段坤
- 作品数：15 被引量：10H指数：2
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省重点科学建设项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 不同剂量鸭IFN-α真核表达质粒基因枪免疫对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭细胞和体液免疫调节作用研究
- 为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-sDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本研究将 pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭, 以 PBS ...
- 程志萍程安春汪铭书陈斌刘闯段坤周雪龚永强陈孝跃
- 关键词：基因枪鸭瘟弱毒疫苗分子佐剂
- 文献传递
- 基因枪轰击注射鸭α-干扰素基因疫苗对免疫鸭抗鸭瘟强毒感染的影响
- 2007年
- 将鸭α-干扰素基因疫苗pcDNA-SDIFN-α分别按每只1、3和6μg剂量采用基因枪轰击方式免疫樱桃谷鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA 3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,注射后第15 d给每只鸭人工感染鸭瘟强毒。结果显示,1μg pcDNA-SDIFN-α免疫鸭有3/12死亡,PBS和空载体注射鸭分别有5/12和4/12死亡;3μg和6μg pcDNA-SDIFN-α免疫鸭以及鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭100%受到保护。3个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量显著低于PBS和空载体对照组,而3个pcDNA-SDIFN-α免疫组之间差异不显著。表明,基因枪轰击pcDNA-SDIFN-α免疫鸭后能产生一定的抗鸭瘟强毒感染的作用。
- 周雪程安春汪铭书杨梅段坤卢菲程志萍刘闯陈孝跃陈斌
- 关键词：基因枪鸭瘟病毒
- 鸭α干扰素基因疫苗对DVH弱毒苗免疫鸭的细胞免疫调节作用研究
- 将鸭α干扰素(IFN-α)基因疫苗(pcDNA-DuIFN-α)以50、100、200μg三个剂量分别肌注免疫28日龄樱桃谷鸭,15天后免疫鸭病毒性肝炎(DVH)弱毒疫苗;同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水、DVH弱...
- 刘闯程安春汪铭书陈斌程志萍段坤杨梅周雪陈孝跃
- 关键词：细胞免疫调节
- 文献传递
- 高密度发酵大量制备鸭α-干扰素基因疫苗中试生产关键技术研究
- 对 pcDNA-SDIFN-α的重组大肠杆菌进行发酵培养条件(温度、pH、溶氧浓度、补料速度、接种量、发酵时间和消泡剂添加量)优化,筛选出了适合 DH5α菌株生长的最佳发酵条件为:温度37℃, pH7.4,溶氧含量40%...
- 周雪程安春汪铭书杨梅段坤
- 关键词：高密度发酵
- 文献传递
- 鸭α-干扰素基因疫苗在免疫鸭体内动态分布规律的定量检测研究
- 为弄清本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)在免疫鸭体内动态分布规律及其存留时间,为pcDNA-SDIFN-α的临床应用研究提供基础数据,本文将50、100和200μgpcDNA-SDIFN-α...
- 段坤汪铭书程安春周雪程志萍刘闯陈孝跃陈斌
- 关键词：实时荧光定量基因疫苗
- 文献传递
- 鸭瘟弱毒疫苗诱导免疫鸭细胞和体液作用的研究
- 将鸭瘟弱毒疫苗用肌肉注射免疫28日龄鸭,接种后采血用淋巴细胞增殖试验(MTT 法)测定鸭外周血 T 淋巴细胞转化;用流式细胞仪(FACS)测定 CDT 淋巴细胞墩量的动态变化;用间接 ELISA 法检测血清抗体水平.结果...
- 程志萍程安春汪铭书陈斌刘闯段坤周雪陈孝跃
- 关键词：鸭瘟弱毒疫苗细胞免疫体液免疫
- 文献传递
- 鸭α-干扰素核酸疫苗在鸭体内的动态分布及表达产物抗鸭瘟强毒效果初探
- 28日龄北京鸭分别通过肌肉注射50μg、100μg和200μg和基因枪轰击免疫1μg、3μg和6μg鸭α-干扰素核酸疫苗(pcDNA-SDIFN-α)，同时设PBS和空载体pcDNA3.1(+)对照。免疫后不同时间分别采...
- 段坤
- 关键词：鸭瘟核酸疫苗基因枪轰击抗病毒能力免疫血清
- 文献传递
- 基因枪轰击鸭IFN-α因疫苗对鸭瘟弱毒疫苗的细胞免疫调节作用
- 将鸭α干扰素(IFN-α)基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)以每只1、3、6 ug三个剂量基因枪轰击法免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA为对照。各组15 d后接种鸭瘟弱毒疫苗,3 d后开始采血,采用淋巴细...
