沈皆亮
- 作品数：61 被引量：326H指数：9
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 医学本科生参与课余科研实践的模式探索被引量：6
- 2018年
- 随着社会进步，现代医学教育要求医学生毕业后应具备医疗、教学、科研等多方面能力，而科研实践是切实提高学生综合能力的有效实现途径。但目前本科阶段的医学教育还是以基础知识和临床实践为主，对于科研能力的培养还相当欠缺。本课题组前期问卷调查显示，本科阶段高年级临床医学专业学生对科研感兴趣、有需求，但其自身科研能力还较差，并缺乏参与科研训练的机会。
- 郭秀明沈皆亮江维张晓军胡侦明梁勇郝杰
- 关键词：医学本科生现代医学教育学生综合能力医学专业学生本科阶段
- 白血病抑制因子对退变髓核细胞胞外基质的影响及其机制研究
- 2018年
- 目的:探讨退变椎间盘髓核组织白血病抑制因子(leukemia inhibit factor,LIF)表达及其对胞外基质表达的影响。方法:40只新西兰兔随机分5组(1组为对照组,4组为实验组),每组8只。针刺法建立L4/5、L5/6椎间盘退变模型,术后0、2、4、8周对椎间盘进行MRI扫描及HE染色评价退变程度,免疫组化检测髓核组织LIF的表达。体外原代培养兔髓核细胞,不同浓度重组LIF蛋白刺激髓核细胞24、48、72 h,Western blot检测聚蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(COLLA2α1)的表达,免疫荧光检测最大浓度组和对照组Aggrecan的表达并行Western blot检测金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-1)和基质金属蛋白酶-3(matrixmetalloproteinase-3,MMP-3)的表达。结果:影像学和组织学评分显示椎间盘退变随造模时间延长而加重,各组间差异有统计学意义(1.000±0.000,2.000±0.535,2.750±0.463,3.875±0.354,P=0.000;4.000±0.000,7.375±0.518,9.375±1.302,11.750±0.463,P=0.000)。免疫组化显示2周组LIF表达最高,随着椎间盘退变加重,其表达降低,但各组均高于0周组,差异有统计学意义(559.608±68.689,16 135.613±577.329,8 149.739±457.189,2 018.254±211.870,P=0.000)。细胞学实验显示,加入不同浓度LIF刺激后,Aggrecan、COLLA2α1的蛋白表达与LIF刺激浓度呈正相关,各处理组与对照组差异有统计学意义(0.191±0.020,0.212±0.020,0.321±0.041,0.511±0.032,0.561±0.042,P=0.000),Aggrecan免疫荧光结果与之相符。处理组TIMP-1表达明显高于对照组(0.454±0.022,0.211±0.012,P=0.000),MMP-3明显低于对照组(0.243±0.013,0.362±0.021,P=0.000)。结论:LIF在退变髓核组织中表达上升,且具有促进胞外基质合成作用,其潜在机制与LIF能够上调TIMP-1并下调MMP-3作用相关。
- 周浩肖强沈皆亮王棚郑鹏骥刘沪喆郝杰王羿阳胡侦明
- 关键词：椎间盘退变髓核细胞白血病抑制因子胞外基质
- SDF-1/CXCR4信号轴促进退变椎间盘胞外基质降解的研究被引量：5
- 2017年
- [目的]探讨SDF-1/CXCR4信号轴对于退变椎间盘胞外基质的影响及其潜在的作用机制。[方法]分别从年龄相匹配的椎间盘突出症和脊柱骨折手术患者中获取椎间盘组织,通过术前磁共振(MRI)采用Pfirrmann分级对椎间盘样本进行退变程度分组。免疫组化和western blot检测两个组椎间盘组织SDF-1、CXCR4、MMP-3,MMP9,Collagen Ⅱ和Aggrecan的表达。对取自椎间盘突出症患者的组织进行分离,细胞原代培养。取第3~6代细胞加入100ng/ml SDF-1或转染CXCR4小干扰RNA(siRNA)后共培养24 h,荧光定量PCR和western blot检测CXCR4、Collagen Ⅱ和Aggrecan的表达,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。为进一步探讨其潜在的分子机制,NF-κB抑制剂PDTC(20μmol/L)或CXCR4-siRNA转染髓核细胞后,观察NF-κB的主要基团P65磷酸化水平(p-P65)及核转移情况,胞外基质的表达和细胞凋亡水平是否发生改变。