柏学亮
- 作品数：31 被引量：169H指数：7
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程化学工程更多>>
- 弗兰克氏菌转化研究初报
- 1992年
- 完成了弗兰克氏菌菌株C101,Cc01,CcR03,At4,Hr16和CG01的原生质体分离及Cc01原生质体的再生。将菌丝转化技术用于弗兰克氏菌的转化研究,结果发现,pLAFRI上的四环素抗性基因能在Cc01中表达。此外,Cc01具有卡那霉素抗性。
- 曾王勇柏学亮马庆生
- 关键词：弗兰克氏菌原生质体
- 基因工程大豆、花生根瘤菌的研究和应用被引量：1
- 1992年
- 我校分子遗传研究室于1983年成立,是国内建立较早的分子生物学研究室之一。主要从事共生固氮和植物病原菌分子遗传学两大方面的研究,承担国家863计划项目生国际科研合作项目共九项。本文主要介绍近几年来在高效固氮大豆、花生根瘤菌的研制和应用的成果。1
- 柏学亮刘涛陈荣基樊妙姬唐东阶马庆生
- 关键词：大豆花生根瘤菌基因工程
- 慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)USDA110菌株3-羟丁酸脱氢酶基因(bdhA)的克隆、序列及特性被引量：1
- 2003年
- 通过功能互补试验 ,从慢生型大豆根瘤菌USDA110菌株基因文库中筛选到能互补广宿主根瘤菌NGR2 34的bdhA突变体菌株NGRPA2和苜蓿根瘤菌的bdhA突变体菌株Rm1110 7、使之恢复Hbu+ 表型的克隆 ;经酶活测定和Southern杂交证明该克隆含有bdhA基因。测定了bdhA基因全序列 ,并在GenBank登记 (登记号为 :AY0 775 81)。该基因由 789个碱基对组成 ,编码分子量为 2 7.5 9ku、含 2 6 2个氨基酸残基的 3 羟基丁酸脱氢酶。在该基因的开放阅读框内插入interposonΩKm ,并通过同源重组构建了BradyrhizobiumjaponicumbdhA突变体 (bdhA ::ΩKm)。植株试验未显示bdhA基因的突变对结瘤、固氮有明显影响。
- 戴美学武波柏学亮张成刚马庆生Trevor C.Charles
- 能降解天然纤维素的地衣芽孢杆菌GXN151的分离鉴定及其一个纤维素酶基因(cel5A)的克隆和测序分析被引量：22
- 2003年
- 从广西大学农场陈旧稻草堆中分离出1株具有降解天然纤维素稻草粉、甘蔗渣粉活性的细菌GXN151,经形态观察、16SrDNA序列分析和丙酸盐利用试验将其鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。通过连接经BamHI酶切的pBluescriptKS(+)和回收得到的经Sau3AI部分酶切的GXN151的3～10kbDNA在大肠杆菌JM109中构建了该菌的含7099个克隆的基因文库,文库克隆中插入片段最大的为11.0kb,最小的为3.1kb,平均大小为4.6kb,含GXN151基因组中任一基因的概率P为99.6%。筛选该文库获得8个表达羧甲基纤维素酶活性的克隆,DNA测序和PCR分析表明,该8个克隆可归为3类不重叠的独立克隆,其中一个克隆pGXNL2的测序分析表明其上的cel5A基因为1626bp,可编码含542个氨基酸的羧甲基纤维素酶,Cel5A的N-末端的42个氨基酸具有信号肽特征,它的第66～321氨基酸为家族5糖基水解酶(glycosylhydrolase)功能域、第391～472氨基酸为家族3碳水化合物结合组件(carbohydrate-bind-ingmodule,CBM)。本工作首次报道地衣芽孢杆菌能降解结晶纤维素及从该种细菌中克隆到纤维素酶基因。
- 刘永生冯家勋段承杰莫新春柏学亮张成刚唐纪良马庆生
- 关键词：天然纤维素地衣芽孢杆菌降解
- 慢生型大豆根瘤菌nfe基因的分子克隆被引量：5
- 1999年
- ｎｆｅＣ基因是从慢生型大豆根瘤菌中克隆到的，与竞争结瘤有关的基因。本研究从慢生型大豆根瘤菌菌株ＧＸ２０１的ｐＬＡＦＲ３为载体的基因文库中，筛选出与ｎｆｅ同源基因克隆。以转座子Ｔｎ５ｇｕｓＡ５诱变获得了ｇｕｓ基因表达的Ｔｎ５ｇｕｓＡ５插入突变质粒。
