牛建新
- 作品数:217 被引量:975H指数:19
- 供职机构:石河子大学农学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技攻关计划引导项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 适合原位RT-PCR的石蜡切片制作方法被引量:8
- 2006年
- 石蜡切片是原位RT-PCR中常用一种生物制片技术,简要阐述原位RT-PCR的原理以及适合于原位RT-PCR的石蜡切片的制作流程,对其易出现的问题和解决办法作了简要的概述。
- 刘宏牛建新韩晓燕
- 关键词:石蜡切片
- '库尔勒香梨'kfpMYB基因表达高低与萼片脱落和宿存相关性分析被引量:1
- 2018年
- 【目的】明确'库尔勒香梨'kfpMYB基因表达高低与萼片脱落和宿存的相关性。【方法】在新疆库尔勒巴格吉格代村梨园于盛花期选取强势树和弱势树各3株,各采30朵花的萼片,共180朵。同时每株树上各标记100朵花,落花7 d后进行调查,记录萼片的宿存与脱落情况。参照艾德莱植物RNA快速提取试剂盒的说明书提取总RNA。以总RNA为模板,按照TakaRa PrimescriptTMRT reagent Kit试剂盒的说明书合成'库尔勒香梨'cDNA第一条链。根据cDNA序列信息设计引物,通过实时荧光定量PCR明确kfpMYB基因在强势树与弱势树中的相对表达量,并用SPSS软件分析田间调查的数据。【结果】kfpMYB基因在强势树2~5序位萼片中的表达量均高于弱势树。kfpMYB基因在强势树和弱势树第2序位的表达量显著高于其他序位的表达量。强势树和弱势树的第2、3序位的宿萼率均显著高于第4、5序位,第5序位的脱萼率显著高于其他序位。不同树势中'库尔勒香梨'萼片kfpMYB基因相对表达量高低与萼片脱落和宿存有相关性,但不显著;在不同序位中,第4序位中'库尔勒香梨'萼片kfpMYB基因的相对表达量与萼片宿存呈显著负相关,第5序位中'库尔勒香梨'萼片kfpMYB基因的相对表达量与萼片脱落呈显著负相关。【结论】'库尔勒香梨'萼片kfpMYB基因的表达量与萼片的脱落和宿存存在相关性,不同树势中的相关性不显著,但在不同序位中存在显著相关。
- 赵欢王玉凯牛建新
- 关键词:萼片
- 库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究被引量:7
- 2004年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对 2种总RNA提取方法进行了比较研究 ,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法 ;并利用RT PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针 ,在此基础上 ,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究 ,结果表明 ,当探针浓度为 4 0 0ng·ml-1,甲酰胺浓度为 4 5 % ,4 2℃杂交反应 6h ,可获得最高灵敏度。进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好 ,基本无背景。Tween2 0的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测 ,结果表明 ,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号 。
- 牛建新朱军马兵钢覃伟铭王小兵吴忠华
- 关键词:库尔勒香梨苹果茎痘病毒CDNA探针
- 库尔勒香梨PsiERF基因的克隆和表达分析被引量:2
- 2018年
