彭益强
- 作品数：42 被引量：140H指数：7
- 供职机构：华侨大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 固定化Klebsiella penumonia制备3-羟基丙醛被引量：2
- 2007年
- 用溶胶-凝胶(sol-gel)法包埋克雷伯杆菌细胞转化甘油制备3-羟基丙醛(3-HPA),考察了凝胶制备中的反应前驱体、改性剂对固定化细胞发酵水平的影响。结果表明,前驱体采用硅酸钠(sodiumsilicate),3-HPA发酵水平较采用正硅酸乙酯(TEOS)的提高了57.14%;改性剂采用聚乙二醇、葡萄糖、麦芽糖,3-HPA发酵水平分别为不添加改性剂时的110%,98.12%和90.1%。以硅酸钠为前驱体,不添加改性剂和添加不同改性剂固定化克雷伯杆菌细胞后,连续发酵7个批次,前者3-HPA发酵水平维持在70%～80%,后者3-HPA发酵水平分别稳定在80%～93.5%,69%～78%,78%～83%。添加聚乙二醇的固定化细胞保持了较高的3-HPA发酵水平,在批次发酵中它的3-HPA总得率保持在0.480～0.561g/g。
- 彭益强林芳王园园方柏山
- 关键词：3-羟基丙醛克雷伯杆菌固定化溶胶-凝胶生物工程
- 伴有辅酶原位再生的胞外酶耦合法制备(R)-苯基乙二醇被引量：2
- 2014年
- 经5轮诱变筛选,从近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis CICC1676)中分离得到产NADH依赖型羰基还原酶(Carbonyl reductase,CR)菌株CP-9。所产羰基还原酶(CRCp-9)经两步快速纯化获得纯化倍数为11.5倍,比活力为1.84 U/mg的酶液,其还原反应的最适pH值为6.5,最适温度为40℃。该酶转化β-羟基苯乙酮制备手性化合物(R)-苯基乙二醇,因此是(R)-专一性羰基还原酶。该酶与NADH普适性再生酶-甲酸脱氢酶(Formate dehydrogenase,FDH)在胞外相耦联,构建伴有辅酶再生与反复利用的CR/FDH双酶催化制备立体醇体系,底物β-羟基苯乙酮转化率达95.4%,产物(R)-苯基乙二醇得率为93%,辅酶的总转化数(Total turn number,TTN)达267,产物e.e.值为98.6%,批次耦合反应生产能力达0.8 g/L/h,较单酶催化有较大提高,与细胞转化法相比也具有较好的生产能力。因此,伴有辅酶再生的胞外酶耦合催化具有潜在的制备手性醇化合物的工业应用价值。
- 彭益强李汉林
- 关键词：近平滑假丝酵母羰基还原酶辅酶再生
- 耦合透性化辅酶循环制备手性(R)-苯基乙醇
- 2016年
- 通过耦合透性化博伊丁假丝酵母(Candida boidinii,C.boidinii)加强了近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis,C.parapsilosis)内羰基还原酶(Carbonyl reductase,CR)催化反应中的辅酶循环与反复利用,构建了有效的手性(R)-苯基乙醇透性化细胞耦合制备体系。实验结果如下:透性化的C.parapsilosis细胞底产物渗透效果增强,底物转化率由33.5%提升到43.8%;进一步外添加辅酶后,底物转化率由43.8%提高到了52.1%;耦合透性化C.boidinii细胞并同时外添加辅酶可大大增强辅酶循环效率,底物转化率可提高至71.8%。优化透性化细胞耦合体系反应条件,当以0.2 g近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)为基准时,在C.parapsilosis与C.boidinii细胞质量比为1.5∶1,底物浓度为10 mmol/L,辅酶浓度为0.1 mmol/L时,底物转化率可达78.2%。离心法收集细胞进行多批次反应,当反应12批次时,耦合体系仍然保持有55%底物转化率,此时总的底物转化率达70.3%,产物经高效液相色谱测定为(R)-苯基乙醇,对映体过量值(e.e.值)达98.2%。
- 彭益强陈李玲
- 关键词：透性化细胞辅酶再生羰基还原酶甲酸脱氢酶生物工程
- 源于红豆的羰基还原酶在(R)-苯基乙二醇制备中的应用
- 2016年
- 采取研磨、离心分离、多层过滤和丙酮沉析等步骤,从红豆中提取具有不对称还原芳香酮能力的羰基还原酶(CR),经快速分离纯化获得了纯化倍数为5.8倍的红豆源CRrb酶液,考察了其酶学特性,与微生物源CR的酶学特性进行比较,将CRrb与甲酸脱氢酶(FDH)耦合构建CRrb/FDH双酶体系连续催化β-羟基苯乙酮制备(R)-苯基乙二醇.结果表明,源于红豆的CRrb最适反应pH值为6.0,最适反应温度为45℃,在40～60℃范围内耐热性好于一般微生物源CR.CRrb的米氏常数Km=5.68 mmol/L,最大反应速率Vmax=20.21μmol/(min·m L),对底物的亲和力和催化效率比微生物源CR好.底物较佳耐受浓度为60 mmol/L,较微生物源的CR高.CRrb/FDH酶活比为1:1.5时耦合体系反应效率最佳,批次反应转化1 mol辅酶可获得产物的量由266 mol提高到365 mol.
