李咏生
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂氧素A4对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用被引量：11
- 2009年
- 目的探讨脂氧素A4（LXA4）对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制。方法体外培养HUVEC，培养后的细胞分别以单纯M199培养基培养（对照组）、氯化钻（CoCl2）诱导细胞缺氧（缺氧组）、不同浓度LXA4（1、10、100nmol/L）加入缺氧组细胞培养液中（药物干预组）；倒置相差显微镜下观察各组HUVEC的形态学变化；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度LXA4培养24h和100nmol/L的LXA4作用不同时间（4、8、12、24h）后缺氧HUVEC存活率；免疫细胞化学法检测细胞胞质内第Ⅷ因子相关抗原抗体（vWF）水平变化（以灰度值表示），细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性；激光共聚焦显微镜观察细胞质内游离Ca^2＋荧光强度变化。结果（1）细胞形态：缺氧组HUVEC明显失去原有正常细胞形态，细胞变圆，核固缩；药物干预组正常细胞数量增多，加入100nmol/L浓度的LXA4后，大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似。（2）细胞存活率：缺氧组细胞存活率为（40．1±3．9）％，药物干预组细胞培养液中加入1、10、100nmoVL浓度的LXA4后，细胞存活率分别为（52．9±1．4）％、（64．1±3．3）％、（76．6±1．6）％，分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。药物干预组细胞培养液中LXA。浓度为100nmo／／L时，作用4、8、12、24h，细胞存活率分别为（68．2±2．3）％、（82．5±1．4）％、（82．9±1．4）％和（72．2±8．5）％，且在12h时达峰值；药物干预组各时间点细胞存活率分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）vWF水平：随着药物干预组细胞培养液中LXA。浓度的增加，其胞质内vwF水平逐步降低，LXA4浓度为1、10、100nmol／L时，vWF水平分别为203．9±0．7、204．6±0．9、191．8±0．5，分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4�
- 刘松君李咏生周晓燕蔡蕾刘小利黄艳君叶笃筠黄引平
- 关键词：妊娠性脐静脉内皮细胞缺氧脂氧素类
- 脂氧素对巨噬细胞表面免疫抑制分子和共刺激分子表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究脂氧素A4(LXA4)对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,分为空白对照组、脂多糖(LPS)组和LXA4组。各组处理预设时间后,RT-PCR检测PIR-A和PIR-B基因表达水平,总一氧化氮检测试剂盒检测一氧化氮含量,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ分子、CD80(B7-1)、CD86(B7-2)的表达量。结果LXA4显著上调PIR-B,而几乎不影响PIR-A的基因表达水平;明显促进一氧化氮分泌(P<0.01);抑制LPS活化巨噬细胞表达MHC-Ⅱ和CD86(P<0.05),但对CD80的表达无明显影响(P>0.05)。结论LXA4促进巨噬细胞表达免疫抑制分子PIR-B和一氧化氮,抑制巨噬细胞的抗原提呈能力。
- 周晓燕张力吴萍熊维李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素一氧化氮共刺激分子
- 脂氧素A_4通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道电流而抑制其激活和增殖被引量：3
- 2007年
- 目的通过研究脂氧素A4（LXA4）对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化、钙池操纵的钙通道电流（Isoc）及细胞激活和增殖的影响，初步探讨其对T细胞的调节作用及机制。方法钙离子荧光探针Fluo-3／AM负载细胞后，用激光共聚焦扫描显微镜技术动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化；全细胞膜片钳技术记录Isoc；ELISA测IL-2水平；3^H-TdR掺入法测细胞增殖情况，并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果（1）用含钙细胞外液时，LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度，而用无钙细胞外液时则无显著差异；（2）LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵的钙通道（SOC）激活剂thapsigargin（TG）引起Jurkat T细胞内游离钙浓度的增高，100nmol／L LXA4也能抑制anti-CD3或植物血凝素（PHA）引起的细胞内钙离子浓度的增高，SOC阻滞剂2-aminoethoxydiphenylborate（2-APB）能显著抑制TG引起的钙内流；（3）膜片钳结果显示，LXA4抑制正常Jurkat T细胞Isoc，TG能显著增大Isoc，而LXA4呈剂量依赖性抑制TG引起的Isoc的升高；（4）LXA4剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28诱导的Jurkat T细胞IL-2表达及细胞增殖，细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由GI1期进入S期，降低S期细胞比例。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞Isoc引起的胞质内游离钙离子浓度的升高而抑制其激活和增殖。
