戴宗祥 作品数:32 被引量:61 H指数:5 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 云南省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
猴脾转移因子与人脾转移因子治疗小儿复发性呼吸道感染的效果比较 被引量:2 1989年 本文报道了猴脾转移因子(TFⅢ)与人脾转移因子(TFⅠ)治疗小儿复发性呼吸道感染的效果比较,结果表明,TFⅡ的临床疗效与TFⅠ相同,最后讨论了TFⅢ的应用前景。 曾连壁 徐治统 王彦儒 赵颖萝 杨惠仙 戴宗祥 蒋云泉 许如君 李惠敏 戴长柏关键词:呼吸道感染 脾脏 恒河猴脾肾细胞中的ANP样物质 1992年 用兔抗人α-心房利钠多肽(atrial natriure-tic peptide,ANP)血清和PAP免疫组织化学方法,观察到恒河猴脾白髓和肾髓质上皮细胞中存在ANP样免疫活性物质,其棕色颗粒,主要分布于细胞核周质内。猴脾提取物经Seph-adex G-15分离,可得到具有降压、利尿、利钠的组分,这些活性多肽的结构和功能需待进一步研究。 戴宗祥 许如君 戴长柏 赵石 罗其胜 王庆玲关键词:恒河猴 脾细胞 肾细胞 ANP 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子壳聚糖-海藻酸钠微囊的制备 2010年 目的以壳聚糖和海藻酸钠为原料,制备重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)微囊,探讨开发口服蛋白多肽类药物的可行性。方法以rhGM-CSF为药物模型,通过壳聚糖与海藻酸钠聚电解质的络合反应制备rhGM-CSF壳聚糖-海藻酸钠微囊,观察微囊的形态大小,测定其包封率,不同pH值下的膨胀度和体外释放率。结果制备的rhGM-CSF壳聚糖-海藻酸钠微囊呈均匀、完整的圆球形,平均直径1mm左右;包封率达80%以上;在模拟肠液(磷酸盐缓冲液,pH7.4)中浸泡3h,膨胀度可达600%,药物释放率达85%以上。结论壳聚糖-海藻酸钠微囊具有肠溶控释作用,有望成为rhGM-CSF等蛋白类口服药物的控释载体。 戴宗祥 姬秋彦 杨增福 杨旭 李健峰 李智华 徐维明关键词:壳聚糖 海藻酸钠 微囊 一种乙型流感病毒Vero细胞冷适应株及其应用 本发明提供一种乙型流感病毒Vero细胞冷适应株及其应用,其命名为B/Yunnan/2/2005Vca(By),微生物保藏号为:CGMCCNO.7009。该毒株能在Vero细胞上连续传代培养,血凝滴度保持在1:512-1:... 廖国阳 李卫东 马磊 杨帆 杨景晖 周健 宋绍辉 蔡玮 寸怡娜 高菁霞 张新文 戴宗祥 姜述德文献传递 流感H3N2疫苗纳米乳佐剂的优化及安全性 被引量:1 2014年 目的 优化纳米乳新配方,并从载水量及载苗方式探讨影响佐剂效果的因素。方法 将ICR小鼠随机分为7组,每组5只,即A1、A2、A3、A4纳米乳佐剂组[A1(载水量66.7%)、A2(载水量80.0%)、A3(载水量85.7%)为成乳后加入疫苗吸附,A4(载水量80.0%)为成乳前加入疫苗包裹]:分别加入等量H3N2裂解疫苗[血凝素(hemagglutinin,HA)1.8μg];空白对照组:生理盐水;单独疫苗组:HA 1.8μg;铝佐剂组:A(lOH)30.2 mg,HA 1.8μg。均经小鼠大腿腓肠肌注射0.2 ml,0、21 d免疫,于初免后第1周开始,每周经尾动脉采血,分离血清,检测血凝抑制(haemagg-lutination inhibition,HI)效价,比较各组的免疫应答水平。以初免后1周内小鼠体重变化及最大给药量试验分析纳米乳的最大耐受量(maximal tolerance dose,MTD)。采用马尔文粒度仪检测不同载水量纳米乳粒径大小及分散系数。伪三元相图法及静置观察检测稳定性。结果 小鼠初免后第5周,单独疫苗组小鼠HI滴度与A1、A2、A3纳米乳佐剂组相比,差异有统计学意义(P〉0.05),与A4纳米乳佐剂组相比,差异无统计学意义(P〈0.05);A3纳米乳佐剂组于初免后第5周,HI滴度达到峰值,〉为单独疫苗组的4倍,也明显高于铝佐剂对照组和A1、A2纳米乳佐剂组(P均〉0.05)。纳米乳搭载或包裹疫苗对小鼠生长无明显影响,MTD〈25 ml/kg。纳米乳平均粒径分布均为10~100 nm左右,纳米乳A1、A2、A3粒径大小无明显差异,均匀度较好。载水范围大的纳米乳可搭载足量抗原,稳定性好。结论 载水量85.7%、以吸附方式载苗的纳米乳佐剂效果最佳,且具有良好的安全性。 赵兰华 刘洪卿 钏鸿云 段男 杨姝 杨磊 戴宗祥 李映波关键词:纳米乳 佐剂 流感疫苗 安全性 用无血清适应的Vero细胞培养H5N1型流感病毒条件的优化 被引量:5 2015年 目的优化无血清适应的Vero细胞(SFM-Vero细胞)培养H5N1型流感病毒的条件。方法将H5N1型流感病毒接种于SFM-Vero细胞,于免疫荧光显微镜下观察病毒感染情况。