[结果]通过MRI的Pfirrmann分级标准,椎间盘突出组的分级为Grade Ⅲ~Ⅴ级,而脊柱骨折组的分级为Grade Ⅰ、Ⅱ级,分别定义为退变组和正常组。通过检测两组未进行处理的椎间盘组织发现,SDF-1、CXCR4、MMP-3和MMP-9在退变组中表达增高,而胞外基质的主要成分Collagen Ⅱ和Aggrecan表达则在退变组织中明显降低。而体外细胞实验结果显示,SDF-1处理后CXCR4的表达明显增高,同时伴随细胞凋亡的增高,而Collagen Ⅱ、Aggrecan的表达则显著降低,但这一作用可以随着CXCR4被siRNA靶向沉默后受到明显抑制。作者进一步采用PDTC或CXCR4-siRNA处理细胞后发现,SDF-1可以明显提高p-P65表达水平,促进P65基团的核转移,而这些作用随着CXCR4表达降低而受到抑制。此外PDTC抑制NF-κB活性后,细胞凋亡水平明显下降,而Collagen Ⅱ和Aggrecan的表达则明显上升。[结论]SDF-1/CXCR4信号轴在退变椎间盘中表达增高,它可以促进胞外基质的降解,增加细胞的凋亡水平,其潜在的机制通过调控NF-κB的活性
- 何斌沈皆亮许圣茜郝杰胡侦明
- 关键词：椎间盘退变SDF-1/CXCR4NF-ΚB胞外基质细胞凋亡
- 白藜芦醇恢复去分化正常髓核细胞表型的实验研究被引量：6
- 2013年
- 目的研究体外单层培养与藻酸盐微球立体培养对人正常髓核细胞分化的影响,并探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)恢复藻酸盐微球立体培养下去分化髓核细胞表型的调节机制。方法取6例腰椎爆裂骨折患者自愿捐赠的正常髓核组织分离培养髓核细胞,并行细胞鉴定;取单层培养的第1、3、5、7代髓核细胞分别行形态学观察、β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色观察细胞衰老情况及甲苯胺蓝染色观察蛋白多糖表达。分别取单层培养和藻酸盐微球立体培养的第1代髓核细胞检测细胞增殖情况。取立体培养1周的第7代髓核细胞随机分为立体培养空白组(A组)、RES组(B组)、沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(silent mating type information regulation 2homolog 1,SIRT1)-小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)+RES组(C组)、阴性对照-siRNA+RES组(D组),另设置髓核细胞单层培养空白组(E组),行相应培养后采用Western blot检测SIRT1、聚蛋白多糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR检测SIRT1 mRNA表达水平。结果细胞鉴定提示培养细胞为髓核细胞。形态学观察及SA-β-gal、甲苯胺蓝染色示,在体外连续单层培养条件下,正常髓核细胞易发生去分化,且随着传代次数增加趋势愈明显。藻酸盐微球立体培养48 h内髓核细胞增殖显著低于单层培养(P<0.05),但能显著提高去分化髓核细胞SIRT1、Ⅱ型胶原与Aggrecan蛋白的表达,E组与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);与A组相比,B组3种蛋白表达显著提高(P<0.05)。C组SIRT1 mRNA和蛋白表达均受明显抑制,显著低于B、D组(P<0.05),Ⅱ型胶原与Aggrecan蛋白表达也显著低于B、D组(P<0.05)。结论连续体外单层培养条件下,髓核细胞增殖速度较快,但在培养过程中易发生去分化现象;而在藻酸盐微球立体培养条件下,RES可以恢复去分化髓核细胞表型,合成更多细胞外基质,这一机制与
- 沈皆亮胡侦明钟小明王大武徐林飞
- 关键词：髓核细胞细胞表型白藜芦醇
- SDF-1/CXCR4信号轴通过NF-κB通路诱导人退变髓核细胞凋亡被引量：6
- 2017年