- 熊维李天张临洪张力吴萍周晓燕李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素A4JURKATT细胞膜片钳
- 脂氧素对粒细胞集落刺激因子表达的影响及其机制初探
- 2007年
- 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7，实验分为空白组、脂多糖（LPS）组（1mg／L LPS）及脂氧素A4（LXA4）处理组（1mg／L LPS与0．1～1000nmol／L LXA4共同温育）。处理预设时间后，实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附实验分别检测粒细胞集落刺激因子（G—CSF）基因表达和蛋白质分泌水平，免疫印迹法检测IχBα。降解和NF—χB转位情况，荧光素酶报告质粒检测NF-χB转录活性。结果表明：LPS诱导G—CSF表达（P〈0．01），LXA4抑制G-CSF基因表达和蛋白质分泌，其中10nmol／LLXA4作用最明显（抑制率为39．8％）（P〈0．01）；10nmot／L LxA4明显抑制IχB。降解（P〈0．05）、NF-χB转位（P〈0．05）以及LNF-χB的转录活性（P〈0．05）。这提示LXA4可能通过抑制NF-χB的转位和转录活性而抑制LPS诱导RAW264．7巨噬细胞分泌G—CSF。
- 周晓燕张力吴萍熊维李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素粒细胞集落刺激因子脂多糖巨噬细胞
- 脂氧素A_4对Jurkat T细胞游离钙浓度变化及增殖的影响
- 2006年
- 目的研究脂氧素A4(LXA4)对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化及细胞增殖的影响。方法钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,用激光共聚焦扫描显微镜动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化;CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果①采用含钙细胞外液时,LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度,而用无钙细胞外液时,细胞内游离钙离子浓度下降不明显;②LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵钙通道(SOC)激活剂thapsigargin(TG)引起的Jurkat T细胞内游离钙离子浓度的增高,100 nmol/L LXA4也能抑制抗CD3单抗(a-CD3)引起的细胞内钙离子浓度的增高,SOC阻滞剂2-Aminoethoxydiphenylborate(2-APB)能显著抑制TG引起的钙内流;③LXA4呈剂量依赖性抑制a-CD3和抗CD28单抗(a-CD28)诱导的Jurkat T细胞增殖,细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由G1期进入S期,降低S期细胞比例、细胞增殖指数(P I)和DNA含量。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道引起的胞质内游离钙浓度的升高而抑制其增殖。
- 熊维吴萍张力周晓燕李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素A4JURKATT细胞细胞增殖
- 脂氧素对Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2／白细胞介素-2受体表达的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:研究脂氧素对JurkatT细胞增殖和白细胞介素-2表达的影响。方法:体外培养JurkatT细胞,anti-CD3(2mg/L)和anti-CD28(2mg/L)单抗刺激Jurkat细胞活化,加入不同浓度脂氧素(0.1nmol/L-100nmol/L)共同孵育24h后,加入[3H]-TdR继续孵育6h,液闪仪测放射性活度;或收集培养上清,ELISA测IL-2水平,收集细胞,流式细胞仪检测细胞表面IL-2受体α亚单位CD25表达,PI染色后经流式细胞仪进行细胞周期分析。结果:脂氧素剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28活化的Jurkat T细胞增殖(P<0.05);细胞周期分析发现脂氧素处理组S期细胞比例减少;脂氧素显著降低培养上清中IL-2含量(P<0.05)但对CD25表达无明显影响(P>0.05)。结论:脂氧素能抑制活化Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2表达;脂氧素可通过影响T淋巴细胞的活化增殖进而发挥免疫负性调节作用。
- 张力吴萍万敬员周晓燕熊维袁萍李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素白细胞介素2
- 槲皮素对离体乳头肌收缩功能的影响被引量：2
- 2008年
- 李继刘如黄浩李咏生张力吴萍周晓燕熊维张小玲叶笃筠
- 关键词：槲皮素异丙肾上腺素一氧化氮普萘洛尔
- 钙池操纵的钙通道的调控机制被引量：3
- 2007年
- 钙池操纵的钙通道(store-operated calciumchannel,SOC)系存在于细胞膜表面的一种新发现的钙通道,它是非兴奋性细胞Ca2+内流的主要通道。SOC的开启是由钙库耗竭所激发,然而,钙库耗竭如何开启SOC仍不十分清楚。文章综述了SOC开启调控机制的有关研究进展。
- 李咏生喻研叶笃筠
- 关键词：钙通道
