徐华
- 作品数：3 被引量：21H指数：1
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- 发文基金：国家林业公益性行业科研专项国家林业局重点科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 带有GFP标签的油松苯丙氨酸解氨酶基因表达载体的构建被引量：1
- 2014年
- 利用基因重组技术,将油松的苯丙氨酸解氨酶基因(TaPAL)克隆到PBI121植物表达载体中,并且用报告基因GFP替换了GUS,构建了包含绿色荧光蛋白(GFP)基因的植物重组表达载体PBI121-GFP-TaPAL,GFP标签比GUS基因更加易于检测,方便进行TaPAL功能鉴定方面的研究。利用电击法将重组表达载体成功的转化进农杆菌GV3301中。该研究可以为深入研究苯丙氨酸解氨酶的结构及功能及进一步通过导入次生代谢关键酶来提高植物的抗病育种提供基础。
- 李薇徐华樊军锋
- 关键词：苯丙氨酸解氨酶基因植物表达载体农杆菌绿色荧光蛋白
- 油松优良家系及单株配合选择研究被引量：19
- 2006年
- 对45个油松优树的半同胞子代进行了测定,从中选出8个树高、胸径、材积平均增产18.3%,28.4%和91.7%的优良家系,其遗传增益分别为12.8%,11.9%和30.9%。再从优良家系内选择44株优良单株,其树高、胸径、材积平均增产29.9%,36.9%和128%,预期遗传增益分别为11.7%,15.4%和43.2%,选出的优良单株可用于高世代种子园的营建。
- 杨培华樊军锋刘永红韩创举徐华李安平谢俊峰杨世荣
- 关键词：油松优良家系优良单株
- 油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析被引量：1
- 2013年
- 利用基因重组技术,以油松PAL基因(TaPAL)CDS区(2 157bp)作为外源基因的同源重组片段,构建了pET-28a-TaPAL重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达并进行分析。经SDS-PAGE电泳检测,在分子量80KD处获得一条特异蛋白的表达条带,且其大小与预期相符。在温度28℃,IPTG浓度1.5mmol·L-1,时间3h条件下,重组质粒的表达量最大。可溶性分析表明,在最佳诱导条件下,该蛋白主要以包涵体形式存在。粗酶活性测定表明,粗酶(在20℃、IPTG浓度1mmol·L-1条件下诱导10h)比活力为55.3μmol·min-1·gpro-1,即55.3U·g-1。构建的pET-28a-TaPAL重组载体能够在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出具有生物活性的融合蛋白。
- 魏宁樊军锋徐华
- 关键词：油松苯丙氨酸解氨酶原核表达
