王勇
- 作品数:11 被引量:49H指数:4
- 供职机构:中国农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家公益性行业科研专项国家自然科学基金北京市科委项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 仔猪渗出性皮炎的实验室诊断被引量:22
- 2006年
- 猪葡萄球菌是引起猪渗出性皮炎的致病因素,能引起猪以油脂溢出、表皮脱落以及水泡形成为特征的全身性皮肤感染。某养殖户所养仔猪大批发病,临床症状和病理变化具有仔猪渗出性皮炎的特征,通过临床特征性症状和典型病理变化以及实验室分离,证实为致病性猪葡萄球菌,确诊该养殖户仔猪发生渗出性皮炎。
- 睢艳平徐镔蕊王勇屈哲李伟任艳丽
- 关键词:猪葡萄球菌渗出性皮炎
- 禽网状内皮组织增殖病的实验室诊断被引量:6
- 2006年
- 经剖检观察到病鸡脏器上的肿瘤结节,病理组织学检查到心、肝、脾、肺、肾、肠等组织中有大量网状细胞增生。免疫组织化学检测到病变组织中有REV抗原。因此,将组织学病理变化和检测禽网状内皮组织增殖病病毒相结合可以作为实验室快速、准确诊断禽网状内皮组织增殖病的方法。
- 屈哲徐镔蕊王勇睢艳平
- 关键词:网状内皮组织增殖病病毒病理组织学免疫组织化学
- 基于狂犬病病毒重组蛋白的ELISA检测方法的建立及其初步应用
- 目的:原核表达狂犬病病毒的基质蛋白(M),并以此作为包被抗原建立问接ELIsA检测方法,与以狂犬病病毒磷蛋白(P)作为包被抗原建立的间接ELIsA方法进行比较。方法:根据GenBank中公布的狂犬病病毒LEP—Flury...
- 程朝飞宫苗苗王勇田康乐赵占中李刚
- 关键词:狂犬病病毒基质蛋白原核表达
- 检测小反刍兽疫病毒的引物和探针及试剂盒
- 本发明通过对小反刍兽疫N基因测序和比对,提供了用于检测小反刍兽疫的遗传标记物、实时荧光定量PCR引物和探针,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.3,SEQ ID NO.4...
- 史利军金红岩王勇程超飞黄华欣李刚朱鸿飞
- 小反刍兽疫病毒M蛋白主要抗原表位区的原核表达及鉴定被引量:9
- 2013年
- 为了制备小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性单抗及临床抗体水平监测,通过在线软件分析PPRVNigeria75/1株M蛋白可能包含的B细胞线性表位位点,结合可溶性预测,设计1对引物,扩增303bp目的基因。将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,用IPTG诱导表达,纯化,SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定结果显示,所构建的重组蛋白以可溶性形式高效表达并具有良好的反应原性,为制备特异性单抗及包被抗原用于PPRV抗体水平监测奠定了一定基础。
- 黄华欣李刚史利军赵占中王勇金红岩李文超陶春爱隋修锟
- 关键词:小反刍兽疫M蛋白抗原表位原核表达
- 小反刍兽疫病毒M基因截短表达及鉴定
- 2012年
- 目的将小反刍兽疫病毒M蛋白基因截短表达后用于特异性单抗制备及临床抗体水平检测。方法:用在线分析软件BepiPred分析小反刍兽疫病毒M蛋白潜在的B细胞线性表位,以本实验室构建的pCR2.1T-PPRV M质粒为模板,扩增三段截短的M基因,纯化后的PCR产物分别与克隆载体pCR2.1T连接,筛选出的阳性重组质粒经双酶切后,分别与表达载体pET-32a(+)及pGEX-6p-1连接,再将鉴定为阳性的重组质粒转化入E.coli BL21(DE3)菌株诱导表达,并用SDS-PAGE及Western blot验证。结果 PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段。对连接克隆载体及表达载体的重组质粒双酶切后,均出现与预期一致的片段,DNA测序表明,插入片段序列与小反刍兽疫Nigeria75/1株M蛋白基因完全一致。重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,证明所构建的重组蛋白均获得高效表达,并均具有良好的反应原性。结论成功表达了小反刍兽疫截短M基因的蛋白,为制备特异性单抗及小反刍兽疫抗体检测奠定了一定基础。
- 黄华欣李刚王勇金红岩陶春爱程朝飞隋修锟
- 关键词:小反刍兽疫病毒M基因
- 鸡痛风的病理学诊断被引量:3
- 2008年
- 王勇徐镔蕊睢艳平屈哲
- 关键词:病理学诊断鸡痛风发病情况肉种鸡种鸡场发病率
- 慢性铅中毒对鸡血液生化指标的影响被引量:6
- 2009年
- 王勇徐镔蕊李健虞卉睢艳平屈哲
- 关键词:慢性铅中毒血液生化指标植物性饲料动物体内有害金属神经毒性
- 基于狂犬病病毒重组蛋白的ELISA检测方法比较研究
- 2012年
- 原核表达狂犬病病毒的基质蛋白(M),并以此作为包被抗原建立间接ELISA检测方法,与以狂犬病病毒磷蛋白(P)作为包被抗原建立的间接ELISA方法进行比较。根据GenBank中公布的狂犬病病毒LEP-Flury株M基因序列设计特异性引物并引入SmaⅠ和NotⅠ酶切位点,经RT-PCR扩增得到目的基因,连接pCR 2.1载体,构建重组质粒pCR-RV-M,重组质粒用SmaⅠ和NotⅠ进行双酶切,酶切产物定向克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达载体pGEX-RV-M。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,使用IPTG诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析表明蛋白表达量较大,且主要以可溶性的形式表达。亲和层析纯化目的蛋白,Westernblot表明融合蛋白具有良好的反应原性,使用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA方法并检测了95份血清,同时使用带有His标签的重组狂犬病病毒磷蛋白P(RV-His-P)建立的ELISA方法和商品化的ELISA试剂盒检测该血清。结果表明:与商品化的以全病毒作为包被抗原的ELISA检测试剂盒相比,使用重组P蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA检测方法具有更高的符合率,能够代替全病毒作为诊断抗原建立检测方法。
- 程朝飞宫苗苗田康乐王勇赵占中史利军李刚
- 关键词:狂犬病病毒间接ELISA
- 检测小反刍兽疫病毒的引物和探针及试剂盒
- 本发明通过对小反刍兽疫N基因测序和比对,提供了用于检测小反刍兽疫的遗传标记物、实时荧光定量PCR引物和探针,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.3,SEQ ID NO.4...
- 史利军金红岩王勇程超飞黄华欣李刚朱鸿飞
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