- 彭益强鞠翰雪
- 关键词：红豆羰基还原酶甲酸脱氢酶辅酶再生
- 中性植酸酶产生菌的激光复合诱变筛选被引量：5
- 2006年
- 采用激光复合诱变方式筛选产中性植酸酶的大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草杆菌(Bacillus subtilis),混合波长λ=1.06+0.53μm,辐照时间1 m in,辐照功率15 W;酶的细胞定位实验表明,所产中性植酸酶是胞外酶;酶学特性测定表明,大肠杆菌所产植酸酶酶反应最适pH为7.4,最适温度为37℃,枯草杆菌所产植酸酶反应最适pH为7.4,最适温度为37℃;酶学性质分析表明,大肠杆菌所产植酸酶具有一定的pH适性和一定的温度耐受性。
- 彭益强张燕庄月娥方柏山张文珍
- 关键词：中性植酸酶激光诱变
- 纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵微胶囊固定化Candida krusei产甘油条件优化
- 2008年
- 研究了利用一种新型的纤维素硫酸钠/聚二甲基二烯丙基氯化铵(NaCS/PDMDAAC)中空微胶囊包埋Can-dida kruseiZJU5205制备甘油的过程。通过摇瓶培养过程中对初始包菌量、胶囊和胶珠、初始甘油浓度、胶囊大小、胶囊体积/发酵液体积等关键固定化参数和培养条件的优化,确立了NaCS/PDMDAAC微胶囊固定化Candida krusei的最佳工艺参数为包菌量为0.6 g/L,发酵初加入20 g/L甘油,胶囊体积/发酵液体积为0.4。
- 陈国姚善泾方柏山彭益强
- 关键词：CANDIDA固定化细胞微胶囊
- 用原生质体诱变选育高植酸酶活的黑曲霉变异株被引量：5
- 2002年
- 将 2株黑曲霉菌株 (I,II)在诱导产植酸酶的条件下分别制备成原生质体 ,并考察其原生质体形成及再生 ,经紫外诱变后 ,发现涂平板的黑曲霉 (II)原生质体在再生过程中菌落形态发生明显变化。考查突变菌种的植酸酶酶活 ,筛选到其中一个变异株比原始黑曲霉 (II)亲本株的植酸酶酶活提高了 2 .2倍。
- 彭益强贺淹才全成恒苏丽政
- 关键词：植酸酶黑曲霉诱变原生质体
- 一株产NAD^+依赖型甘油脱氢酶嗜热杆菌的筛选
- 2007年
- 将采集于清源山、华大后山果园、华大南浦果园、实验室附近等多处的高温堆肥样品在60℃、pH7.0条件下进行富集培养,其中南浦果园堆肥样品菌体长势较好,菌株呈暗绿色;逐步提高培养基中甘油浓度(0.5g/L^3g/L),进行菌株产甘油脱氢酶(GDH)的驯化培养与复筛,经8个批次的复筛,获得一株产GDH酶活达0.201U/mL的棕色菌株,编号TB8-5;经镜检分析同时结合菌落生长特性并经生理生化实验反应鉴定,初步判断筛选出的菌株属嗜热芽孢杆菌属;菌株发酵液中产物组分鉴定为二羟基丙酮(DHA),含量为0.597mg/mL,相应的GDH酶活也最高,其最适反应温度为50℃,最适反应条件pH为8.0,Zn2+对酶活有一定的促进作用.
- 彭益强范恩明方柏山
- 关键词：嗜热芽孢杆菌甘油脱氢酶二羟基丙酮
- 吸附树脂在酶法制备1,3-丙二醇中的应用被引量：2
- 2008年
- 筛选出了对辅酶NAD、酶蛋白弱吸附(吸附率分别为10%,9%),对产物1,3-丙二醇(1,3-PD)与二羟基丙酮(DHA)强吸附(吸附率分别为30.5%,34.5%)的吸附树脂SIPI-40,并进行产物的吸附分离,达到酶与辅酶回流利用、反应连续进行的目的,并应用于伴有辅酶NADH再生的酶法催化甘油(Gly)制备1,3-PD的新型反应体系的构建;经单因素考察,确定较佳操作条件是:树脂质量与底产物浓度数值比大于1.4:1,吸附时间为2h;在此条件下进行反应操作,测得每批次反应中1,3-PD相对于甘油的产率稳定在20%左右(分别为22.5%,20.6%与19.3%);在连续催化反应中,1,3-PD总产率达45.3%。实验结果说明,吸附树脂分离产物可应用于1,3-PD酶法连续反应体系的构建。该研究工作的新颖性,已为厦门市科学技术情报研究所2006年12月11日出具的第2006581号《科技查新报告》所证实。
- 彭益强兰琳陈巍方柏山
- 关键词：吸附树脂辅酶再生3-丙二醇酶法生产
- 树脂分离技术在酶法制备1,3-丙二醇中的应用被引量：3
- 2008年
- 从几种吸附树脂中筛选出了树脂DA201。树脂DA201对酶、辅酶吸附较少(吸附率分别为13.13%,14.5%)且对酶活无较大破坏,对产物1,3-丙二醇(1,3-PD)与二羟基丙酮(DHA)吸附较多(吸附率分别为23%,27%)。利用树脂DA201进行产物的富集分离及酶、辅酶回流再利用,实现伴有辅酶NADH再生的1,3-PD酶法连续反应。在底物浓度为1 g/L时,树脂质量浓度为底物浓度的4.8倍、吸附时间为6 h,树脂DA201对底产物有较好的吸附分离效果。在此条件下进行1,3-PD的2个批次连续制备,第1、第2批次1,3-PD转化率分别为42.9%、35.5%,总转化率为39.72%。实验结果说明,吸附树脂对底产物、酶与辅酶具有一定的分离作用,利用树脂的分离作用可有效地实现伴有辅酶再生的酶催化反应的连续进行。
- 彭益强兰琳陈巍方柏山
- 关键词：酶法制备辅酶再生1,3-丙二醇