- 目的探讨趋化因子SDF-1/CXCR4信号轴对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的调控作用及其分子机制。方法将术中摘取的椎间盘标本根据Pfirrmann退变程度分为正常组和退变组。用免疫组织化学法、定量PCR和Western blot等检测SDF-1和CXCR4的表达。用退变椎间盘髓核原代细胞培养,取第3~5代的细胞给予10 ng/mL SDF-1刺激、CXCR4-siRNA转染及NF-κB特异性抑制剂PDTC(20μmol/L)等不同处理,Western blot和q-PCR验证转染效率和信号通路上靶蛋白(基因)的表达;Annexin V/PI检测细胞凋亡率;细胞免疫荧光检测NF-κB的重要基团P65的核转移情况。结果 SDF-1和CXCR4在退变椎间盘组织中表达显著升高(P<0.05);SDF-1可以诱导退变髓核细胞的凋亡,但在CXCR4的表达受到沉默后,SDF-1的促凋亡作用被抑制(P<0.05);加入SDF-1的诱导后,磷酸化P65的表达水平明显增高(P<0.05),P65向核内移位;用PDTC抑制NF-κB活性后,SDF-1促凋亡作用明显减弱(P<0.05)。结论 SDF-1/CXCR4信号轴促进髓核细胞凋亡的机制可能与Akt/NF-κB信号通路相关。
- 刘宗超刘勇王振龙韦章超沈皆亮胡侦明
- 关键词：SDF-1/CXCR4椎间盘退变AKTNF-ΚB
- 低强度脉冲超声通过PI3K/Akt通路促进人退变髓核细胞合成细胞外基质被引量：7
- 2013年
- 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响及机制。方法取人腰椎退变髓核组织,进行髓核细胞的分离、培养、鉴定,取P3代细胞转至藻酸钙凝珠培养。实验分组如下:LIPUS组:超声刺激1周,20 min/d;对照组:不予超声刺激同条件培养1周;LY294002组:超声刺激并加入LY294002共培养1周。应用ELISA法检测上清中髓核细胞分泌的aggrecan和Ⅱ型胶原(Col2α1);RT-PCR法检测细胞中aggrecan和Col2α1在mRNA水平的表达差异;Western blot法检测细胞中aggrecan、Col2α1、Akt及p-Akt的表达差异。结果予以LIPUS刺激后,上清中的aggrecan和Col2α1浓度较对照组升高(P<0.05),细胞内aggrecan和Col2α1在mRNA及蛋白水平的表达与对照组比较均有增高(P<0.05),Akt的表达无明显变化(P>0.05),p-Akt的表达增高(P<0.05),加入特异性抑制剂LY294002后,aggrecan和Col2α1的合成明显降低(P<0.05)。结论低强度脉冲超声能通过PI3K/Akt信号通路促进藻酸钙凝珠立体培养的人退变髓核细胞合成细胞外基质。
- 张晓军胡侦明郝杰沈皆亮
- 关键词：低强度脉冲超声PI3K/AKT通路细胞外基质
- 不伴神经损伤的胸腰椎爆裂骨折保守和手术治疗效果对比:一项荟萃分析被引量：13
- 2017年
- [目的]系统评价保守和手术治疗不伴神经损伤的胸腰椎爆裂骨折的有效性和安全性差异。[方法]计算机检索Pubmed、Embase、Cochrane图书馆、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据及中国知网等6个常用的中英文电子数据库,收录有关保守和手术治疗不伴神经损伤的胸腰椎爆裂骨折的临床随机对照研究,检索文献截至2015年9月。按照纳入标准和排除标准限定研究对象,采用改良的Jadad评分量表进行文献质量评估,运用RevMan 5.3软件对提取的有效数据进行Meta分析。[结果]纳入4项临床随机对照研究,共计患者239人,最终完成随访212人,其中保守组112例,手术组100例,随访12~268个月。Meta分析显示无论接受保守还是手术治疗的患者,在治疗后疼痛感受(VAS评分)、功能恢复(RMDQ-24)及重返工作方面比较差异均无统计学意义,但手术组患者后凸畸形的改善明显优于保守组,而保守组在治疗后的并发症和医疗花费方面要优于手术组。[结论]对于不伴神经损伤的胸腰椎爆裂骨折无论是保守还是手术治疗,两者的中远期临床结果相似,保守治疗具有并发症低、医疗花费少等优势。但由于各研究起始年月较早,手术方式较为传统,近年来兴起的微创治疗等手段与保守治疗的对比尚需更多高质量的前瞻临床对照研究进一步增强循证依据。
- 沈皆亮郝杰何斌
- 关键词：保守治疗手术治疗META分析
- 腰丛联合坐骨神经阻滞对腰椎融合术后康复的影响
- 2020年
