李鹏成
- 作品数：35 被引量：54H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 重组猪肺表面活性蛋白A在昆虫杆状病毒表达系统的表达及体外抗PRRSV活性初步鉴定
- 2017年
- 为研究重组猪肺表面活性蛋白A(RpSP-A)的抗病毒活性,采用Bac-to-Bac系统对RpSP-A蛋白进行表达。首先PCR扩增目的基因并将其克隆至pFastBac1转移载体获得pFast-SP-A,通过转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rBV-SP-A,在sf9细胞上进行目的蛋白的表达,经镍柱纯化、脱盐柱处理后,采用蚀斑减少方法评价RpSP-A对PRRSV感染Marc-145细胞的抑制作用。结果显示RpSP-A在sf9细胞中得到正确表达,并且能够降低PRRSV在Marc-145细胞上的感染,补加Ca^(2+)时30μg/mL RpSP-A抑制率高达77%,15μg/mL RpSP-A抑制率为43%,未补加Ca^(2+)时RpSP-A没有表现出抑制作用。上述结果表明利用Bac-to-Bac系统可以稳定获得大量具有抗PRRSV作用的可溶性RpSP-A。
- 李兰郑其升张元鹏李鹏成肖希龙付言峰侯继波
- 关键词：表面活性蛋白A杆状病毒表达猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性
- 含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白结合活性比较被引量：6
- 2015年
- 【目的】比较两种含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)的结合活性。【方法】首先应用PCR技术分别扩增得到含有2个或3个自溶素基序(Lysin Motif,Lys M)基因片段的PA2与PA3;然后应用p ET-32a(+)质粒构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;最后将经复性后的PA2、PA3融合蛋白与GEM(Gram-positive Enhancer Matrix,GEM)颗粒结合,经Western blot、透射电镜与SDS-PAGE进行结合鉴定与结合活性比较分析。【结果】融合蛋白PA2、PA3复性后都能与GEM结合,PA3与GEM颗粒的结合活性明显好于PA2。【结论】含有3个Lys Ms的PA对GEM的结合活性明显优于含有2个Lys Ms的PA。本研究可为进一步完善乳球菌外壳-蛋白锚钩展示系统提供理论基础。
- 乔绪稳李鹏成郑其升陈瑾于晓明侯立婷吴楠侯继波
- 关键词：乳酸乳球菌GEM结合活性
- 猪圆环病毒2型灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供猪圆环病毒2型灭活疫苗及其制备方法，涉及生物制药领域。该疫苗含有0.01‑2mg/mL左旋咪唑、0.05～20 mg/mL紫苏提取物、0.03‑20mg/mL杨树花提取物。本发明还提供所述疫苗的制备方法，将左旋...
- 于晓明郑其升陈瑾侯立婷李鹏成乔绪稳程海卫侯继波
- 高保真猪繁殖与呼吸综合症病毒弱毒株及其应用
- 本发明提供高保真猪繁殖与呼吸综合症病毒弱毒株及其应用，属于生物技术领域。该弱毒株是猪繁殖与呼吸综合症病毒PRRSV‑NJRb株，其微生物保藏号是：CGMCC No.13800。本发明还提供所述弱毒株病毒液的制备方法，包括...
- 李鹏成侯继波郑其升张晓燕陈瑾于小明乔绪稳张元鹏
- 文献传递
- 山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的组织结构观察
- (目的)研究山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的显微和亚显微组织结构。(方法)选取健康10月龄奶山羊10头,断头宰杀后取咽扁桃体和咽鼓管扁桃体,应用组织学光镜和电镜制片技术进行研究。(结果)结果表明:山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的...
