李小康
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 幽门螺旋杆菌尿素酶A亚基抗原表位肽与霍乱毒素B亚基融合蛋白的生物信息学设计及表达优化研究(英文)
- 2013年
- 幽门螺旋杆菌(Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌的重要致病因子。研发基于Hp尿素酶的表位疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。本研究主要通过生物信息学软件对Hp尿素酶表位肽U21和霍乱毒素B亚基(CTB)的连接顺序和间隔序列加以分析,设计出一种由U21和CTB构成的Hp表位疫苗CTB-UA。通过基因克隆技术构建含有融合基因CTB-UA的重组表达载体pETCUA及其重组菌株;重组菌株经经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAESepharoseFF阴离子交换层析纯化融合蛋白CTB-UA,获得高纯度(94.8%)的融合蛋白CTB-UA。并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,鉴定Hp表位疫苗CTB-UA的免疫学活性,经间接ELISA鉴定小鼠能够产生针对CTB和表位肽U21的高滴度特异性抗体。结果证明,Hp表位疫苗CTB-UA具有科学合理的结构,能在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,且具有较高的免疫学特异性,为研发防治Hp感染的表位疫苗奠定一定的实验基础。
- 郭乐刘昆梅李小康汤锋奚涛
- 关键词：幽门螺旋杆菌尿素酶表位
- 一种新型幽门螺旋杆菌多表位疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种幽门螺旋杆菌多表位疫苗，其活性成分是一条多肽，主要由幽门螺旋杆菌尿素酶A、B双亚基的Th和B细胞抗原表位的多拷贝体以及黏膜免疫佐剂霍乱毒素B亚基构成。本发明主要通过基因合成技术合成一个人工基因，其包含有尿素...
- 奚涛郭乐邢莹莹何赟绵李小康
- 文献传递
- 一种新型幽门螺旋杆菌多表位疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种幽门螺旋杆菌多表位疫苗，其活性成分是一条多肽，主要由幽门螺旋杆菌尿素酶A、B双亚基的Th和B细胞抗原表位的多拷贝体以及黏膜免疫佐剂霍乱毒素B亚基构成。本发明主要通过基因合成技术合成一个人工基因，其包含有尿素...
- 奚涛郭乐邢莹莹何赟绵李小康
- rCtUBE的生物信息学分析及其表达优化(英文)
- 2013年
- 目的:幽门螺旋杆菌(Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌的重要致病因子。研发基于Hp尿素酶的表位疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。方法:通过生物信息学软件对位于Hp尿素酶酶活性中心的表位肽F8和霍乱毒素B亚基(CTB)的连接顺序和间隔序列加以分析,设计出一种Hp表位疫苗rCtUBE。通过基因克隆技术构建含有融合基因rCtUBE的重组表达载体pETCUB及其重组菌株;重组菌株经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAE Sepharose FF阴离子交换层析纯化融合蛋白rCtUBE,并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,鉴定Hp表位疫苗rCtUBE的免疫学活性。结果:经生物信息学软件分析,Hp表位疫苗rCtUBE具有科学合理的结构,并成功构建了重组表达载体pETCUB及其重组菌株BL21(DE3)/pETCUB,经蛋白表达优化及纯化,可获得高纯度(95.3%)的融合蛋白rCtUBE。融合蛋白rCtUBE以氢氧化铝为佐剂注射免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA鉴定:小鼠能够产生针对CTB和表位肽F8的高滴度特异性抗体。结论:Hp表位疫苗rCtUBE具有科学合理的结构,能在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,且具有较高的免疫学特异性,因此为研发防治Hp感染的表位疫苗奠定了一定的实验基础。
- 郭乐刘昆梅秦玉红李小康段相国杨华徐广贤奚涛
- 关键词：幽门螺旋杆菌尿素酶表位疫苗