- 【目的】筛选克隆库尔勒香梨萼片脱落与宿存的相关基因,研究其在脱萼样品与宿萼样品中表达。【方法】以库尔勒香梨脱萼和宿萼花器官转录组测序数据为基础,从Unigenes中选出一条转录组和数字表达谱测序结果共有的与萼片脱落宿存相关的具有AP2/ERF结构域的差异基因,命名为PsiERF,对其进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR分析其在花期不同阶段不同器官中的表达量。【结果】PsiERF cDNA序列的长度是1 195 bp,包含一个编码264个氨基酸长度为795 bp的开放阅读框(ORF),一个123 bp的5'端非编码区和一个277 bp的3'端非编码区。库尔勒香梨的PsiERF的核酸与氨基酸序列与其他植物的ERF109基因具有高度的同源性。实时荧光定量结果显示,其在全花样本中,宿萼组全花样品表达量在所有时期均高于脱萼组全花样品,而在宿萼组样品末花期萼片表达量极显著高于子房。【结论】筛选、克隆并鉴定一个新的库尔勒香梨PsiERF基因,该基因属于AP2/ERF家族中的ERF亚家族,与库尔勒香梨的萼片宿存脱落存在密切关系。
- 徐航全绍文马丽周丽牛建新
- 关键词:库尔勒香梨ERF生物信息学
- 以dsRNA为模板的梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究被引量:20
- 2003年
- 用已知带梨脉病毒(Pearveinyellowvirus,PVYV)的库尔勒香梨植株和库尔勒香梨无病毒实生苗为供试材料,分别选用新鲜幼嫩叶片、4℃条件下保存2~4d的幼嫩叶片、冷冻的幼嫩叶片和皮层为试材,进行dsRNA的分离提取实验,得到了与PVYV基因组RNA长度9306bp相当大小的dsRNA谱带,并以dsRNA为模板,利用设计的特异引物,研究建立了梨脉黄病毒(PVYV)的RT-PCR检测技术体系,能有效地扩增出PVYV的一条长为316bp的特异片段,该技术可广泛用于果树病毒的分子检测。
- 牛建新刘连科朱军覃伟铭
- 关键词:库尔勒香梨双链RNART-PCR
- 先峰葡萄二茬栽培范例──关于电照对新梢和果实生长效果的研究
- 1994年
- 先峰葡萄二茬栽培范例──关于电照对新梢和果实生长效果的研究牛建新译(新疆石河子农学院园林系)印度、泰国、台湾等低纬度国家,正在广泛开展葡萄一年二收的所谓二茬栽培。中川在介绍其实况的同时,论述了在设施栽培发达的我国进行葡萄周年栽培的可能性。以后,我国几...
- 久保田尚牛建新
- 关键词:葡萄栽培电照
- 几种提高库尔勒香梨果实品质的技术研究被引量:18
- 2007年
- 以15年生的库尔勒香梨为试材,研究了不同着生位置的花芽、花朵、树形、授粉树和喷施PBO对库尔勒香梨突顶果率及果实品质的影响,为提高其品质提供技术方法。结果表明:同一着生位置的花芽对突顶果率影响不大,顶花芽的突顶果率高于腋花芽,腋花芽果形指数、含糖量优于顶花芽。花序中先开的花突顶果率最高,随序位依次降低分别为72.6%、19.6%、9.1%和6.4%。留第2、3号花朵可以降低突顶果,既能保证果个大小和产量。配置不同授粉树不能提高库尔勒香梨果实品质。开心形树形可以提高果实综合品质。盛花末期,喷施300倍PBO溶液可明显减少突顶果的座果率,改善果形,提高含糖量,明显提高了库尔勒香梨综合品质。
- 亚合甫.木沙牛建新席万鹏
- 关键词:库尔勒香梨花芽树形授粉树PBO果实品质
- 葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究
- 以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法.建立了GLRaV Ⅲ RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT...
- 牛建新陈萍李西平马兵钢鲁晓燕
- 关键词:RT-PCR检测
- 文献传递
- 库尔勒香梨SCoT分子标记体系的建立和优化
- 建立和优化库尔勒香梨SCoT-PCR反应体系,可为梨树种质资源遗传多样性评价、分子标记辅助选择育种和库尔勒香梨优良营养系鉴定奠定基础。以新疆库尔勒农二师29团、33团和34团的优良营养系库尔勒香梨为材料,通过L_(25)...
- 和世玉牛建新
- 关键词:库尔勒香梨正交设计
- 苹果两种病毒的RT-PCR检测技术研究
- 以苹果新鲜叶片和皮层为材料,改进总RNA的提取方法,获得纯度高、完整性好的总RNA,在此基础上进行了反转录和PCR扩增。检测到了苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV),建立了ACLSV、ASPV的RT-...
- 牛建新刘连科
- 关键词:苹果
- 文献传递