杨勇琴
- 作品数：33 被引量：127H指数：7
- 供职机构：大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 成人骨髓间充质干细胞体外培养方法的建立及生长特性分析被引量：3
- 2006年
- 目的建立成人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MMSCs)体外分离培养和扩增方法,观察MMSCs在体外培养的生物学特性,为MMSCs的临床应用奠定技术基础。方法采集成人骨髓,密度梯度法分离单个核细胞,利用DMEM/F12培养基添加自体血清进行黏附培养和扩增MMSCs,光镜观察MMSCs生长和形态变化,计数和MTT法观察原代和传代培养的增殖及生长特征,免疫组化法分析MMSCs纯度。结果MMSCs贴壁生长,呈典型MMSCs形态和生长特征,原代及传代5代内的MMSCs均有活跃的增殖能力,其中CD105阳性细胞>98%。结论密度梯度离心结合贴壁培养法可获得高纯度和高增殖活性的MMSCs,成人MMSCs至少在传代培养5代内生长旺盛并维持其生物特性,可满足临床治疗和人体生物组织研究要求。
- 庞荣清周平尹波李雪梅张永云杨勇琴曲璐潘兴华
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外培养
- PBL教学法在组织学与胚胎学教学应用中的初步评价被引量：7
- 2010年
- 目的调查学生在组织学与胚胎学教学中对PBL教学方法的评价。方法对我校07级护理本科及08级临床本科的组织学与胚胎学部分章节实施PBL教学,并进行问卷调查。结果认为PBL教学方法明显提高了学生对基础知识的综合应用能力的占89.7%,激发学习兴趣和主动性的占95.8%,95%的同学认为PBL教学方法能培养解决临床问题的思维能力。结论在基础医学教学中适当采用PBL教学法能够提高学生的自学能力和获取信息的能力。
- 杨开明杨勇琴王慧杰
- 关键词：PBL教学法问卷调查
- 骨髓干细胞动员对创伤失血犬免疫功能的调节作用被引量：1
- 2010年
- 目的观察创伤失血犬自体骨髓干细胞动员后外周血干细胞、免疫细胞亚群和细胞因子含量动态变化,为干细胞治疗战创伤提供依据。方法健康比格犬10只,采用手术方法切除左侧肾后,经肾动脉放血至血压60mmHg并维持30min。实验组(n=5)皮下注射GM-CSF5μg/kg,隔日1次,连续3次,对照组(n=5)同步注射等量生理盐水,分别于0、2、4、6、8、10d采集外周血,计数白细胞总数、淋巴细胞和中性粒细胞比例,测定CD3+、CD4+、CD8+、CD56+、CD34+、CD133+细胞比例和血清TNF-α、IL-1、IL-2含量。结果与0d比较,实验和对照犬在创伤失血后白细胞总数、中性粒细胞比例均逐渐升高,第4～6d达到高峰(P<0.05),然后逐渐下降,但实验组高于对照组(P<0.05);两组淋巴细胞的比例均下降(P<0.05),但实验组高于对照组(P<0.05);CD3+、CD4+、CD8+、CD56+细胞的比例下降(P<0.05),到第4～6d达到最低(P<0.05),随后逐渐升高,至第10d时接近正常,其中实验组高于对照组(P<0.05);两组CD34+、CD133+细胞比例均逐渐升高,至第2～4d达到高峰(P<0.05),随后逐渐下降,但实验组在整个实验过程中均高于对照组(P<0.05);实验组血浆TNF-α、IL-1、IL-2的含量均逐渐升高,至第6d达到高峰(P<0.05),随后下降至第10d时接近正常。结论骨髓干细胞动员可提高创伤失血犬外周血免疫亚群细胞比例和细胞因子含量,提示具有保护创伤失血犬免疫功能的作用,但也有促进炎症反应的作用。
- 潘兴华陈克久行治国杨勇琴屈璐赵熠庞荣清蔡学敏
- 关键词：创伤失血干细胞动员免疫功能
- 人MTERF4基因cDNA的克隆及编码蛋白质的生物信息学分析被引量：5
- 2015年