- 目的比较术前腰丛联合坐骨神经阻滞与术前注射帕瑞昔布钠对腰椎融合患者术后康复的影响。方法回顾性分析2018年2月~2019年2月在重庆医科大学附属第一医院接受腰椎融合手术患者60例,采用随机数字表法分为实验组30例(术前腰丛联合坐骨神经阻滞)和对照组30例(术前注射帕瑞昔布钠)。比较两组术前、术后不同时间点视觉模拟评分(VAS评分)、腰椎功能障碍指数(ODI),并进一步比较两组术后下地时间、术后PCIA使用情况、住院时间及费用。结果实验组术后第1、3、7天VAS评分较对照组短,差异有统计学意义(P<0.05);实验组术后1周和1月ODI评分优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组下地时间(3.03±0.37)d、PCIA使用量(66.48±10.47)ml、使用频次(7.43±2.17)次、住院时间(6.03±2.15)d、住院费用(3.75±0.49)万元,低于对照组的(5.67±1.28)d、(103.56±14.83)ml、(24.27±8.39)次、(9.67±4.69)d、(5.03±1.06)万元,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论腰丛联合坐骨神经阻滞在腰椎融合术后早期镇痛及腰椎功能改善方面效果显著,有利于患者术后快速康复,减轻医疗负担。
- 杨正洋沈皆亮郝杰张晓军
- 关键词：腰丛联合坐骨神经阻滞腰椎融合术
- 术前营养状况与老年髋部骨折患者术后并发肺部感染相关性的研究被引量：13
- 2021年
- 目的探讨老年髋部骨折术后发生肺部感染(PP)与术前营养状态的相关性。方法回顾性分析2017年12月—2019年12月重庆市九龙坡区第二人民医院的老年髋部骨折手术患者,根据术后PP情况分为感染组和非感染组。收集患者年龄、性别、手术时间、术中出血量、体质量指数(BMI)等一般资料。两组患者总体营养状况由营养风险筛查量表(NRS-2002)评估;营养相关生化指标前白蛋白(PA)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)和视黄醇结合蛋白(RBP)血清浓度由实验室检测;人体成份分析仪检测计算去脂体重指数(FFMI)。采用Pearson相关分析两组差异显著的营养指标与PP发生的相关性。结果最终纳入116例患者,其中感染组49例,非感染组67例,两组患者年龄、性别、手术时间、术中出血量和BMI值等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。营养指标分析显示CNRS-2002筛选营养不良比例感染组较非感染组(61.2%vs.37.3%)显著增高,此外感染组PA(133.5±18.7)g/L、RBP浓度(18.2±3.2)g/L及FFMI值(17.9±2.7)kg/m^(2)较非感染组[PA(146.2±20.1)g/L、RBP(20.8±3.8)g/L、FFMI值(21.8±3.2)kg/m 2]均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者ALB和Hb浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。进一步Pearson相关性分析显示PA浓度(r=-0.361,P=0.004)和FFMI值(r=-0.149,P=0.027)与PP发生密切相关。结论术前营养状况差容易导致老年髋部骨折术后发生PP,其中PA血清浓度和FFMI值可作为预测PP发生的风险因素。
- 杨春张勇周毅沈皆亮
- 关键词：髋部骨折肺部感染术前营养老年
- 全内镜技术与显微内镜技术治疗单节段腰椎管狭窄症的Meta分析被引量：1
- 2021年
- 目的系统评价全内镜技术与显微内镜技术治疗腰椎管狭窄症的临床疗效与安全性。方法计算机检索中国知网、万方数据、中国生物医学数据库、PubMed、Embase和Cochrane图书馆,收集有关全内镜技术与显微内镜技术治疗腰椎管狭窄症的研究,检索时限均为建库至2020年4月。采用纽卡索-渥太华量表(NOS)进行文献质量评估,运用Review Manager 5.3软件对提取的有效数据进行Meta分析。结果共纳入4项随机对照研究,2项回顾性对照研究,1项病例对照研究。本Meta分析结果显示,全内镜技术与显微内镜技术两种手术方式的手术时间、术后腰部视觉模拟评分(VAS)、术后腰部功能障碍指数(ODI)、手术后翻修率、手术优良率比较,差异无统计学意义(P>0.05);住院时间和术后下肢VAS比较,差异有统计学意义(P<0.05),全内镜技术的住院时间短于显微内镜技术,术后腿部VAS评分低于显微内镜技术。结论全内镜技术与显微内镜技术治疗腰椎管狭窄症均能获得良好的手术效果,但全内镜技术的住院时间短,下肢疼痛症状改善优于显微内镜技术。
- 贾忠雄唐敏胡侦明张晓军江维沈皆亮周年郝杰
- 关键词：显微内镜腰椎管狭窄症
