杨煜 作品数:26 被引量:112 H指数:6 供职机构: 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 山东省农业科学院青年科研基金 山东省农业良种工程项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
大白菜细菌人工染色体文库的构建及鉴定 被引量:7 2011年 以我国优良的大白菜自交系‘85-1’为材料,利用pIndigoBAC-5为载体,通过对高分子量DNA的制备、大片段DNA的选择、连接转化条件等几个方面的优化,构建了大白菜细菌人工染色体文库。该文库由57600个克隆组成,平均大小为98.4kb,空载率为1.5%;覆盖大白菜基因组10.3倍;挑取6个克隆培养5d后,经HindⅢ完全酶切检测,其指纹图谱稳定一致。大白菜细菌人工染色体文库的构建为重要功能基因的克隆和定位及比较基因组研究奠定了基础。 冯大领 石学萍 杨煜 王彦华 轩淑欣 赵建军 申书兴关键词:大白菜 细菌人工染色体文库 稳定性 青枯病菌研究进展 被引量:6 2011年 细菌性青枯病是由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种世界范围的细菌性土传病害,广泛分布于热带、亚热带及部分温带地区。青枯病菌寄主广泛,可侵染50多个科的200余种植物,给作物生产带来巨大损失。充分了解青枯病菌是进行青枯病防治的重要前提。本文从青枯病菌的菌群分类、基因组结构、致病机制与致病途径、病菌检测等方面做了系统的阐述,并对基于青枯病菌及寄主植物基因组序列信息,研究和探讨青枯病菌致病机制与青枯病防治进行了展望。 赫莲香 郭晓 张新永 樊颖伦 刘生祥 杨煜 郭华春 李广存关键词:青枯病菌 基因组结构 致病机制 马铃薯抗晚疫病基因研究进展 被引量:1 2013年 马铃薯晚疫病是马铃薯的第一大病害。利用分子生物学和基因工程技术,从马铃薯野生种质资源中分离抗病基因,并将其转化到优良栽培品种中,是提高马铃薯晚疫病抗性高效快捷的方法之一,目前已有多个来自不同野生种质资源中的晚疫病抗性基因被分离或定位。本文主要概述了近年来马铃薯抗晚疫病基因的研究现状。 于耀华 单伟伟 杨煜 刘芳 陈广侠 郭宝太 郭晓 李广存关键词:马铃薯 晚疫病 抗性基因 马铃薯卷叶病毒CP基因的RT-PCR扩增 被引量:8 2007年 根据马铃薯卷叶病毒CP基因的序列设计合成了两对特异性DNA引物,用RNA提取试剂RNAplant从感病的马铃薯叶片中提取总RNA,在3′引物引导下以总RNA为模板反转录合成cDNA第一链,然后进行PCR,分别扩增出了长627 bp和336 bp的特异性PCR产物,其大小与预期的CP基因及其部分序列一致,实现了马铃薯卷叶病毒CP基因及其片段的简便、有效的RT-PCR扩增。 何心凤 郭宝太 李广存 杨煜 王晓杰 毕玉平关键词:马铃薯 卷叶病毒 CP基因 RT-PCR 利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究 被引量:1 2012年 植物类受体蛋白激酶(Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用。在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK。利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK。进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1-StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株。用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1-StRLK成功转入ED13。以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1-StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据。 朱云 樊娜娜 于耀华 张柏顺 杨煜 晁祥建 郭宝太 金黎平 郭晓 李广存关键词:二倍体马铃薯 RNA干扰 青枯病抗性相关基因分离及其应用 发掘优良抗病基因、进行同源基因转化获得抗病品系已成为一条重要而有效的育种途径,本文就抗青枯病分子标记、抗青枯病相关基因的分离及在植物上的应用进行了初步概述,讨论了当前在该研究领域中存在的问题,展望了该领域的发展前景。 杨煜 晁祥键 李广存关键词:青枯病 抗性基因 分子标记 文献传递 青枯病抗性相关基因分离及其应用 发掘优良抗病基因、进行同源基因转化获得抗病品系已成为一条重要而有效的育种途径,本文就抗青枯病分子标记、抗青枯病相关基因的分离及在植物上的应用进行了初步概述,讨论了当前在该研究领域中存在的问题,展望了该领域的发展前景。 杨煜 晁祥键 李广存关键词:青枯病 抗性基因 基因分离 马铃薯 抗病性育种 文献传递 植物组织培养的应用及进展 被引量:43 2005年 本文综述了植物组织培养理论与技术的发展,重点论述其在脱毒快繁、育种、药物与其它生物制剂工业化生产以及低温储存与建立种质库方面的应用与进展。 王秀丽 杨煜 徐平丽 李爱琴 单雷关键词:植物组织培养 马铃薯卷叶病毒CP基因水溶性原核表达的研究 被引量:2 2015年 采用两种策略增强了马铃薯卷叶病毒(PLRV)CP基因的水溶性原核表达。首先,用5种可表达出分子伴侣的质粒分别转化重组菌TOP10(p BAD-LRCP),获得了既含p BAD-LRCP又含分子伴侣质粒的转化子;诱导转化子中PLRVCP基因与分子伴侣基因同时表达,SDS-PAGE结果表明,从转化子提取的水溶性蛋白中有明显的PLRV重组CP条带,即分子伴侣增进了重组CP的水溶性表达。其次,将PLRV-CP基因定向插入p ColdⅠ中构建了该基因的冷激诱导原核表达载体p Cold-LRCP,15℃、IPTG诱导24h,SDS-PAGE分析表明,从重组菌BL21(p Cold-LRCP)提取的上清蛋白中有明显的PLRV重组CP条带。试验结果表明,分子伴侣与冷激蛋白基因csp A的启动子均可提高PLRV-CP基因的水溶性表达,且后者的表达水平高于前者。 牛倩雅 辛佳 王晶珊 杨煜 李广存 郭宝太关键词:马铃薯卷叶病毒 CP基因 分子伴侣 水溶性 马铃薯RIN4-like基因全长cDNA的克隆与基因转化 RIN4是一个含有211个氨基酸并酰基化的膜结合蛋白,在拟南芥中RIN4作为分子靶标,可被AvrRpt2和AvrRpm1磷酸化和去磷酸化。RIN4对无毒基因AvrRpt2和抗病基因RPS2的表达具有负调控功能。RIN4的... 张柏顺 徐梅梅 杨煜 郭晓 李广存