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靶向pol基因miRNA抑制禽白血病病毒复制的研究: 究比较分析了国内外已公布的禽白血病病毒不同亚群pol基因核苷酸序列，根据pol基因序列相对保守的特点及RNA干扰设计原则，设计了5对miRNA序列，合成后将其定向克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表...; 张在平马学恩杨海彦田进孟庆文

靶向pol基因siRNA抑制J亚型禽白血病病毒复制的研究被引量：2: 2011年; 为筛选能够有效抑制J亚型禽白血病病毒(ALV-J)复制的siRNA,本研究根据ALV的pol基因保守序列设计合成5对shRNA序列,并将其分别克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体中,构建siRNA表达重组质粒,分别为pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814、pcDNA-sh-pol1016、pcDNA-sh-pol1915和pcDNA-sh-pol2516。将重组质粒分别转染DF-1细胞6h后,以100TCID50的ALV-J感染细胞,并利用IFA、westernblot和real-timePCR方法评价其对ALV-J复制的抑制效果。IFA和westernblot检测结果表明:其中pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814和pcDNA-sh-pol2516可以有效抑制病毒囊膜蛋白的表达。Real-timePCR结果显示:与阴性对照和空载体对照相比,这3种siRNA在mRNA水平对ALV-J的抑制率达29%～86%。本研究在细胞水平上筛选的siRNAs可作为候选siRNAs,为抗鸡ALV-J的研究奠定基础。; 张在平马学恩杨海彦田进孟庆文; 关键词：禽白血病病毒 SIRNA

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杨海彦