对病毒无血清培养条件MOI(0.05、0.10、0.15、0.20)、细胞培养时间(12、24、36、48 h)、培养液基础培养基(DMEM/F12、M199、RPMI1640及MEM:DMEM/F12混合液)、培养温度(33、33.5、34、34.5、35和37℃)、收获时间(24、36、48、60和72 h)、培养液p H值(6.8、7.1、7.4、7.7、8.0和8.3)和TPCK胰酶浓度(0.5、1.0、1.5μg/ml)进行优化,并检测最佳条件无血清培养的H5N1型流感病毒的血凝效价及形态。结果 H5N1型流感病毒对SFM-Vero细胞具有感染性。最佳无血清培养条件为:MOI=0.1和0.15,细胞培养时间36 h,以DMEM/F12为基础培养基,病毒培养温度33.5和34.5℃,病毒收获时间60 h,培养液p H 7.7,TPCK胰酶浓度为1.0μg/ml。最佳条件无血清培养的H5N1型流感病毒的血凝效价为1∶512,电镜下观察病毒形态完整。结论确定了H5N1型流感病毒对SFM-Vero细胞具有感染性,并优化了SFMVero细胞培养流感病毒的适宜条件,为更具有生物安全性流感疫苗的研发奠定了基础。 马磊 耿兴良 苏杨起 杨家方 常亚军 段男 邹俊如 刘圆圆 刘婧 戴宗祥 李卫东 廖国阳关键词:无血清培养 VERO细胞 成人剂量型流行性感冒病毒裂解疫苗的稳定性研究 被引量:3 2013年 目的了解疫苗在不同温度和不同时间存放的质量变化,为研制安全有效的流感疫苗提供依据。方法将流感疫苗放置在4℃和37℃进行长期稳定性和加速稳定性试验,不同存放时间点测定流感病毒血凝素(HA)含量及各项质量指标。结果疫苗经4℃保存18个月和37℃保存2周,HA含量和其他质量指标都符合药典要求。结论成品流感疫苗在1年有效期内均合格。 周健 高菁霞 马磊 刘婧 廖国阳 戴宗祥关键词:流行性感冒病毒裂解疫苗 血凝素 稳定性 Vero细胞培养流感病毒的低血清培养基的筛选 被引量:7 2014年 目的筛选Vero细胞生长的最适低血清培养基,用于流感病毒的细胞培养。方法分别以MEM、M199、DMEM/F12、DMEM/F12与MEM混合物(1∶1)为基础培养基,添加5%、2%、1%的小牛血清传代培养Vero细胞,通过细胞形态观察、细胞计数及MTT法检测细胞的增殖活力筛选最适基础培养基;将流感病毒接种低血清适应的Vero细胞,检测病毒收获液的血凝效价及残留BSA含量,电子显微镜观察病毒形态。结果以DMEM/F12与MEM混合物(1∶1)为基础培养基,添加2%小牛血清培养的Vero细胞长势良好,细胞数量较多,增殖活力最强。低血清适应的Vero细胞培养的流感病毒血凝效价最高可达1∶512,平均值为1∶384;病毒液中的残留BSA含量约为正常血清培养条件下的1/18;病毒形态完整。结论成功筛选出Vero细胞培养流感病毒的低血清培养基,为更具生物安全性的流感疫苗的研发奠定了基础。 耿兴良 戴宗祥 段盼盼 郭琦 宋绍辉 寸怡娜 姜述德 廖国阳关键词:VERO细胞 流感病毒 血清 培养基 生物安全性 脑膜炎奈瑟氏菌外膜蛋白NhhA的克隆表达及免疫学分析 被引量:4 2010年 通过克隆脑膜炎奈瑟氏菌NhhA基因GNA0992于原核表达载体pET-20b,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了可溶性表达,表达量约占菌体蛋白总量的20%。经初步纯化后免疫小鼠,对其免疫原性进行了初步分析。结果显示,经3次腹腔免疫,血清IgG滴度达到23186,同时杀菌力实验显示NhhA能诱导针对B群脑膜炎奈瑟氏菌的补体依赖的杀菌反应。证明了NhhA是一种良好的抗原,为疫苗开发的蛋白靶标筛选工作奠定了基础。 陈柳 李健峰 徐维明 戴宗祥 李智华 孙强明关键词:脑膜炎奈瑟氏菌 原核表达 免疫原性 流行性感冒病毒裂觧疫苗的制备工艺研究 被引量:1 2013年 目的研制安全有效的流行性感冒(流感)病毒裂解疫苗[Influenza Vaccine(Split Virion),Inactivated;lnfV-Sp]。方法将H1N1、H3N2和B型三株流感病毒分别接种鸡胚,收取尿囊液,经乙醚和聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)裂解病毒,制成疫苗,电镜观察了流感病毒裂解效果,用美国癌症研究所选育的Swiss小鼠[(Institute of Cancer Research,ICRUS)(ICRUS)分送各国饲养实验,各国称为ICR小鼠]进行了疫苗的安全性和免疫学效果实验。结果电镜观察结果显示,裂解剂对病毒裂解完全,疫苗中无完整病毒颗粒,裂解效果好,疫苗具有良好的安全性和免疫原性。结论动物实验初步表明,该疫苗安全有效,为开展人体临床研究提供了依据。 高菁霞 马磊 周健 蔡玮 宋绍辉 张新文 郭晨 周竞贤 李卫东 廖国阳 戴宗祥关键词:流行性感冒病毒裂解疫苗 血凝素 电子显微镜 免疫原性