朱羿龙
- 作品数：55 被引量：44H指数：3
- 供职机构：长春中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 重组痘苗病毒rVTT-JEVE理化特性研究
- 研究背景:痘苗病毒(Vaccina virus,VACV)属痘病毒科(Poxviridae)正痘病毒属(Orthopoxvirus),为双链DNA病毒,其核心结构外包裹有脂质囊膜,膜上分布有管状和球状的包膜蛋白,其核心结...
- 肖朋朋刘昊阎富龙陈智飞朱羿龙辛舒王茂鹏靖杰鲁会军金宁一
- 文献传递
- 平贝母水提物通过激活AMPK/ACC通路和调节肠道菌群减轻小鼠非酒精性脂肪性肝病
- 2024年
- 目的:探索平贝母水提物(aqueous extract of Fritillaria ussuriensis,FU-AE)抗非酒精性脂肪性肝病的作用效果与机制。方法:通过网络药理学分析平贝母(Fritillaria ussuriensis Maxir.,FU)与非酒精性脂肪性肝病的关联,利用高脂饮食(high fat diet,HFD)+10%果糖饮水诱导小鼠构建非酒精性脂肪性肝病小鼠模型,给予小鼠平贝母水提物高、中、低三个剂量进行干预治疗。通过比色法检测实验小鼠血清中门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(to-tal cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平;HE染色评估小鼠肝脏病理学变化,明确平贝母水提物抗非酒精性脂肪性肝病的效果;提取肝脏组织蛋白,Western blot检测AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)通路相关蛋白的表达,明确平贝母抗非酒精性脂肪性肝病作用机制。运用16S rRNA测序技术探究盲肠内容物微生物组成等,揭示平贝母水提物对非酒精性脂肪性肝病小鼠肠道菌群结构的调节作用。结果:平贝母水提物(高剂量)能够改善非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脂肪变性(P<0.05)。与模型组比较,平贝母水提物(高剂量)干预组AST、ALT、TG、TC、LDL-C水平均显著性下降(P<0.05),HDL-C水平显著性上升(P<0.05);平贝母水提物(高剂量)干预组能够显著性增加模型小鼠肝脏中磷酸化AMPKα、AMPKα和磷酸化ACC蛋白水平(P<0.05),显著性减少ACC蛋白的表达水平(P<0.05);并显著性增加潜在有益菌Faecalibaculum ro-dentium、Lactobacillus johnsonii和Akkermansia muciniphila的相对丰度(P<0.05)。结论:平贝母水提物可能通过激活AMPK/ACC通路和调节肠道菌群结构、改善小鼠非酒精性脂肪性肝病。
- 谢诗敏李玥张兆鹏杨霞李一权韩继成万怡宁陈慧丹金宁一朱羿龙朱光泽
- 关键词：网络药理学非酒精性脂肪性肝病肠道菌群
- HIV-1 B亚型假病毒的制备与鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的制备携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和ENV包膜蛋白的HIV-1 B亚型假病毒用于感染研究,并建立可行的鉴定方法。方法双质粒共转染HEK293T细胞后收获病毒上清,TRIzol法提取病毒基因组并采用RT-PCR进行报告基因扩增,Western印迹和ELISA法检测病毒P24抗原。假病毒感染HIV-1允许细胞,进行报告基因检测、病毒滴度测定以及单轮感染活性实验研究。结果与结论建立了HIV-1假病毒制备与鉴定方法,制备获得了B型HIV-1假病毒,经鉴定具备感染SupT1和TZM-bl细胞能力,为HIV-1与宿主细胞相互作用研究奠定了基础。
- 王茂鹏李昌杜寿文朱羿龙朱娜孙丹丹金宁一
- 关键词：HIV-1
- 乳酸菌表达CRISPR gRNA载体的构建与鉴定被引量：1
- 2017年
- [目的]构建并筛选重组gRNA(向导RNA)表达质粒p SJCR-LDH和p SJCR-C9PX,并对gRNA在乳酸菌中的表达进行鉴定。[方法]通过PCR技术扩增复制子SH71、氯霉素抗性基因CM和gRNA表达盒片段。将CM片段分别与gRNA表达盒进行融合,再与SH71复制子进行无缝克隆。通过转化,构建重组质粒p SJCR-LDH和p SJCR-C9PX。应用PCR、RT-PCR、Real-Time PCR对重组质粒进行鉴定,gRNA表达验证及拷贝数检测。[结果]PCR及RT-PCR结果显示获得169 bp大小目的条带,表明获得重组质粒载体且该gRNA表达载体在植物乳杆菌WCFS1株、CGMCC1.557株、乳酸乳球菌MG1363株中均成功表达,绝对荧光定量PCR检测获得LDH-gRNA标准曲线为y=-3.480log X+45.34,扩增效率为93.8%;C9PX-gRNA标准曲线为y=-3.327log X+37.07,扩增效率为99.8%。[结论]为利用CRISPR基因编辑技术在乳酸菌中进行基因操作奠定基础,为乳酸菌载体构建提供方法。
- 邸洋王茂鹏李昌潘荣荣荣凤君杜寿文朱羿龙郭焱金宁一
- 关键词：乳酸菌重组表达质粒CRISPR
