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一种人活性颗粒酶K重组蛋白的制备方法: 本发明涉及一种人活性颗粒酶K重组蛋白（rhGzmK）的制备方法，该重组蛋白去除了人颗粒酶K（hGzmK）N端的24个氨基酸，并在C端增加了6个组氨酸，以方便用镍离子柱进行纯化。其流程是：抽提人NK92细胞的总RNA，利用...; 江文正龙凤英杜佳妮陈冉孔晓波史亚茹; 文献传递

LIGHT表达质粒增强HIV-1 Nef核酸疫苗免疫原性的研究: 研究背景:核酸疫苗的免疫效果在不同动物个体中差异较大,某些肿瘤及病毒的T、B细胞表位抗原性弱,难以诱导有效的T、B细胞免疫应答,提高核酸疫苗的免疫效果已成为研究热点。基因佐剂是将编码某些细胞因子及T、B细胞表面共刺激分子...; 闻洁君郝文丽樊燕杜佳妮龙凤英江文正; 关键词：HIV-1 NEF 核酸疫苗 LIGHT 免疫佐剂; 文献传递

一种人LIGHT-Fc融合蛋白的制备方法: 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统制备人LIGHT-Fc融合蛋白的方法，步骤包括(1)构建重组表达质粒pPIC9K-LIGHT-Fc；(2)表达人LIGHT-Fc融合蛋白酵母工程菌的制备及筛选；(3)人LIGHT-Fc...; 江文正郝文丽闻洁君樊燕杜佳妮; 文献传递

HIV-1 nef基因的克隆及原核表达研究被引量：2: 2010年; 目的:构建HIV-1 Nef基因的原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达,初步优化其表达条件。方法:利用特异性引物PCR扩增获得HIV-1 Nef基因片段,PCR产物经限制性内切酶双酶切后连接载体pET24a(+),构建重组质粒pET24a(+)-Nef。经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coliBL21,IPTG诱导表达目的蛋白,优化表达条件,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达产物。结果:PCR扩增获得618bpDNA片段,酶切鉴定结果表明HIV Nef基因已克隆入原核表达载体pET24a(+)中,测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组菌诱导后可表达相对分子质量(Mr)符合预期的融合蛋白。0.1mmol/LIPTG在37℃诱导6h为最佳表达条件,重组蛋白表达量可由15.8%增加到43.9%。结论:在大肠杆菌中成功地表达了HIV Nef蛋白,并初步获得了最优化的表达条件。; 闻洁君江文正郝文丽杜佳妮樊燕钱旻; 关键词：NEF蛋白原核表达

太极拳运动干预健康促进研究回顾与展望——基于CNKI数据库与CiteSpace的可视化分析: 研究目的:太极拳发源于中华文化的历史长河之中,因其独具养生、技击、教育、艺术、文化等多元价值,而成为中华民族传统体育的优秀代表。2020年12月17日,我国申报的"太极拳"列入了联合国教科文组织人类非物质文化遗产代表作名...; 谢雨钊杜佳妮; 关键词：太极拳运动运动干预 CITESPACE 可视化分析

武术与民族传统体育专业本科生专业认同的调查研究——以上海体育学院为例: 研究目的:武术与民族传统体育专业的本科毕业生作为武术教育教学和研究事业的重要后备力量,其专业认同水平同民传专业人才质量和民传学科未来发展有着密切的关联。上海体育学院武术学院民传专业在全国民传专业中,一直处于领先地位,近年...; 杜佳妮; 关键词：本科生

HIV-1 Vif基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达及其核酸疫苗的研究: 自从1981年第一例AIDS患者发现以来,人类一直没有找到能够治愈或预防HIV感染的方法。从AIDS治疗药物到各类治疗或预防性疫苗(灭活病毒,亚单位疫苗,核酸疫苗,初免-加强策略),只有核酸疫苗初免-加强策略给研究者的希...; 杜佳妮; 关键词：HIV-1 VIF 原核表达毕赤酵母核酸疫苗 LIGHT; 文献传递

人颗粒酶A全长基因的克隆及原核表达被引量：1: 2012年; 目的克隆人颗粒酶A(Granzyme A,GzmA)基因,在大肠杆菌中进行表达,并初步优化表达条件。方法通过RT-PCR扩增人GzmA基因,插入原核表达载体pET24a(+)中,构建重组表达质粒pET24a-GzmA,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并对诱导温度、IPTG浓度、诱导时间和开始诱导时菌液A600值进行优化。结果重组表达质粒pET24a-GzmA经双酶切和测序,证实GzmA基因已正确插入载体中,且序列正确;表达的重组蛋白相对分子质量约29 000,且可与小鼠抗His单抗特异性结合;工程菌的最佳诱导温度为37℃,IPTG浓度、诱导时间和开始诱导时菌液A600值对重组蛋白的表达量影响较小。结论成功克隆了人GzmA基因,并在大肠杆菌中进行了表达。; 杜佳妮陈磊龙凤英江文正; 关键词：克隆分子原核细胞

HIV-1辅助蛋白Vif-Fc融合蛋白的表达方法: 本发明涉及分子生物学和基因工程领域，公开了一种HIV-1辅助蛋白Vif-Fc融合蛋白的表达方法，依次包括以下步骤：（1）重组表达载体pPIC9K-Vif-Fc的构建；（2）表达Vif-Fc融合蛋白的重组毕赤酵母的转化和筛...; 江文正杜佳妮龙凤英; 文献传递

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杜佳妮