徐华
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高校重点实验室项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 维甲酸抑制甲状腺鳞癌细胞株生长增殖作用机制的探讨被引量：1
- 2009年
- 目的观察9-顺维甲酸(9-cis-RA)对甲状腺鳞癌SW579细胞株生长增殖及维甲酸受体β(RARβ)和p21表达的影响,进而探讨维甲酸的抗癌作用机制。方法将甲状腺鳞癌细胞株SW579分为对照组和实验组。实验组加入不同浓度的9-cis-RA,使其终浓度分别为1×10-7mol/L、5×10-7mol/L、1×10-6mol/L、5×10-6mol/L、1×10-5mol/L,各组细胞均在培养24 h后加药,继续培养48 h。在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;采用MTT比色法测定细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期;用RT-PCR方法检测SW579细胞RARβ及p21mRNA的表达。结果低浓度9-cis-RA组(1×10-7mol/L、5×10-7mol/L、1×10-6mol/L)肿瘤细胞有向良性细胞形态转化的趋势;高浓度组(5×10-6mol/L、1×10-5mol/L)细胞生长密度较对照组明显降低,与低浓度组相比,向成熟分化的趋势不明显。MTT结果显示,实验组细胞均出现显著的生长抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪分析,实验组随着9-cis-RA的升高,S期细胞在细胞周期中所占比例逐渐减少,G1期细胞则明显增加(P<0.01),细胞滞留在G1期。RT-PCR检测结果表明,经不同浓度维甲酸处理的各组细胞RARβ和p21 mRNA表达水平均显著上调。结论9-顺维甲酸在一定浓度范围内对甲状腺鳞癌细胞株SW579有剂量依赖性的增殖抑制作用,其机制可能与提高SW579细胞RARβ基因的表达,进而再上调p21的表达有关。
- 范会瑜肖建英李男崔明宇王翠瑶申静林徐华陈景清
- 关键词：9-顺维甲酸甲状腺鳞癌P21
- NIS研究进展及其在肿瘤治疗中的应用被引量：1
- 2008年
- 钠/碘共同转运体(sodium/iodide symporter,NIS)是一种跨膜糖蛋白,其表达不但与多种甲状腺疾病密切相关,而且在甲状腺及非甲状腺中可激活对碘的摄取过程。随着基因克隆与转染技术的发展,将NIS基因转染到甲状腺及非甲状腺肿瘤中,可作为治疗基因在体内发挥作用,这使得131I有望应用于甲状腺恶性肿瘤及非甲状腺肿瘤的治疗,为肿瘤的治疗提供新的思路。本文就NIS的结构与功能、NIS的临床意义、NIS基因与肿瘤治疗的关系及进展作以综述。
- 徐华陈佳肖建英
- 关键词：基因转染肿瘤治疗
- pEGFP-C3-hNIS重组质粒的构建及其在人胃癌BGC-823细胞的表达
- 2011年
- 目的构建人钠碘转运体(hNIS)基因真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3-hNIS,并研究重组hNIS基因在人胃癌BGC-823细胞中的表达情况。方法采用Trizol一步法从甲状腺手术患者的甲状腺组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到hNIS的可编码区基因,并克隆到T载体上,测序后亚克隆到真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3的多克隆位点,获得重组真核表达载体pEGFP-C3-hNIS。分别将pEGFP-C3-hNIS重组质粒(实验组)和pEGFP-C3(对照组)瞬时转染至人胃癌BGC-823细胞中,转染48 h后,于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达情况,并通过Western blot方法检测hNIS基因的蛋白表达水平。结果序列分析证实克隆片段与GenBank公布的hNIS基因序列(序列号:NM-000453)相似性达99.90%。转染48 h后,实验组与对照组细胞均可观察到较强绿色荧光信号,用hNIS基因特异性抗体检测表明实验组hNIS表达水平明显高于对照组。结论成功构建hNIS真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3-hNIS,并能在人胃癌BGC-823细胞中高表达。
- 徐华肖建英刘超张秀梅高月王翠瑶
- 关键词：胃肿瘤基因克隆转染
