- 范书才李虹袁率珍巢伟王少英林旭野张毓金朱山林张兵姜畔范小舟
- 关键词：鸭肝炎病毒新型鸭肝炎病毒
- 鸭肝炎病毒分子流行病学分析被引量：14
- 2010年
- 为了解我国鸭病毒性肝炎(DH)的流行情况,本研究用标准DH病毒(DHV)Ⅰ型(DHV-1)抗血清和新型DHV(N-DHV)抗血清对国内分离的7株DHV进行了血清中和试验。结果表明,PLK株和YB3株为DHV-1;YB1、YB2、YB5、HY2和HY3株为N-DHV。同时,对国内分离的9株病毒的抗原相关VP1基因进行RT-PCR扩增和测序,对VP1基因的核苷酸与推导的氨基酸序列分析的结果表明,3株DHV-1的氨基酸序列同源性为95%左右,6株N-DHV的氨基酸同源性为98%左右;DHV-1分离株与N-DHV分离株间氨基酸同源性为72%～77%。参照同属微RNA病毒的人肠病毒的血清型分型标准,通过对DHV VP1基因序列同源性比较,判定9株病毒的血清型。依据VP1基因序列同源性进行的血清型分型结果与根据抗原性鉴定进行的血清型分型结果一致。同血清型病毒株间的VP1基因变异很小,表明DHV的抗原性稳定。同型不同毒株间VP1基因的差异可以导致病毒在致病力、细胞感染能力等方面的差异。研究结果表明,目前我国存在DHV-1和N-DHV两种独立的血清型,但尚未见血清亚型的流行。
- 袁率珍范书才李虹姜畔张兵
- 关键词：鸭肝炎病毒VP1基因
- 一种检测新型鸭呼肠孤病毒抗体的间接ELISA试剂盒及其sigmaB蛋白的应用
- 本发明提供了一种检测新型鸭呼肠孤病毒抗体的间接ELISA试剂盒及其sigmaB蛋白的应用，属于免疫检测技术领域。新型鸭呼肠孤病毒sigmaB蛋白在制备检测新型鸭呼肠孤病毒抗体的试剂或试剂盒中的应用。本发明提供了一种检测新...
- 宋亚芬杨承槐张乾义杨宵玥张兵张敏郭思凡关飞虎赵靖玉严琳杰