- 李正平李鹏成杨倩
- 关键词：山羊扁桃体淋巴细胞鼻腔免疫
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌拮抗病原菌粘附和入侵Caco-2细胞的研究
- 叶小兰李鹏成杨倩
- 关键词：病原菌
- 枯草芽孢杆菌拮抗病原菌对细胞微丝的影响被引量：1
- 2011年
- 本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌拮抗2种病原菌(鼠伤寒沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌)对人结肠癌细胞Caco-2细胞中微丝的影响。将枯草芽孢杆菌及上述2种病原菌加到Caco-2细胞上,用异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽标记细胞微丝,在倒置荧光显微镜下观察细胞微丝的变化;利用Western blotting检测细胞微丝调节蛋白Rac1蛋白的表达变化。结果显示正常Caco-2细胞内微丝呈散在的平行排列;加鼠伤寒沙门氏菌后微丝呈小区域聚集;加产肠毒素大肠杆菌后细胞微丝重排聚集在细胞中央放射状分布或分布紊乱;单独加枯草芽孢杆菌后细胞微丝排列方式变化不大;同时分别加2种病原菌和枯草芽孢杆菌后,大部分的细胞内微丝排列整齐,只是在少部分细胞内存在微丝的聚集。产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌可使细胞微丝调节蛋白Rac1的表达显著上调,而枯草芽孢杆菌则可抑制病原菌对Rac1的影响。本试验证明产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌可影响细胞微丝的表达和分布;而枯草芽孢杆菌及其培养上清液可抑制病原菌的这种破坏作用。
- 叶小兰李鹏成杨倩
- 关键词：病原菌枯草芽孢杆菌CACO-2细胞微丝
- 一种猪圆环病毒2型抗原纯化浓缩方法
- 本发明提供一种猪圆环病毒2型抗原纯化浓缩方法，涉及生物医学技术领域。一种猪圆环病毒2型抗原纯化浓缩方法，包括以下步骤：（1）将氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的接头蛋白加入猪圆环病毒2型抗原中，混匀，孵育；（2）加...
- 乔绪稳于晓明郑其升李鹏成陈瑾侯立婷张元鹏侯继波
- 山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的组织结构观察被引量：4
- 2012年
- 选取健康10月龄奶山羊10头,断头宰杀后取咽扁桃体和咽鼓管扁桃体,应用组织学光镜和电镜制片技术研究咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的显微和亚显微组织结构。结果表明:山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的黏膜上皮主要由2～3层多边形上皮细胞组成,部分区域只有单层扁平细胞,相邻上皮细胞间空隙很大,上皮细胞表面有丰富的微绒毛。上皮细胞之间和黏膜上皮下方固有层内有大量淋巴细胞浸润。扁桃体的实质部分由数个次级淋巴小结和弥散淋巴组织构成,弥散淋巴组织中有大量分布的淋巴管和毛细血管后微静脉。此外,在紧贴黏膜上皮细胞下方的固有层和淋巴滤泡中可观察到少量的树突状细胞。结果提示山羊的咽扁桃体和咽鼓管扁桃体可作为鼻腔免疫的主要诱导位点和效应部位。
- 李正平李鹏成杨倩
- 关键词：山羊扁桃体淋巴细胞鼻腔免疫
- 乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的拮抗作用被引量：8
- 2010年
- 【目的】对嗜酸乳杆菌的S-层蛋白（S-layer protein）进行提纯,研究嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附和入侵的拮抗作用。【方法】应用阴离子交换柱（DE52）对嗜酸乳酸杆菌的S-层蛋白进行提纯,然后分别研究了嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的作用。【结果】S-层蛋白能显著地抑制鼠伤寒沙门氏菌的黏附及入侵;在竞争、排斥、置换3种黏附试验中,S-层蛋白可显著降低鼠伤寒沙门氏菌的黏附,其相对黏附力分别为1.17%±5.97%、8.71%±1.36%、10.56%±0.92%,差异极显著（p〈0.01）,其中竞争试验效果最好;并且S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附抑制作用极显著高于嗜酸乳酸杆菌（p〈0.01）;此外,S-层蛋白也能显著抑制鼠伤寒沙门氏菌入侵。【结论】乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌可产生显著的拮抗作用,这可能与S-层蛋白和鼠伤寒沙门氏菌的宿主黏附受体存在竞争作用有关;提示乳酸杆菌S-层蛋白可用于预防和治疗鼠伤寒沙门氏菌感染,并有望成为抗生素的替代品。
- 李鹏成叶小兰王志胜庾庆华杨倩
- 关键词：S-层蛋白鼠伤寒沙门氏菌CACO-2细胞
