晁跃辉
- 作品数：74 被引量：177H指数：8
- 供职机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学理学更多>>
- 拟南芥AtZFN3基因RNA干扰载体的构建与表达
- 2020年
- 为了构建具有发夹结构的RNAi表达载体来研究拟南芥AtZFN3基因表达的效果。根据拟南芥(Arabidopsis thaliana)锌指蛋白AtZFN3基因序列,设计含有酶切位点的两对特异性引物。以拟南芥cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正、反义DNA片段,将正、反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置上,构建含有发夹结构的RNAi载体pART-ZFN3。利用农杆菌介导法,将pART-ZFN3转化到拟南芥中,PCR检测证实获得了5株转基因植株,经荧光定量PCR检测,证明了转基因植株中AtZFN3基因表达量显著低于未转基因的植株。结果表明:具有发夹结构的RNAi载体pART-ZFN3已构建成功,它对拟南芥AtZFN3基因的表达具有抑制作用,为深入分析拟南芥AtZFN3基因功能提供了基础。
- 李舒文晁跃辉韩烈保
- 关键词：锌指蛋白RNAI
- 蒺藜苜蓿MtSAG113基因的转化及表达特征分析
- 2022年
- Senescence Associated Gene 113(SAG113)基因属于PP2Cc超家族,该基因的研究主要集中在植物衰老领域。为分析蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtSAG113基因的表达特征,探究MtSAG113基因的功能。该基因从蒺藜苜蓿中克隆得到,以烟草(Nicotiana tabacum L.)和蒺藜苜蓿R108为实验材料,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草获得具有抗性的转基因植株,并对逆境胁迫和外源激素诱导下蒺藜苜蓿MtSAG113基因的表达情况进行检测。结果显示:PCR检测成功获得5株转基因植株并在在烟草中成功表达,且转基因植株相比于野生型出现矮小和叶片早衰的表型;MtSAG113基因在衰老叶片中表达水平远远高于未衰老叶片;未处理的叶片中,该基因的表达水平随着时间的延长逐渐提高;干旱胁迫下,该基因表达水平随着时间推移显著提高;高盐胁迫下,该基因表达水平明显上调,在12 h达到峰值;该基因对6-BA诱导尤为敏感,表达水平随着时间推移显著提高,在4 h达到峰值,约为未处理的1 000倍;而在ABA和IAA诱导条件下,MtSAG113呈现类似的表达特征,从4 h开始提高,12 h达到峰值;亚细胞定位结果显示,该基因位于细胞核内。以上结果表明:MtSAG113基因可能在蒺藜苜蓿衰老调控上发挥着一定的作用;而高盐、干旱和外源激素对MtSAG113基因表达具有一定的调节作用,以上研究为进一步分析MtSAG113基因的功能提供基础。
- 李舒文李殷睿智董笛王梦迪晁跃辉韩烈保
- 关键词：蒺藜苜蓿烟草逆境胁迫外源激素
- 紫花苜蓿MsNAP基因克隆及烟草转化被引量：17
- 2016年
- NAP转录因子是植物体内特有的转录因子,在调控植物生长发育、衰老速度以及响应生物、非生物胁迫等方面有重要作用。采用RT-PCR方法克隆紫花苜蓿NAP转录因子基因,将其命名为MsNAP(GenBank登录号:KM211498.1),MsNAP编码区长822bp,编码274个氨基酸。生物信息学分析显示:其与其他物种NAP蛋白具有较高的同源性,与蒺藜苜蓿同源性最高。荧光定量技术分析结果显示:MsNAP基因在花中表达量最高,衰老叶片中的表达水平远远高于未衰老叶片。利用DNA重组技术将MsNAP基因完整编码区连接至植物表达载体pBI121,成功构建植物表达载体pBI-MsNAP,通过农杆菌介导方法转化烟草,PCR和RT-PCR检测结果显示,成功获得了转MsNAP基因的转基因烟草,初步证明在转基因烟草中外源基因MsNAP能够转录表达,为研究MsNAP基因功能奠定了基础。
- 晁跃辉李珊珊滕珂许立新肖国增郭涛韩烈保
- 关键词：紫花苜蓿烟草转基因
- 紫花苜蓿锌指蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开一种紫花苜蓿锌指蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的紫花苜蓿锌指蛋白，是具有序列表中序列2所示氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将序列2所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与序列2...
