张君
- 作品数:23 被引量:33H指数:3
- 供职机构:北京大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学经济管理更多>>
- 人UNC5CL原核蛋白的表达及多克隆抗体的制备和鉴定被引量:3
- 2010年
- 目的:构建UNC5CL基因的原核表达载体,纯化GST-UNC5CL融合蛋白,并以其为抗原免疫家兔,制备抗人UNC5CL多克隆抗体,并鉴定其反应性和特异性。方法:用PCR方法扩增UNC5CL基因(表达其280-518位氨基酸)片段并克隆至pGEX-4T-2原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白GST-UNC5CL(aa 280-518)表达;所获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化,免疫家兔制备抗血清,再采用ELISA、Western blot和免疫组化的方法检测抗体的效价及特异性。结果:测序证实原核重组质粒构建成功;经IPTG诱导,可表达Mr为52 000的GST-UNC5CL(aa280-518)的融合蛋白;谷胱甘肽亲和层析柱纯化的融合蛋白免疫家兔制备的抗血清经Western blot和免疫组化检测证实可识别目的蛋白。结论:制备了兔抗人UNC5CL的多克隆抗体,且抗体对内源性UNC5CL具有较好的反应性和特异性,为进一步研究UNC5CL的功能奠定了基础。
- 吕丹钱晓萍田晓军张毓张君
- 关键词:融合蛋白多克隆抗体
- 新的抑癌基因UNC5D及其编码蛋白的新应用
- 本发明提供了新的抑癌基因UNC5D基因及其编码蛋白的新应用,具体涉及:UNC5D基因和/或其编码的蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用;检测UNC5D基因或其编码的蛋白的试剂在制备用于癌症的辅助诊断和/或预后判断的组合物中的...
- 张君张毓吕丹董冬
- HPV疫苗安全性与有效性的研究现状及进展被引量:21
- 2020年
- 人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是最普遍的性传播感染之一。研究发现在99.7%的宫颈癌标本中存在高危型HPV的DNA。现已明确HPV持续感染是HPV相关疾病如宫颈癌等恶性肿瘤的主要致病因素,因此通过接种HPV疫苗来预防HPV感染和治疗HPV相关疾病显得尤为重要。HPV疫苗分为两种:一种是预防性HPV疫苗,用于预防健康人被HPV感染;一种是治疗性HPV疫苗,具有对已出现的HPV感染和病变患者产生治疗效果的潜能。本文就HPV疫苗安全性与有效性的研究现状及进展展开综述。
- 唐荣淳徐睿姚然然俞双双梁佳伟张君
- 关键词:HPVHPV疫苗安全性有效性
- UNC5CL及其编码蛋白的应用
- 本发明提供了UNC5CL基因及其编码蛋白的应用,具体涉及UNC5CL基因或其编码的蛋白在制备治疗癌症特别是肾癌的药物中的应用,并且涉及UNC5CL基因或其编码的蛋白在抑制肿瘤细胞的生长和/或细胞迁移中的应用,以及在抑制肿...
