杨耀琴
- 作品数：70 被引量：198H指数：7
- 供职机构：同济大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因重组人HSC73在大肠杆菌中的表达和纯化
- 2000年
- 目的 用基因工程方法表达人的热休克类似蛋白 73 ( HSC73 )并提纯 HSC73蛋白 ,为研究该蛋白提供条件。方法 用人 HSC73基因构建原核细胞表达载体 p ETHSC73 ,在大肠杆菌 BL 2 1中用异丙基硫代 -β-D半乳糖苷 ( IPTG)诱导表达 ,ATP亲和层析法提取 HSC73。经 SDS-PAGE、3 .a.3抗体 Western blot作 ECL检测。结果 人HSC73基因构建的载体 p ETHSC73能很好地在大肠杆菌表达出分子量为 73 k D的蛋白 ,蛋白提取方法能有效提纯表达的蛋白 ,用 3 .a.3抗体作 Western blot检测证实该蛋白具有人 HSC73抗原特性。所得蛋白质氨基酸测定和 N端测序的结果与有关报道的一致。结论 人 2 .1kb的 HSC73基因片段构建的高表达载体能够很好表达人 HSC73 ,用 ATP亲和层析法可以有效提纯有活性的人
- 杨虎川杨耀琴陈斌陶惠红
- 关键词：基因重组大肠杆菌
- 趋化因子受体CCR7下调对95D肺癌细胞侵袭力的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨趋化因子受体CCR7下调对95D肺癌细胞转移、侵袭的影响及相关机制。方法 95D肺癌细胞经不同剂量的白藜芦醇处理后,通过免疫荧光染色、PCR、Western印迹法等观察CCR7及其相关信号通路的表达。Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。结果白藜芦醇处理后95D细胞CCR7表达显著降低,与其相关的信号传导蛋白PI3K、p-AKT表达量亦降低,并呈剂量依赖性。Transwell小室结果证明经白藜芦醇处理后的肺癌细胞侵袭力下降,同时也抑制CCR7配体对肺癌细胞的趋化作用。结论本研究结果提示白藜芦醇下调CCR7的表达同时也可下调PI3K、p-AKT表达,抑制肿瘤细胞侵袭转移的过程并促进其凋亡。
- 刘仁鹏陈郭玲周爽陶惠红杨耀琴
- 关键词：CCR7白藜芦醇次级淋巴组织趋化因子
- 吐温80对BGC-823细胞抑制作用及凋亡相关因子的影响被引量：3
- 2001年
- 目的 观察吐温 80对人胃癌细胞 BGC- 82 3的抑制作用及凋亡相关因子的影响。方法 采用 MTT法 ,测定不同浓度 (0 .15 %、0 .1%、0 .0 5 % )的吐温 80及其不同作用时间 (2小时、18小时、34小时 )条件下 ,对 BGC- 82 3细胞的抑制作用 ;运用免疫组化 ABC法染色 ,观察 0 .1%吐温 80 %作用 (2小时、18小时、34小时 )后 BGC- 82 3细胞Hsp70、bcl- 2、bax的表达。结果 (1)吐温 80的抑制效应随作用浓度及时间增加而明显增高 (P<0 .0 1) ;(2 )吐温 80作用不同时间对细胞 Hsp70表达及分布影响不明显 ,而 bcl- 2、bax随作用时间延长有表达增加趋势 ,作用 34小时 ,bcl- 2主要分布于胞浆 ,bax主要分布于胞核。结论 吐温 80对肿瘤细胞具有较强抑制作用 ,吐温 80对 bcl- 2、bax表达及分布影响可能与其抑制作用有关。
- 陈斌陶惠红杨耀琴杨虎川
- 关键词：吐温80BAX蛋白BGC-823细胞
- 前列腺癌干细胞的研究进展
- 2007年
- 前列腺癌干细胞（PCSC）是前列腺癌形成、复发、转移及耐药的根源,关于PCSC的来源、分离鉴定方法和生物学特性的研究已经取得了一定进展,为前列腺癌的诊断和治疗提出了新的思路。
- 谷晓媛杨耀琴
- 关键词：肿瘤干细胞前列腺肿瘤
- 吐温80对BGC-823细胞抑制作用及凋亡相关因子的影响
- 本文通过MTT及免疫组化的方法,观察吐温80对人胃癌细胞BGC-823的杀伤抑制作用及对HSP70、Bel-2、Bax表达的影响,从而进一步探讨时温的作用机制.
- 陈斌陶惠红杨耀琴杨虎川
- 关键词：胃癌细胞吐温80
- 文献传递
- 白藜芦醇对A549肺癌细胞增殖和侵袭力的影响
- 应用MTT法、流式细胞仪、免疫细胞化学及Western blotting等方法,测定A549细胞经过不同浓度的白藜芦醇作用后,细胞增殖活性、凋亡率、细胞周期的改变、细胞粘附能力及MMP-2、TIMP-2表达的改变。白藜芦...
