王伟丞
- 作品数：35 被引量：41H指数：3
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪木乃伊胎病原体混合感染的多重PCR诊断被引量：1
- 2014年
- 2013年11月,贵州省都匀市某猪场发生了一起母猪流产、产死胎为特征的疾病,为确诊该猪场病原诊断类型,试验采用猪繁殖障碍性病毒性疫病六重PCR检测方法对送检木乃伊胎病料进行了猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CFSV)和乙型脑炎病毒(JEV)的快速检测,结果表明该猪场送检病料存在PCV2和JEV两种病毒的混合感染。
- 王伟丞刘志杰梁海英曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒2型乙型脑炎病毒
- 1例仔猪腹泻疾病的多重RT-PCR诊断
- 2013年
- 猪传染性胃肠炎（TGE）是由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪的一种高度接触性传染病，主要特征是呕吐、严重腹泻和脱水性肠炎，对2周龄以内的仔猪危害较大，致死率可达100％；对5周龄以上的猪及成年猪危害较小，病死率低。
- 王伟丞曾智勇刘志杰
- 关键词：腹泻疾病PCR诊断猪传染性胃肠炎病毒仔猪脱水性致死率
- 猪圆环病毒2型贵州株全基因组的克隆与序列分析被引量：5
- 2014年
- 应用PCR方法对采自贵州长顺、清镇和仁怀地区疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的病料进行了猪圆环病毒2型（PCV2）全基因组扩增、克隆和测序分析.结果表明：所扩增克隆的3株PCV2中,GZ-QZl （JQ809463）和GZ-RHl （JQ809464）2个PCV2毒株基因组全长为1 767 bp,GZ-CSl （JQ809462）株为l 768 bp;3株PCV2之间的核苷酸序列相似性介于94.5％ ～99.9％,与国内外参考毒株核苷酸序列相似性为93.6％ ～99.9％;全基因组序列比对分析表明,GZ-QZ1和GZ-RH1两个毒株属于PCV2b,GZ-CS1株属于PCV2a.对3株病毒编码Cap蛋白的ORF2基因分析发现,GZ-QZ1和GZ-RH1毒株与GZ-CS1毒株相比在696位缺失了一个碱基A,导致移码突变,使得末端氨基酸序列变由L（K）P变为L（N）PR.
- 王伟丞曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因组序列克隆
- 1例牛传染性支原体肺炎的诊断
- 2015年
- 2014年9月,贵州省桐梓县某养牛场发生刚引进犊牛的相继死亡现象,该牛场本次从山东某牛场共引进犊牛31头,引进后的第一个月内发生6头牛的相继死亡,主要症状表现为精神沉郁,卧地不愿站立;食欲下降,咳嗽;部分牛只继发关节炎,表现跛行、关节脓肿等;发病初期体温升高至41℃,后期体温略偏高.确诊为牛传染性支原体肺炎感染.
- 李达李绍洪汤德元曾智勇王洪光韦冠东王伟丞代振江
- 关键词：支原体肺炎传染性犊牛养牛场症状表现食欲下降
- 猪圆环病毒2型标记毒株的构建与iDNA疫苗的初步研究被引量：3
- 2015年
- 为实现携带分子标记的猪圆环病毒2型标记毒株的构建,对其进行感染性DNA(iDNA)疫苗的初步研究,即构建的感染性克隆质粒既能发挥DNA疫苗的作用,同时又能在动物机体内拯救出活病毒,发挥病毒活疫苗的作用,本研究以PCV2Cap蛋白末端具有赖氨酸延伸特征的GZ-RH1株为材料,构建该毒株的感染性克隆质粒pcDNA3.1(+)-PCV2,并在病毒基因组中引入1个SalⅠ酶切位点作为鉴别拯救病毒的分子标记。将该感染性克隆质粒转染PK-15传代细胞进行病毒拯救后,通过IPMA、PCR-RFLP以及全基因组测序等试验对拯救病毒进行检测和鉴定,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力。结果表明,利用构建的感染性克隆质粒拯救获得的PCV2标记毒株,经盲传10代后毒价可到105.3 TCID50/mL,分子标记能够稳定存在,该感染性克隆质粒可以应用到PCV2iDNA疫苗的初步研究中。昆明小鼠接毒试验结果表明,构建的感染性克隆质粒在小鼠体内也具有感染性,能够拯救出PCV2标记毒株,且可以诱导产生抗PCV2的抗体,与体外拯救的标记毒株免疫小鼠具有类似的体内生物学特性,表明PCV2iDNA新型疫苗构建策略是可行的。本研究为进一步研究PCV2iDNA疫苗奠定了基础。
- 王伟丞梁海英曾智勇汤德元刘钊代振江
