王慧梅
- 作品数：4 被引量：28H指数：4
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目国家科技部专项基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 用根癌农杆菌介导获得籼稻转基因植株被引量：4
- 2002年
- 用携带p13W 4质粒的根癌农杆菌EHA10 5感染籼稻龙特甫品种的幼胚愈伤组织 ,经共培养并在潮霉素 2 5～ 5 0mg/L浓度条件下筛选 2～ 3次 ,获得了对潮霉素表现抗性的愈伤组织 ,其愈伤组织转化频率为 2 5 .3% ;将抗性愈伤组织转入分 3化培养基培养形成植株 ,经GUS活性测定和PCR检测 。
- 殷丽青王新其王慧梅沈革志
- 关键词：籼稻根癌农杆菌转基因植株
- 籼稻不同品种的遗传转化和植株再生被引量：7
- 2002年
- 用携带水稻蜡质基因反义 RNA片段的 p1 3 W4质粒的根癌农杆菌 EHA1 0 5 ,分别感染籼稻品种龙特甫 B、协青早B、珍汕 97B和 -3 2 B的幼胚愈伤组织 ,经共培养和在潮霉素 2 5～ 5 0 mg/L浓度下的二次筛选后 ,获得了对潮霉素表现抗性的愈伤组织 ,抗性愈伤组织的频率在 2 0 .1 %～ 2 7.1 %之间 ;抗性愈伤组织经分化培养 ,分化频率在 1 2 .0 %～ 2 1 .2 %。品种间绿菌分化情况存在较大差异 ,龙特甫 B的抗性愈伤组织分化成绿苗的频率为 8.8% ;珍汕 97B的抗性愈伤组织虽能分化 ,但是 ,无法获得绿苗。对转基因植株分别进行了 GUS活性测定和 PCR检测 ,结果显示 :获得的转基因植株 ,92 %的植株GUS检测呈阳性反应 ,并能正常结实 ,在 T1种子的胚乳中也能检测到 GUS染色的分离 ,证明外源基因确已导入这些植株中 ,而且 ,能正常遗传。在抗性愈伤组织的分化中 ,试验了潮霉素对分化的影响 ,结果显示 :不添加潮霉素 ,能明显地提高绿苗频率 ,但转基因植株的可靠性也随之下降。
- 王慧梅殷丽青王新其沈革志
- 关键词：灿稻抗性愈伤组织潮霉素植株再生根癌农杆菌介导
- 提高根癌农杆菌介导水稻遗传转化频率的研究被引量：12
- 2003年
- 以15个籼、粳稻栽培品种作材料,研究了农杆菌转化水稻幼胚愈伤组织频率的一些影响因素。结果表明:NB培养基适用于各种基因型的水稻幼胚培养,愈伤组织与农杆菌共培养时间以3d为宜,而CCS培养基则适合于水稻转化愈伤组织的筛选培养。用羧苄青霉素抑制农杆菌效果优于头孢霉素,其适宜浓度为250～400mg/L,而潮霉素的筛选压以25～50mg/L较为合适。此研究通过优化各种转化因子,已从供试的15个品种中获得了14个品种的水稻转基因植株。
- 殷丽青张建军王慧梅程磊王新其沈革志
- 关键词：水稻农杆菌转基因植株
- 籼稻转反义蜡质基因后代的直链淀粉含量测定和纯系选育被引量：5
- 2004年
- 通过根癌农杆菌介导将反义蜡质基因导入籼型雄性不育保持系龙特甫B中,获得30个PCR检测为阳性的转基因植株,其中,28个为Southern检测阳性。T_1种子直链淀粉含量测定结果表明,有21个转基因植株比龙特甫B明显下降,下降幅度为3%-13%,并在部分转基因植株的种子中观察到蜡质状籽粒;对6个转基因植株进行了不同世代的直链淀粉含量测定,在L3和L5的T_4代中,选择到直链淀粉含量分别为15.9%和8.4%的纯合株系,经凝胶电泳测定,W_x蛋白量明显降低,并与直链淀粉含量下降表现一致。以L3-1-1-1(15.9%)和L5-8-2-1(8.4%)纯合株系为亲本,分别与龙特甫A进行成对杂交和回交,并测定了F_1和B_1F_1种子直链淀粉含量,以L3-1-1-1作亲本的F_1为21.4%,B_1F_1为17.1%;以L5-8-2-1作亲本的F_1为13.6%,B-1F-1为9.3%,结果表明:在不育系的转育过程中,以中低直链淀粉含量的转基因纯合株系为亲本,能有效降低F_1和B_1F_1的种子直链淀粉含量。
- 沈革志王新其殷丽青王慧梅
- 关键词：直链淀粉含量株系反义蜡质基因纯系选育