- 陈海霞杨耀琴陶惠红朱颖超周爽王和勇
- 氯化锂协同温热对人胃癌细胞抑制效应的实验研究被引量：4
- 1999年
- 目的 观察氯化锂协同温热对 Ｂ Ｇ Ｃ８２３ 人胃癌细胞的生物学效应。方法 通过克隆形成率、细胞生长曲线测定肿瘤细胞生长特性变化，用免疫组化染色测定细胞 Ｈｓｐ７０、ｐ５３ 表达变化。结果 研究表明氯化锂在一定范围内随着浓度的增加，对肿瘤细胞生长的抑制作用逐渐增强；４１℃温热对肿瘤细胞无显著抑制作用；两者合并作用时，克隆形成率进一步降低（ Ｐ＜ ０．０１），显示明显协同效应。免疫组化观察显示， Ｈｓｐ７０ 主要分布于细胞质，４１℃温热可诱导 Ｂ Ｇ Ｃ８２３ 细胞 Ｈｓｐ７０ 表达增加，但温热与氯化锂合并作用则使 Ｈｓｐ７０ 的表达显著抑制（ Ｐ＜ ０．０５）；ｐ５３主要分布于细胞核，氯化锂（１ ｍ ｇ／ｍ ｌ）及合并作用对ｐ５３ 表达有轻度抑制作用。结论 单价阳离子锂与温热合并有一定协同抑制肿瘤细胞生长作用。其中抑制 Ｈｓｐ７０ 表达，阻止热耐受的产生可能是其协同机理之一。
- 陶惠红娄靓珂杨虎川朴文姬杨耀琴
- 关键词：氯化锂温热疗法
- 吐温80合并温热诱导BGC-823细胞的抑制作用及对凋亡相关因子的影响被引量：2
- 2002年
- 目的 观察膜活化剂吐温 80合并温热作用对人胃癌细胞BGC 82 3的抑制效应及其对Hsp70、bcl 2、bax表达的影响。方法 通过MTT法 ,测定 0 .1%及 0 .15 %吐温 80与 4 2℃温热合并作用对BGC 82 3细胞的抑制作用 ;运用免疫细胞化学染色 ,观察 0 .1%吐温 80与 4 2℃温热合并作用后 (0h、8h、16h、2 4h)BGC 82 3细胞Hsp70、bcl 2、bax表达的改变。结果 吐温 80合并 4 2℃10 0min温热作用对BGC 82 3细胞具有明显的抑制效应 ,温热后保留吐温 80继续作用将进一步增强抑制效应 ,合并抑制效应与吐温 80浓度相关 (P <0 .0 1)。合并作用能明显抑制BGC 82 3细胞热作用后的Hsp70表达 ,但bcl 2、bax的表达均增加 ,且bax的表达强于bcl 2 ,并全部分布于胞浆。结论 吐温 80与 4 2℃温热有明显协同抑制肿瘤细胞生长效应 ,对Hsp70和bcl 2、bax表达及分布的影响提示其抑制机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。
- 陶惠红杨虎川陈斌杨耀琴
- 关键词：吐温80HSP70BAX温热疗法
- HSV-tk基因表达载体的构建及其对A549细胞的杀伤作用
- 2009年
- 目的构建自杀基因HSV-tk表达质粒,研究自杀基因疗法对人肺癌细胞的杀伤作用,探讨其治疗肺癌的可行性。方法PCR扩增tk基因带EcoRⅠ、XhoⅠ酶切位点,然后构成建到pcDNA3.0载体中成pcDNA3.0-tk;将pcDNA3.0-tk转染A549肺癌细胞,应用细胞生长曲线和MTT法测定前药GCV对A549细胞的杀伤作用。结果成功获得pcDNA3.0-tk克隆,RT-PCR、Western印迹法证明A549细胞转染pcDNA3.0-tk后可表达自杀基因,GCV能特异性地杀伤A549/tk细胞。结论HSV-tk基因表达质粒构建成功;HSV-tK/GCV系统对肺癌A549细胞有一定的杀伤作用。
- 高慧杨耀琴陶惠红赵培林
- 关键词：自杀基因胸苷激酶基因治疗
- 不同频率电磁场对胆囊癌细胞内游离Ca^2＋浓度的影响被引量：5
- 2002年
- 目的探讨不同频率的低功率电磁场对胆囊癌细胞内游离钙离子水平的影响及其意义.方法采用流式细胞仪检测不同频率电磁场作用后,胆囊癌细胞内游离钙离子(Ca2+)水平的变化.结果经不同频率(0.1 MHz～40 MHz)电磁场作用后,各实验组均可见细胞内游离Ca2+浓度上升,0.1 MHz和20 MHz作用后游离Ca2+浓度上升最为显著,有显著统计学意义,1 MHz和40 MHz作用后游离Ca2+浓度上升不明显,无统计学意义.结论 0.1 MHz～40 MHz范围低功率电磁场作用后引起胆囊癌细胞内游离Ca2+浓度升高,不同频率电磁场对游离钙离子升高的影响有明显差异.细胞膜上的不同分子有不同的谐振频率,推测0.1 MHz、20 MHz两频率可能与Ca2+离子回旋谐振频率有关,或与之产生某种偶联,对Ca2+离子产生明显作用,进而在细胞和分子水平产生生物效应.
- 陈平杨耀琴陶惠红杨虎川李晶华张珏
- 关键词：电磁场流式细胞仪细胞内游离钙离子浓度胆囊肿瘤细胞
