江汉宁
- 作品数:8 被引量:33H指数:3
- 供职机构:广东省皮肤性病防治中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 登革病毒3型病毒样颗粒在酵母体内的表达与鉴定被引量:2
- 2011年
- 目的探讨登革病毒3型病毒样颗粒(DENV3-VLPs)的免疫原性。方法用PCR法扩增登革病毒3型prME基因,插入载体pGAPZaA构建重组质粒pGAPZaA-prME-D3,将其转化毕赤酵母X33构建转化子pGAPZaA-prME-D3/X33。对转化子表达上清和细胞裂解液进行SDS-PAGE和Western blotting分析。用蔗糖密度梯度离心纯化表达的DENV3-VLPs并进行鉴定和电镜观察。结果成功构建重组载体pGAPZaA-prME-D3,获得酵母转化子pGAPZaA-prME-D3/X33,并应用毕赤酵母表达了DENV3-VLPs,表达蛋白约50000Mr,电镜观察VLPs直径为20~50nm。结论应用酵母表达系统成功表达了DENV-3VLPs,经鉴定表明其具有免疫反应性,为后续免疫原性研究及四价登革VLPs疫苗的构建奠定了基础。
- 付春云方丹云刘岩喻治准江汉宁江丽芳周俊梅
- 关键词:登革病毒病毒样颗粒毕赤酵母
- 登革2型病毒包膜蛋白在毕赤酵母中的表达和病毒样颗粒的组装被引量:4
- 2011年
- 目的在组成型的毕赤酵母系统中表达登革2型病毒包膜蛋白E和前膜蛋白prM,并研究病毒样颗粒在酵母细胞中的组装特性。方法以登革2型病毒ZS01/01株mRNA为模板,扩增编码prM/E蛋白的基因。将目的基因克隆至表达载体pGAPZaA的多克隆位点,并转化毕赤酵母GS115。经Zeocin抗生素筛选和PCR鉴定后获得酵母菌重组克隆,并进行表达和鉴定。结果成功克隆登革2型病毒prM/E基因,SDS-PAGE和Western blot检测表明包膜蛋白E在组成型的毕赤酵母系统中得到高水平表达;利用透射电镜在重组酵母胞浆内检测到30-50 nm的登革2型的病毒样颗粒,并发现类似登革病毒感染的双层膜结构;免疫电镜结果证实重组病毒样颗粒可以与抗登革2型病毒血清反应,具有免疫反应性。结论成功的建立了组成型表达登革2型病毒样颗粒的毕赤酵母系统,为登革病毒样颗粒疫苗的制备奠定了基础。
- 刘文权江丽芳刘岩江汉宁汤云霞方丹云
- 关键词:登革病毒包膜蛋白毕赤酵母病毒样颗粒
- 广州地区泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型研究
- 目的:研究2008年广州地区泌尿生殖道感染沙眼衣原体基因型分布和VS1-VS2基因突变性。方法:巢氏PCR扩增Omp1基因的VS1-VS2序列,ABI prism 377自动测序仪测序,运用DNAstar软件进行临床菌株...
- 杨斌郑和平薛耀华吴兴中江汉宁黄进梅
- 文献传递
- 2009年广东省性病实验室室间质评结果分析
- 性病实验室诊断在性病预防、诊断和治疗等方面发挥重要作用,为了加强性病实验室规范化管理,提高实验诊断水平,根据省卫生厅《关于印发广东省性病实验室管理工作规范(试行)通知》(粤卫(2002]216号)精神要求,积极开展性病实...
- 郑和平周浩吴兴中曾维英薛耀华江汉宁
- 关键词:性传播疾病实验室室间质评
- 文献传递
- 广州地区尖锐湿疣患者人乳头状瘤病毒的基因分型被引量:17
- 2013年
- 目的分析广州地区尖锐湿疣(CA)患者人乳头状瘤病毒(HPV)的感染状况,为其临床治疗提供依据。方法提取228例CA标本的HPV-DNA,经聚合酶链反应(PCR)和反向导流杂交确定HPV型别,分析21种基因型的型别分布,评价HPV与CA的相关性;数据经SPSS16.0统计软件分析。结果 228例标本检出HPV阳性219例,总检出率为96.1%;219例CA患者中HPV低危型感染203例,占92.7%,HPV6型和(或)11型共189例,占86.3%;228例受检者共检出370株HPV,发现21种基因型别以HPV6、11、16、52、58型感染最常见;219例阳性标本中HPV单一感染120例占54.8%,多重感染99例占45.2%;219例HPV-DNA阳性的CA患者,低危型和高危型混合感染率为33.3%,不同年龄组混合感染率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CA患者HPV感染以单一型别为主,HPV6和11型是主要型别,低危型和高危型混合感染较常见。
- 薛耀华江汉宁郑和平曾维英黄进梅吴兴中
- 关键词:人乳头状瘤病毒尖锐湿疣基因分型
- 广州地区泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型研究
- 沙眼衣原体分型技术包括抗主要外膜蛋白(major outer mcmhranc protein,MOMP)抗体血清学分型和编码MOMP的Omp1基因分型。为了了解2008年广州地区泌尿生殖道感染沙眼衣原体基因型分布和VS...
- 杨斌郑和平薛耀华吴兴中江汉宁黄进梅
- 关键词:泌尿生殖道感染沙眼衣原体基因分型基因突变
- 文献传递
- 广东地区性病门诊男性患者人乳头瘤病毒感染及其基因分型研究被引量:10
- 2011年
- 目的了解广东地区男性性病患者人乳头瘤病毒(HPV)感染及其基因型。方法用导流反向斑点杂交法对357例性病门诊男性患者进行HPV检测与基因分型,评价HPV及其基因型与临床症状及疾病类型的相关性。结果 357位受检者中,HPV总阳性率为43.7%(156/357),包皮、龟头和阴茎标本的HPV阳性率为44.9%(136/303)。赘生物、丘疹、红斑和无症状样本的HPV感染率分别为81.0%(94/116)、53.1%(17/32)、40.0%(4/10)和20.5%(38/185)。赘生物的HPV检出率与丘疹、红斑和无症状样本的HPV检出率差异有统计学意义(P<0.05)。基因型分析发现,5例鲍温样的丘疹病患者均有高危型HPV感染,而78例尖锐湿疣患者中低危型HPV感染病例占93.6%(73/78)。21种HPV基因型均被检出,以6(22.1%)、11(21.7%)、16(11.2%)、52(5.6%)、18(4.8%)和58(4.0%)型感染最常见。结论 HPV无症状感染在性病门诊男性就诊者中较常见,HPV基因型分布与疾病类型密切相关。
- 薛耀华江汉宁郑和平黄进梅曾维英吴兴中
- 关键词:人乳头瘤病毒基因型
- 带组氨酸标签的登革病毒2型和4型病毒样颗粒的表达鉴定和纯化
- 研究目的:
1.扩增编码登革病毒2型和4型结构蛋白prM和E全基因组序列,构建登革病毒样颗粒重组表达载体,使其在毕氏酵母中大量表达病毒样颗粒,通过亲和层析和蔗糖密度梯度离心方法获得高纯度的VLPs,为研制登革病...
- 江汉宁
- 关键词:登革病毒2型全基因组序列
- 文献传递