李丽文
- 作品数：6 被引量：52H指数：4
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转OsCDPK7基因水稻的培育与耐盐性分析被引量：14
- 2008年
- 以4℃处理的水稻品种辽盐241植株叶片总RNA为模板,用基因特异引物通过RT-PCR扩增出1700bp的OsCDPK7基因。该基因序列比已报道的基因序列(GenBank登录号:AB042550)缺失了26个氨基酸,而丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性中心和钙结合结构域完整,具备钙依赖的蛋白激酶活性。构建了由组成型启动子E12调控的OsCDPK7基因植物表达载体,利用农杆菌介导法转化水稻,经Km筛选及Southern杂交验证,获得10株转基因植株。耐盐性分析表明:OsCDPK7基因的组成型表达提高了T2代转基因植株的耐盐性,部分转基因水稻在0.2mol/LNaCl培养基中能够萌发;幼苗期水稻经0.4mol/LNaCl浇灌10d,去除胁迫后能恢复正常生长;而对照在以上情况下均不能萌发和恢复。结果表明,利用植物信号转导过程中的调控因子能够提高转基因作物的耐盐性。然而,在不同耐性的转基因植株中,OsCDPK7基因的表达有一定的差异。
- 王镭才华柏锡李丽文李勇朱延明
- 关键词：转基因水稻耐盐性
- OsMAPK7基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建被引量：1
- 2005年
- 以低温处理的耐盐水稻辽盐241植株叶片总RNA为模板,用OsCDPK7基因特异引物通过RT-PCR扩增出1 700 bp的片段,并将该片段克隆至pUC18上。序列分析结果表明,该序列与GenBank上的OsCDPK7基因序列相比,缺失了CDS序列中157￣234处的78个核苷酸,其编码的蛋白序列缺失了53￣78的26个氨基酸。但是缺失部分位于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性中心和钙结合基序等结构域之外,因此预计该基因产物应具备钙依赖的蛋白激酶活性。进一步将OsCDPK7基因分别克隆至植物表达载体卡盒pBE12和pB29A上,构建了分别由E12启动子、rd29A启动子调控的OsCDPK7基因植物表达载体pBC7E12和pBC729A。通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为农杆菌介导法转化植物,分析OsCDPK7基因的功能奠定了基础。
- 李杰齐岩朱延明李丽文柏锡
- 关键词：基因克隆植物表达载体
- RNAi技术在植物功能基因组学中的研究进展被引量：29
- 2007年
- 文章主要综述了RNA干涉(RNAi)技术在植物功能基因组学中的研究策略及研究现状,包括RNA干涉的作用机制及技术特征,引发植物RNAi机制的转基因RNAi技术以及病毒介导的基因沉默技术。转基因RNAi技术方面,包括载体结构的优化策略、高通量载体的构建方法以及该技术的优缺点。病毒介导的基因沉默技术方面包括病毒载体及宿主种类,病毒感染方法,试验对照的建立、环境因素的影响以及该技术的优缺点。
- 李丽文朱延明李杰柏锡才华
- 关键词：RNAI
- 植物功能基因组学研究进展被引量：5
- 2008年
- 对植物功能基因组学的研究方法进行了论述,包括微阵列或DNA芯片、EST技术、SAGE技术、蛋白质组学技术、反向遗传技术及生物信息学技术等,对植物功能基因组学研究中可能遇到的问题进行了分析。
- 常敬礼郭玉双杨德光李丽文
- 关键词：植物功能基因组学DNA芯片反向遗传学生物信息学
- 转OsMAPK4基因水稻耐盐性分析被引量：6
- 2009年
- 构建了由组成型启动子E12启动子调控的OsMAPK4基因植物表达载体pCME12,利用农杆菌介导法转化黑龙江省主栽品种五优稻1号水稻愈伤组织,Southern杂交检测表明,OsMAPK4基因整合到水稻基因组上,获得了转基因水稻植株。对转基因水稻在种子发芽期和苗期进行了耐盐性分析,结果表明,转基因水稻种子在含0.2mol·L-1NaCl的培养基上能正常萌发;转基因水稻幼苗在0.4mol·L-1NaCl处理时茎部仍然为绿色,种子萌发与幼苗生长情况略优于非转基因植株栽至无盐土壤中,植株能萌发出新叶片。
- 柏锡朱延明李丽文潘欣翟红纪巍李勇才华
- 关键词：水稻耐盐性转基因