- 周刚林武波唐东阶柏学亮马庆生
- 关键词：大豆根瘤菌结瘤基因分子克隆
- 慢生型大豆根瘤菌nfeC基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2001年
- 通过亚克隆 ,将重组质粒 pGXN2 0 1中与nfeC基因同源的片段定位在 4kbClaI+XbaI片段上。序列分析表明该片段全长 40 38个碱基。该片段上含有一个完整的阅读框架。该阅读框架编码一个含 2 75个氨基酸的多肽 ,与已报道的nfeC基因编码的蛋白质具有 93%的同源性。
- 武波周刚林龙章德唐东阶柏学亮马庆生唐纪良
- 关键词：慢生型大豆根瘤菌克隆
- 改造稀有密码子提高SEA蛋白表达量被引量：31
- 2002年
- 利用重叠PCR技术突变了sea基因上一个稀有密码子簇 ,将此段中稀有密码子全部更换成E .coli最常用密码子 ,得到seam 。将sea和seam 分别克隆于 7ZTS表达载体上 ,并转化JM10 9(DE3)菌株。结果表明 ,sea基因的表达十分微弱 ,而seam 基因的表达量十分高 ,约占菌体总蛋白的 15 %。表达产物在体内具有一定的抗肿瘤活性。
- 时成波吕安国吴文芳杨立泉冯家勋柏学亮
- 关键词：稀有密码子表达量
- 外源nfeC基因导入快生型大豆根瘤菌菌株HN01的行为分析被引量：9
- 1998年
- nfeC基因是从慢生型大豆根瘤茵中克隆到的、与竞争结瘤有关的基因．将含nfeC基因的质粒pGXN100导入快生型大豆根瘤菌菌株HN01后，构建了重组快生型大豆根瘤菌GX301．与HN01相比较，GX301的竞争结瘤能力增强．
- 马庆生武波唐东阶柏学亮何曙光周刚林
- 关键词：大豆根瘤菌竞争结瘤
- 地衣芽孢杆菌GXN151的纤维素酶基因cel12A的序列分析及其在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2003年
- 地衣芽孢杆菌菌株GXN151的cel12A基因为783bp,可编码含261个氨基酸的羧甲基纤维素酶Cel12A,Cel12A的N末端第1～28氨基酸具典型的信号肽特征、第9～31氨基酸具跨膜功能域特征、第104～261氨基酸形成家族12糖基水解酶(glycosylhydrolase)功能域。将编码其第73～261氨基酸的DNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)得表达质粒pGXN12A,用1mmol/LIPTG诱导处理JM109(DE3)/pGXN12A的培养液6hpGXN12A的表达量达到最高,在JM109(DE3)和BL21(DE3)pLysS中该表达蛋白质可分别占菌体胞内总蛋白的54.3%和20.9%。在含羧甲基纤维素的LA平板上JM109(DE3)/pGXN12A和BL21(DE3)pLysS/pGXN12A表现有较弱的羧甲基纤维素酶活性,说明重组的Cel12A的催化功能域具有独立的催化活性。包含体检测表明pGXN12A在JM109(DE3)中的表达产物大部分形成不溶性包含体。
- 刘永生冯家勋段承杰赵广存柏学亮张成刚唐纪良马庆生
- 关键词：地衣芽孢杆菌纤维素酶基因大肠杆菌
- IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :IL - 2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达。方法 :分别在金黄色葡萄球菌肠毒素A2 2 7Ala、B基因的两端克隆上两个酶切位点HindⅢ ,KpnⅠ。将IL - 2基因突变 ,设计一段linker使之分别与SEA2 2 7Ala和SEB相连并克隆到PET表达载体中 ,在大肠杆菌DH5α(DE3) -Pass中表达。结果 :表达的蛋白占总蛋白 15 %。结论 :IL -
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国冯家勋柏学亮
- 关键词：融合蛋白IL-2