- [目的]克隆人线粒体转录终止因子4（mitochondrial transcription termination factor 4,MTERF4）基因cDNA编码区,预测和分析其编码蛋白质的结构与功能。[方法]采用RT-PCR技术扩增人MTERF4基因cDNA的编码序列,采用生物信息学方法对人MTERF4蛋白进行分析。[结果]人MTERF4基因cDNA编码序列为1 146bp,编码一个由381氨基酸组成的亲水性蛋白质,分子量为45.78 k D,理论等电点为9.49。该蛋白N端1-42个氨基酸为前导肽序列,定位于细胞线粒体。其二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,包含4个MTERF基序。三级结构预测结果与二级结构相符。蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,人MTERF4蛋白与大鼠、小鼠的MTERF4蛋白具有高度同源性,在系统发育树上聚为一类。[结论]人MTERF4基因cDNA的克隆及编码蛋白质的生物信息学分析为进一步研究其生物学功能奠定了理论依据。
- 熊伟杨勇琴张海洋徐彤张晓娟余敏
- 关键词：CDNA克隆生物信息学
- 胚胎小肠杯状细胞偶氮卡红染色
- 2008年
- 杨开明杨勇琴
- 关键词：杯状细胞偶氮小肠胚胎细胞形态
- 经肾动脉自体骨髓干细胞移植治疗急性肾小管坏死的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的:采用经肾动脉灌注移植兔自体骨髓干细胞,观察自体骨髓干细胞移植对缺血再灌注(I/R)后急性肾小管坏死肾功能的作用及其机制。方法:28只日本大耳白兔采集骨髓,分离自体骨髓干细胞,5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记。全部实验兔建立肾脏I/R后随机分为移植组和对照组。移植组于肾血流恢复后经肾动脉灌注自体骨髓干细胞悬液,对照组同样方法注射等体积生理盐水。分别于I/R前和I/R后第1、3、5、7、14、21、28 d静脉采血,检测血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN),相同时点取肾组织行普通病理及BrdU免疫组化观察。结果:I/R后第1 d和第3 d 2组动物SCr、BUN均达到最高水平,以后逐渐下降;第7 d后移植组SCr及BUN水平逐渐低于对照组,到实验观察结束时的第28 d,对照组SCr和BUN分别为(135.6±32.5)μmol/L和(10.9±2.5)mmol/L,移植组SCr和BUN分别为(90.1±11.1)μmol/L和(8.0±1.5)mmol/L,2组间有显著差异(P<0.05)。普通病理观察,I/R后肾小管上皮细胞变性、坏死甚至脱落,BrdU免疫组化染色显示移植组于细胞移植后第5、7 d肾小管BrdU阳性染色并持续至实验结束,对照组阴性。结论:骨髓干细胞移植可以在一定程度上加速急性肾小管坏死后肾功能修复,自体骨髓干细胞移植是1种加速急性肾小管坏死后修复的安全而有效的方法。
- 肖丽佳余月明潘兴华曹礼应杨勇琴
- 关键词：骨髓干细胞再灌注损伤急性肾小管坏死骨髓移植
- Motic显微数码互动实验室在组织胚胎学实验教学中的应用被引量：18
- 2008年
- 目的:总结一学期以来组织胚胎学数码互动实验室的实践经验,探讨数码互动实验室在教学实践中的作用。方法:对一学期以来数码互动实验室使用过程中其所显示的优势及暴露的问题进行总结,并提出可能的解决办法。结果:数码互动教学既可提高教学效率、教学监控能力、有利于师生的互动,又可促进实验考试方式的改革。结论:组织学与胚胎学实验教学是组织胚胎学教学工作的一个重要环节,科学的教学手段对于提高教学效果至关重要。
- 杨勇琴杨开明张灵王慧杰
- 关键词：组织学与胚胎学实验教学
- 磷脂酶Cγ2对自身反应性B细胞的调控作用
- 2012年
- 目的应用基因敲除小鼠模型研究磷脂酶Cγ2对无能B细胞产生的调节机制.方法采用流式细胞术分析野生型和PLCγ2缺失型小鼠无能B细胞的表型;同时用末端转移酶标记技术检测无能B细胞凋亡;溴脱氧尿嘧啶核苷掺入标记技术研究无能B细胞增殖情况.结果 PLCγ2缺失小鼠与PLCγ2野生小鼠相比,无能B细胞数量显著减少(P<0.01),无能B细胞凋亡率显著增加(P<0.01),而无能B细胞增殖率无明显差异(P>0.05).结论 PLCγ2信号提供了存活信号,PLCγ2参与了无能B细胞的调控过程.