- IFITM2的克隆表达及其抗病毒作用初探
- 2013年
- 目的:构建含有ifitm2基因的重组质粒,在人胚肾HEK293T细胞中表达,并验证IFITM2蛋白的抗病毒作用。方法:参照Genbank ifitm2基因序列,设计上下游引物,通过RT-PCR技术扩增ifitm2基因,并将扩增产物连接至pMD18-T-sim-ple载体上,目的基因测序正确后进一步亚克隆至真核表达载体pVAX1上,转染HEK293T细胞,通过RT-PCR,蛋白免疫印迹(Western blot)和激光共聚集显微镜(LCSM)验证外源基因在细胞内的表达情况。同时HEK293T细胞过表达IFITM2蛋白,利用含有EGFP基因的VSV-G假膜病毒感染细胞,通过Western blot检测IFITM2蛋白对病毒的抑制作用。结果:成功获得ifitm2基因,测序正确,将其连接到pVAX1载体中,经酶切鉴定,证明含有ifitm2基因的重组质粒构建成功,Western blot和LCSM分析表明,目的基因能够在HEK293T细胞中表达,且呈广泛分布。过表达IFITM2蛋白后,荧光蛋白分析表明,该蛋白对病毒感染具有一定的抑制作用。结论:成功构建了含有ifitm2基因的重组真核表达质粒,该质粒可以在真核细胞中得到有效表达,且对VSV-G假膜病毒具有一定抑制作用,该研究为进一步探讨IFITM2蛋白的抗病毒作用及其分子机制提供了实验及理论基础。
- 李沂李昌杜寿文王茂鹏朱羿龙刘存霞秦艳青金宁一
- 关键词：克隆表达抗病毒作用
- 贝母素乙在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎药物中的应用
- 贝母素乙在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，涉及医药领域。本发明通过实验证实贝母素乙并未对实验小鼠造成显著性影响：贝母素乙组实验小鼠无死亡，体重无显著性变化，肠组织无明显病变，结肠和盲肠无明显病理性症状，贝母素...
- 朱羿龙韩继成房金波李一权白冰
- 文献传递
- 表达IFITM3的重组腺病毒、其构建方法及应用
- 本发明提供一种表达IFITM3的重组腺病毒，所述重组腺病毒携带人IFITM3基因，通过将携带人IFITM3基因的重组穿梭质粒与病毒骨架质粒共转染哺乳动物细胞得到。本发明还提供所述重组腺病毒的构建方法及应用。基于本发明的表...
- 金宁一李昌杜寿文姜颖越田明尧李霄鲁会军邢彬朱羿龙赵飞曹婷婷
- 文献传递
- 表达HIV-1 gag重组鸡痘病毒的构建与筛选被引量：3
- 2014年
- 构建并筛选表达HIV-1 gag蛋白的重组鸡痘病毒,并对其进行鉴定。首先设计引物通过PCR技术扩增HIV-1 gag基因,将其连接到pMD18-T载体上,测序正确后将其克隆入本实验室自行构建的鸡痘病毒穿梭载体pTKET中,获得重组质粒pTKET-HIV gag。然后将其与鸡痘病毒FPV282E4株共转染原代鸡胚成纤维细胞(CEF)进行同源重组,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,通过噬斑筛选获得重组病毒,应用PCR,RT-PCR,Western blot方法对重组病毒进行鉴定和遗传稳定性分析。结果:通过10次噬斑筛选,PCR检测表明目的基因已整合到重组鸡痘病毒基因组中,RT-PCR,Western blot结果表明HIV-1 gag在感染细胞内成功表达且具有抗原性。连续传代20次,PCR,RT-PCR,Western blot均能检测到外源基因的整合、转录和表达,且未能扩增出FPV-TK基因,表明重组病毒遗传稳定性良好,而且病毒已经纯化。结论:成功获得表达HIV-1gag的重组鸡痘病毒,为进一步免疫试验研究奠定基础。
- 朱羿龙李昌郭焱刘存霞杜寿文王茂鹏金宁一
- 关键词：重组鸡痘病毒HIV-1GAG
- 重组痘苗病毒rVTT-JEVE理化特性研究被引量：3
- 2014年
- 目的痘苗病毒作为疫苗载体具有接种途径简单、高滴度、低成本等优点,重组痘苗病毒投入使用之前进行理化特性试验,对重组痘苗病毒的生产、运输和保存有一定重要意义。方法将重组痘苗病毒rVTT-JEVE作热、酸、碱、乙醚、氯仿、胰蛋白酶、超声波以及紫外线处理,然后接种到BHK-21细胞上,观察rVTT-JEVE毒价的变化,分析理化因素对rVTT-JEVE的影响。结果在pH3～9范围内,酸碱度变化不会引起rVTT-JEVE毒价的显著变化。rVTT-JEVE经50℃处理60min、30min和60℃处理15min可被灭活；对5%的氯仿敏感；经终浓度0.5%的胰蛋白酶37℃作用1h,病毒毒价降低2个滴度；对25%的乙醚不敏感；经40KHz超声波处理60min和80KHz处理30min即可灭活；30W紫外灯垂直距离10cm照射15min、30cm照射30min即可灭活。结论 rVTT-JEVE耐热、酸、碱、乙醚、氯仿及胰蛋白酶,对超声波、紫外线较敏感。
- 肖朋朋刘昊阎富龙陈智飞朱羿龙辛舒王茂鹏靖杰鲁会军金宁一
- IFITM1/2/3敲低细胞株的构建与筛选
- 目的 干扰素诱导的跨膜蛋白1/2/3 (interferon induced transmembrane proteins,IFITM1/2/3)是2009年Cell首次报道的具有抗病毒活性的蛋白,目前已发现其对9个科的...
- 李昌杜寿文王茂鹏谭鹏刘存霞朱羿龙金宁一