- 关键词：猪圆环病毒2型分子标记感染性克隆病毒拯救
- 冬春两季应加强猪流行性腹泻的综合防控被引量：2
- 2015年
- 冬春两季常是"冬痢"的高发季节,近2年来该病呈现出仅以猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染为主,而非之前的传染性胃肠炎病毒(TGEV)或TGEV和PEDV共感染为主,临床上主要表现为严重腹泻、脱水和急剧消瘦死亡为主要特征,现已给中国、美国、日本等国家的养猪业造成了巨大的损失,欧盟目前也已责令严防PEDV的传入。尽管该病在我国主要于2012前后呈现暴发流行,现多为散发,但入冬后仍需引起重视,采取积极措施予以综合防控。
- 刘钊曾智勇王伟丞代振江
- 关键词：猪流行性腹泻冬痢
- 应用PCR方法对一起疑似感染猪瘟病毒的检测
- 2014年
- 采用猪繁殖障碍性病毒性疫病六重PCR检测方法对贵州省某猪场送检的疑似感染猪瘟病毒(CFSV)病料进行了猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、CFSV和猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)的快速检测,结果表明该猪场送检的仔猪同时感染PCV2和PRRSV两种病毒,CFSV检测呈阴性。
- 王伟丞曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：PCV2PRRSV
- 猪圆环病毒2型感染性克隆的构建被引量：2
- 2015年
- 为构建猪圆环病毒2型(PCV2)感染性克隆,采用PCR方法从已鉴定为PCV2阳性的病料中扩增PCV2全长基因组片段后将其定向克隆至PVAX1载体中,构建了PCV2感染性克隆质粒p VAX1-PCV2;将重组质粒转染细胞进行病毒拯救,通过免疫过氧化物酶和RT-PCR进行拯救病毒检测,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力和遗传稳定性。结果表明,构建的PCV2感染性克隆质粒,成功拯救出PCV2,拯救病毒盲传8代后毒价可达104.78TCID50/m L,体外增殖能力较为稳定。本试验为深入研究PCV2的基因功能及致病机制等奠定基础。
- 王伟丞梁海英曾智勇汤德元刘钊代振江
- 关键词：猪圆环病毒2型感染性克隆病毒拯救
- 猪圆环病毒1型反向遗传操作系统的初步构建被引量：2
- 2014年
- 为构建猪圆环病毒1型的反向遗传操作系统,试验参考GenBank中已发表的PCV1序列,设计1对特异性引物,应用PCR方法扩增PCV1全长基因组,将其定向克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体中,并对其进行PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定;将构建好的重组质粒转染到PK-15细胞中,经3次连续传代后,用PCR方法检测转染后盲传细胞中PCV2核酸,经测序鉴定所拯救出的病毒与亲本病毒核苷酸同源性为100%。结果表明:构建的PCV1感染性克隆具有感染性。PCV1反向遗传操作系统的成功建立为进一步研究PCV基因组的功能及新型疫苗的研发奠定了基础。
- 王伟丞曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒1型PCR双酶切感染性克隆
- 猪圆环病毒1型贵州分离株全基因组的克隆与序列分析被引量：2
- 2014年
- 为了解猪圆环病毒（PCV）在贵州的分子流行病学和遗传变异情况，同时为其深入研究提供参考，应用PCR方法对采自贵阳、都匀和遵义地区疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的病料进行 PCV1全基因组的扩增、克隆和测序分析。结果表明：扩增克隆的4株PCV1基因组全长均为1759 bp，4株PCV1间的核苷酸序列相似性在99．1％-99．7％，与国内外其他PCV1参考毒株的核苷酸序列相似性均在98．1％以上，与参考毒株PCV2的核苷酸序列相似性在77％左右；4株PCV1与国内其他PCV1毒株位于同一进化分支， PCV1国外毒株则位于另一进化分支。4株PCV1和参考毒株 PCV2的 ORF1、ORF2推导氨基酸序列相似性分别为86．2％-87．8％和64．0％-68．2％，4株PCV1与PCV2的ORF1在复制起始区和其他功能区高度保守，可为构建嵌合病毒PCV1-2提供骨架。
- 王伟丞梁海英曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒1型基因组PCV1