- 程志萍程安春汪铭书陈斌刘闯段坤周雪陈孝跃
- 关键词：基因枪细胞免疫
- 文献传递
- 鸭IFN-α真核表达质粒基因枪免疫对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭细胞免疫调节作用初探被引量：3
- 2007年
- 为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的细胞免疫调节作用,本研究将pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15 d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗。接种后第3、7、14、21、28、35、49、63、84天采血用淋巴细胞增殖试验(MTT法)测定鸭外周血中T淋巴细胞转化效果;第7、14、21、28、35、49天采血用流式细胞仪(FACS)测定CD3+T淋巴细胞数量的动态变化。结果发现:①T淋巴细胞对ConA的反应能力(OD值),不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭外周血T淋巴细胞转化功能于第3-84天均高于PBS和空载体pcDNA对照组,其中第3-84天1μg/只组极显著(P≤0.01)高于PBS和pcDNA对照组,3μg/只组极显著(P≤0.01)或显著(P≤0.05)高于PBS和pcDNA对照组,6μg/只组于第7-49天极显著(P≤0.01)或显著(P≤0.05)高于PBS和pcDNA对照组;1μg/只组第3-35天显著(P≤0.05)高于3、6μg/只组;3μg/只组于第14-35天高于6μg/只组,但差异不显著(P≥0.05);pcDNA对照组略高于PBS对照组,但差异不显著(P≥0.05);②CD3+T淋巴细胞数量变化,不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭于第7-49天均高于PBS和pcDNA对照组,其中1μg/只组于第14-49天极显著(P≤0.01)高于PBS和pcDNA对照组,3μg/只组于第21-49天极显著(P≤0.01)高于PBS对照组和显著(P≤0.05)高于pcDNA对照组,6μg/只组于第7-49天显著(P≤0.05)或极显著(P≤0.01)高于PBS和pcDNA对照组;1、3和6μg/只组之间差异不显著(P≥0.05);pcDNA组于第14-49天高于PBS组,但差异不显著(P≥0.05)。研究表明,pcDNA-SDIFN-α提前15 d免疫能显著增强DP弱毒疫苗诱导的鸭细胞免疫力,以基因枪免疫1μg/只的效果最佳,它是一种良好的增强DP弱毒疫苗细胞免疫的分子佐剂。
- 程志萍程安春汪铭书陈斌刘闯段坤周雪陈孝跃
- 关键词：基因枪鸭瘟弱毒疫苗细胞免疫分子佐剂
- 鸭α-干扰素基因疫苗肌肉注射免疫鸭抗鸭瘟强毒感染的研究被引量：2
- 2007年
- 将本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)分别按每只50、100、200μg3个剂量肌肉注射免疫樱桃谷鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,免疫15d后攻击感染鸭瘟强毒,于攻毒后2h、6h、12h、24h、3d、6d、9d、14d、22d、26d、33d和40d采全血,同时取死亡鸭的各组织器官,采用实时荧光定量PCR对鸭瘟病毒在鸭外周血中的动态变化和在各组织器官中的分布及含量进行检测。结果表明:①3个剂量pcDNA-SDIFN-α和鸭瘟弱毒疫苗都对鸭产生良好保护作用,免疫鸭未发生死亡;而PBS和空载体对照组3只鸭中有1只鸭死亡,死亡鸭心、肝、脾、肾、胰和各段肠管中均检测到鸭瘟病毒DNA且其含量大于pcDNA-SDIFN-α免疫鸭外周血病毒DNA含量;②3个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量比PBS和空载体对照组低,差异显著(P<0.05),特别是在2h差异极显著(P<0.01);攻毒后24h内,3个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量均低于鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭,差异显著(P<0.05);3个不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组之间外周血鸭瘟病毒DNA含量差异不显著(P>0.05),攻毒初期,200μg免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量最低,100μg次之,50μg最高。研究表明,pcDNA-SDIFN-α肌肉注射免疫鸭后能产生一定的抗鸭瘟强毒感染的作用,并在攻毒初期表现出一定的量效关系。
- 周雪程安春汪铭书杨梅段坤卢菲程志萍刘闯
- 关键词：荧光定量PCR鸭瘟病毒