- 张君张毓吕丹
- 文献传递
- 抗mEET蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及mEET组织学分布的分析被引量:4
- 2006年
- 目的 制备抗小鼠雌激素增强的转录子(mouse estrogen-enhanced transcript,mEET)的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),探讨mEET蛋白在小鼠各组织器官中的定位与分布,为进一步了解和研究mEET功能奠定基础。方法 以纯化的原核表达mEET蛋白免疫的SD大鼠脾细胞与Sp2/0融合,经HAT筛选获得稳定分泌抗mEET蛋白的McAb的杂交瘤。采用McAb通过免疫组织化学及间接免疫荧光染色分析mEET在胸腺上皮细胞系MTEC1及各组织器官中的定位与分布。结果 获得4株能高效分泌特异性McAb的抗mEET的杂交瘤细胞系DA10、DB4、4A5和4D8,Ig亚类均为IgM,其腹水效价为1:10^7~1:10^8。Western blot结果表明该抗体能特异性识别原核表达的mEET蛋白,免疫荧光及免疫组化显示mEET蛋白在胞浆点状弥散分布,部分细胞可见核内分布。免疫组化提示该蛋白在全身多个器官有表达,尤其在骨髓中的巨核细胞胞浆中高表达。结论 成功获得抗mEET的特异性的单克隆抗体,为进一步研究mEET的功能及在胸腺发育中的作用创造了条件。
- 邵启祥金容钱晓萍张君张毓陈慰峰
- 关键词:单克隆抗体
- Slit/Robo信号与肿瘤被引量:1
- 2014年
- 神经导向因子Slit信号最早是在神经系统发现,并通过受体Robo家族成员发挥轴突导向排斥作用,近年来的研究表明其在包括肾脏、肺、皮肤等多种组织表达,参与调控正常的组织细胞生理功能,此外,在肿瘤中的研究表明Slit/Robo在肿瘤细胞的表达受到动态调控,从而参与多种肿瘤的发生发展过程。本文侧重于从Slit/Robo结构、Slit/Robo信号在肿瘤细胞中的表达,对肿瘤细胞恶变、增殖、迁移的作用,以及对肿瘤血管再生的影响等几个方面做一综述,探讨Slit/Robo信号的复杂性及其对不同肿瘤发生发展的作用,对其深入研究能够揭示Slit/Robo作为辅助诊断标志和肿瘤治疗靶点的潜在意义。
- 刘莹张君张毓
- 关键词:肿瘤
- 视网膜色素上皮细胞脱离体外培养条件后细胞保存液的研究
- 2007年
- 目的研究人视网膜色素上皮细胞(hRPE细胞)离体或脱离体外培养条件后,维持细胞活性、且延长细胞存活时间最适宜的液体。方法将5代以上hRPE细胞(本实验室保存)按常规冷冻、复苏培养于DMEM/F12培养基添加10%胎牛血清,EGF20μg/L和bFGF20μg/L条件下,至80%以上汇合,经胰蛋白酶消化,收集细胞、计数,置于6种不同保存液中(平衡盐液、Quinn’sadvantage medium、生理盐水、18氨基酸液、5%葡萄糖液和人工脑脊液),用Annexin V/FITC Kit染色,利用流式细胞术(FACS)检测细胞死亡或凋亡。采用2h至8h之间3个时间点,检测hRPE细胞在6种不同细胞保存液中的细胞状态。结果室温状态下,hRPE细胞30min内均发生坏死。4℃状态下,2h平衡盐液组凋亡率最低(0.9%);各组分别与平衡盐液组相比,显示人工脑脊液组与平衡盐液组之间存在显著差异;4h至8h,hRPE细胞凋亡率从26.74%上升至41.36%。各组总死亡率与凋亡率基本一致。结论4℃状态下,6种溶液中,平衡盐液是维持hRPE细胞脱离培养条件后保持细胞活性,且延长细胞存活时间最适宜的溶液。
- 孟书聪张君张小燕陆爱丽
- 关键词:视网膜色素上皮细胞细胞凋亡流式细胞术
- 基于B2C的网络团购顾客满意度影响因素探讨——以某服务团购网站为例
- 随着计算机和网络的普及,电子商务在人们的经济生活中具有越来越大的影响力。2010年开始网络团购作为B2C电子商务的一个新兴分支,以非常快的速度在国内兴起。从刚开始萌芽,网络团购就以极具竞争力的价格优势吸引了大批网上消费者...
- 张君
- 关键词:B2C电子商务网络团购顾客满意度竞争优势
- 新的抑癌基因UNC5D及其编码蛋白的新应用
- 本发明提供了新的抑癌基因UNC5D基因及其编码蛋白的新应用,具体涉及:UNC5D基因和/或其编码的蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用;检测UNC5D基因或其编码的蛋白的试剂在制备用于癌症的辅助诊断和/或预后判断的组合物中的...
- 张君张毓吕丹董冬
- 文献传递
- 肿瘤抗原及其应用
- 本发明属于癌症治疗及诊断领域,涉及肿瘤抗原及其应用,特别涉及IGF2BP3、IQGAP3、KRT23和CLCA2基因或其蛋白以及VGLL1和SNX31基因或其蛋白在制备用于肿瘤诊断的试剂盒中的应用。本发明还涉及建立新的血...
- 张毓张君徐清问赵伟王晓松