- 康俊梅孙彦晁跃辉张铁军杨青川
- 文献传递
- 紫花苜蓿MsHB1基因的克隆及表达分析
- 2023年
- HD-Zip(Homologous structural Domain-leucine Zip,同源结构域-亮氨酸拉链)蛋白是植物特有的转录因子,其中HB1属于HD-ZIP I亚族。通过调节植物体内的内源激素含量变化,HB1转录因子可以提高植物对干旱、高盐等不利环境的抵抗能力。本文为探究紫花苜蓿HB1基因的生物学功能,采用RT-PCR技术成功克隆了MsHB1基因。其编码区长867 bp,编码288个氨基酸。氨基酸序列分析结果表明,HB1蛋白为不稳定蛋白。系统发育树分析表明HB1蛋白与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)同源蛋白的亲缘关系接近。构建MsHB1的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中成功诱导紫花苜蓿MsHB1蛋白表达,Western Blot也证实MsHB1蛋白表达成功。表达分析显示:MsHB1基因在紫花苜蓿根、茎、叶中均有表达,在不同发育阶段中,幼嫩的叶片中表达最高。MsHB1在NaCl和ABA处理时的基因表达水平升高,推测MsHB1可能在紫花苜蓿高盐等胁迫应答方面发挥着重要的作用。
- 李家兴周丽莹苑峰刘亚玲栾雅琳晁跃辉
- 关键词：紫花苜蓿原核表达
- 紫花苜蓿MsHST基因克隆及拟南芥转化被引量：4
- 2016年
- 运用RT-PCR法从紫花苜蓿(Medicago sativa)中成功克隆出长度约1100bp的尿黑酸法呢基转移酶基因MsHST,采用qRT-PCR的方法,分析MsHST基因的表达特征,结果显示MsHST在所有组织中均有表达,但在叶片中表达量最高,根中最低;随叶片的衰老,表达量降低。且构建了超表达载体pBI-MsHST,并获得拟南芥(Arabidopsis thaliana)转基因植株,经PCR,RT-PCR和GUS染色检测转基因植株,初步证实目的基因在拟南芥中表达。
- 李奕稹晁跃辉康俊梅杨青川金洪
- 关键词：紫花苜蓿拟南芥转基因
- 一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法
- 本发明涉及一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法，包括如下步骤：1)愈伤组织的诱导：将外植体接种到愈伤诱导培养基中，培养至形成愈伤组织；2)愈伤组织的分化：将所述愈伤组织接种到前期分化培养基中，至出现体胚；再将所述体胚接种...
- 袁建波晁跃辉韩烈保谢琦
- 文献传递
- 植物纤维素合酶结构与基因表达研究进展被引量：3
- 2016年
- 纤维素作为具有重要经济价值的生物多聚体,对人类的衣、食及新型能源的发展具有深刻的影响。近年来,关于纤维素的研究热点依然是合酶蛋白的提纯及纤维素体外合成,为此对于纤维素合酶(Cellulose synthase,CESA)及其复合体(cellulose synthase complex,CSC)结构和功能的掌握尤为重要。结晶学和3D建模技术在蛋白结构预测上的应用,推翻了原有的微纤丝合成模型,并依据数据提出了新的猜测。本文总结了最新CESA蛋白生化结构、功能、转录及翻译后修饰的调控,为后续的研究提供新的依据。
- 郭涛杨青川晁跃辉王淑敏康俊梅
- 关键词：纤维素纤维素合酶
- 草垫植入对混合草坪坪床稳定性和表观质量的影响被引量：4
- 2020年
- 为研究人造草垫式混合草坪中不同的人造草垫对草坪表观质量和稳定性的影响,以多年生黑麦草品种“名仕”为研究材料,以无草垫处理为对照,研究了3种人造草垫植入对草坪表观质量、地上地下生物量和根系参数(根长、根表面积、根体积和根活力)的影响,并通过直剪试验对坪床稳定性进行测定。结果表明:各草垫处理均降低了草坪的色泽、归一化差异植被指数和密度,生长至116 d时,3个草垫处理组的密度分别比对照组降低了20.8%、8.7%和14.7%,有背衬的草垫结构增加了草坪草的均一度;同时,草垫处理降低了草坪草的地下生物量、根系长度、根总表面积和根系总体积,影响了垫上和垫下部分的根系活力。草垫处理增加了混合系统的抗剪强度和表面硬度,3个草垫处理组分别比对照组的内聚力增加了51.9%、162.7%和134.6%,硬度分别比对照组增加了34.6%、32.8%和45.8%。因此,人造草垫式混合草坪中,各种草垫在不同程度上抑制了根系生长,进而影响地上部分的生长和表观质量;人造草垫式混合系统稳定性高于天然草坪,且有背衬结构的草垫对提高坪床稳定性的效果更为明显,草垫对提高草坪的强度有积极作用。
- 张桐瑞李富翠李辉季双旋范志浩陈雨峰晁跃辉韩烈保
- 关键词：根系参数根活力抗剪强度
- 蒺藜苜蓿CIM基因的克隆及转化
- 2024年
- CIM(Cytokinin induced massage)是expansin-B2家族的基因,该基因的主要功能是影响植物细胞壁的松弛程度,从而影响植被由幼苗长成成熟植株的过程以及对各种环境胁迫的抵抗。本研究选取蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)品种R108作为试验材料,采用PCR技术克隆出CIM基因。CIM基因的长度为828 bp,能够编码275个氨基酸。生物信息学分析显示:与蒺藜苜蓿CIM基因表达的expansin蛋白亲缘性相近的是鹰嘴豆(Cicer arietinum)expansin-B2蛋白。利用DNA重组技术构建植物表达载体35Spro::CIM,然后通过农杆菌侵染的方法将35Spro::CIM整合到紫花苜蓿叶片的基因组中,经过一段时间的组织培养,最终成功获得了20株转基因植物。本试验为以后探究CIM基因对植物发育进程的作用给出了数据参考和试验材料。
- 艾晔钱旭韩烈保晁跃辉赵彦
- 关键词：蒺藜苜蓿紫花苜蓿