- 何颖红赵文珍杨勇琴王一心
- 关键词：小鼠
- 自体骨髓间充质干细胞移植治疗兔肾缺血再灌注损伤
- 2008年
- 目的:骨髓间充质干细胞可分化为肾小管上皮细胞,有效促进损伤肾脏功能的修复,但以往研究多以大鼠作为实验对象采用同种异体移植。实验采用自体骨髓间充质干细胞行兔左肾动脉灌注治疗,以观察移植细胞对缺血再灌注损伤后肾组织结构和功能修复的影响。方法:实验于2006-03/12在解放军成都军区昆明总医院完成。①实验材料:健康2-3月龄日本大耳白兔24只,雌雄不限,体质量(2.6±0.7)kg,由解放军昆明总医院实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。将24只兔随机均分为移植组和对照组。②实验方法:以红细胞破碎法结合贴壁培养法分离培养兔骨髓间充质干细胞,免疫细胞化学染色鉴定细胞表面标记物CD34、CD105、CD106的表达。采用右肾切除联合左肾动脉缺血85min再灌注的方法,制备兔肾缺血再灌注损伤模型。造模后移植组经右股动脉插管行自体骨髓间充质干细胞左肾动脉灌注治疗,对照组注入等量生理盐水。③实验评估:分别在移植前及移植后3,7,14,21,28d行肾功检测和肾组织病理学观察。结果:①刚接种的细胞主要为圆形,第7天左右细胞呈现克隆性生长,呈骨髓间充质干细胞特征性的旋涡状生长,细胞形态多呈梭形,传代细胞生长速度明显增快,细胞体积明显增大。P3代细胞CD34染色均呈阴性反应,而CD105、CD106染色阳性细胞在超过98%。②造模后第3天两组的血清肌酐、尿素氮均达最高水平,自第7天起移植组血清肌酐、尿素氮水平逐渐低于对照组,第21天两组间血清肌酐和尿素氮差异显著(P<0.05)。③缺血再灌注损伤后两组肾小管上皮细胞变性、坏死甚至脱落,随着时间延长,坏死肾小管逐渐修复,但移植组修复程度明显好于对照组。结论:移植的自体骨髓间充质干细胞可在一定程度上加速缺血再灌注损伤后肾组织结构和功能的恢复。
- 杨勇琴潘兴华余月明庞荣清肖丽佳王鹤桦屈璐赵煜行治国
- 关键词：骨髓间充质干细胞缺血再灌注急性肾小管坏死
- Motic显微数码互动系统在留学生组胚教学中的应用被引量：4
- 2015年
- 为探讨Motic显微数码互动平台在留学生组织学与胚胎学教学中的应用效果,利用Motic显微数码互动对留学生进行理论、实验同步教学,通过理论、实验考核及问卷调查的形式对教学效果进行评价。与传统教学组相比,Motic显微数码互动平台下留学生组织学与胚胎学教学实验、理论同步教学法能显著提高教学质量。
- 杨勇琴何颖红王慧杰赵文珍周玥
- 关键词：组织学与胚胎学教学方法留学生教育
