王晓玉
- 作品数：11 被引量：41H指数：4
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家科技重大专项四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株的分离鉴定被引量：6
- 2006年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒属动脉炎病毒科动脉炎病毒属,是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一。本研究以出现繁殖障碍的母猪并通过ELISA检测为抗体阳性者的血清为材料,于2000年首次从重庆地区分离出PRRS病毒。母猪血清接种Marc-145单层细胞,经盲传至第四代时出现典型的细胞病变效应(CPE);细胞培养物经电镜观察,发现其中有球形的病毒粒子,粒子大小为40～80nm,核心直径为20～40nm;病毒TCID50为10-4.46/0.05mL;用抗PRRSV特异性抗体能特异地中和病毒,中和指数为100,并将该地方分离株命名为PRRSV-SCQ株。根据Genbank中PRRSV北美洲株ATCCVR-2332的序列设计一对特异性引物,以PRRSV-SCQRNA为模板,通过RT-PCR扩增其GP5基因片段,并将该片段插入克隆载体pMD18-T的EcoRV位点;测序结果表明该GP5基因序列与PRRSV-VR2332、LV株的GP5基因核苷酸序列同源性分别为99.34%和62.14%,GP5蛋白氨基酸推导序列的同源性分别为97.51%和54.37%,揭示SCQ地方分离株与VR2332株在基因型上更为接近,应属于美洲型。
- 颜其贵郭万柱陈斌袁孟伟王晓玉刘菲唐琼陈永舟李林刚费海军勾朝军袁刚建
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型
- 猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)株的构建及生物学特性研究被引量：9
- 2005年
- 采用磷酸钙转染系统,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215株DNA与PP63LacZE2 DNA共转染Vero细胞,获得SA215(A)1、SA215(A)2和SA215(A)3等12个重组病毒株。以光生物素标记的HCV E2基因为探针进行初步鉴定后,挑选SA215(A)1株作BamHI酶切和southern转印杂交鉴定,结果表明构建是成功的,将其命名为SA215(A)。直接荧光抗体检测、SDS-PAGE电泳和western免疫印迹检测结果表明HCV E2基因在重组病毒内获得表达,产生大小约51 ku的囊膜糖蛋白。对SA215(A)株进行部分生物学特性研究,培养特性观察试验表明该毒株可适应Vero、BHK21和鸡胚成纤维细胞等多种细胞,但对不同细胞系表现有一定的差异。SA215(A)株105PFU/mL接种21日龄健康仔猪(伪狂犬病和猪瘟检测阴性),接种后28 d用106PFU的PRV Fa强毒株滴鼻攻毒,42 d用猪瘟SM株血毒1 mL(105MLD/mL)肌肉注射攻击,结果表明接种猪能抵御2次病毒攻击,表明SA215(A)株具有良好免疫原性,是一株优秀的猪瘟、伪狂犬病二价疫苗候选株。
- 徐志文郭万柱朱玲王印王晓玉
- 关键词：重组病毒猪瘟伪狂犬病生物学特性
- 乙型脑炎病毒的分离与鉴定被引量：14
- 2004年
- 通过收集母猪流产死胎和蚊子为病料 ,用乳鼠脑内接毒和细胞接毒相结合的方法盲传并分离出病毒 ,进而采用血凝 (HA)实验、荧光抗体染色技术 (间接法 )、电镜实验、血清学实验及RT -PCR方法对所分离的病毒进行鉴定 ,结果表明所分离的病毒SC株为乙脑病毒 ,其PrM/E的同源性与JEV强毒株SA14相比达 98%。
- 汤德元郭万柱徐志文颜其贵王印王晓玉
- 关键词：乙型脑炎病毒
- 乙脑病毒CN株PrM/E基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2004年
- 通过RT -PCR扩增乙型脑炎病毒CN株主要抗原基因PrM /E ,并将PrM /E基因克隆、测序后 ,与GenbanK发表的JEVSA14 (U14 16 3)基因序列进行比较分析 ,发现CN株与JEVSA14强毒株的同源性为 98%。在JEV基因组 5′端 4 77～ 2 4 77的长 2 0 0 0nt的决定JEV抗原性的PrM /E区中 ,CN株与SA14株有 4 0个碱基不同 ,其中 2 8个碱基突变为同义突变 ,另外 12个为错义突变 ,导致相应的氨基酸序列 (6 6 6个 )中的 4个氨基酸发生了突变 ,其中有 2个氨基酸出现在含有关键的抗原决定簇的E蛋白内 。
- 汤德元郭万柱徐志文颜其贵王印王晓玉
- 关键词：日本乙型脑炎病毒核酸序列
- “兔瘟”、巴氏杆菌病二联苗的研究被引量：1
- 1990年
- “兔瘟”、巴氏杆菌病二联苗的免疫期,“兔瘟”达10个月以上,巴氏杆菌病达半年,安全性良好;40日龄皮下注射2ml,10天后产生坚强免疫力;二联苗12℃保存期为10个月。
- 余广海蒋元林曾纪达张跃明郭万柱王仲基贾珉冯炳芳王晓玉
- 关键词：兔瘟二联苗
- PRRSV-SCQ株结构蛋白基因核酸序列分析及其氨基酸序列推导被引量：2
- 2006年
- 以重庆分离病毒株PRRSV-SCQ构建的包含SCQ株ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7 6个结构蛋白基因的cDNA文库质粒pRSF2、pRSF3、pRSF4、pRSF5、pRSF6和pRSF7为基础材料,通过Sanger′s双脱氧末端终止法进行核酸序列分析。测序结果表明,文库质粒DNA中分别含有PRRSV-SCQ株中为结构蛋白编码的阅读框ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7的完全序列,其起始密码子均为ATG,终止密码子分别为TGA、TAG、TGA、TAG、TAA和TGA。阅读框ORF2的cDNA片段长度为721 bp,ORF3的cDNA片段长度为764 bp,ORF4的cDNA片段长度为547 bp,ORF5的cDNA片段长度为621 bp,ORF6的cDNA片段长度为509 bp,ORF7的cDNA片段长度为436 bp。推导的蛋白质序列中,GP2、GP3、GP4、GP5、M和N蛋白的氨基酸数量分别为258,254,178,200,174 aa和123aa。每条多肽链都以甲硫氨酸为起始氨基酸。
- 颜其贵郭万柱欧洋张焕容袁孟伟王晓玉樊汶樵赖维莉张传斌
- 关键词：结构基因氨基酸
- 猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)株的构建及生物学特性研究
- 采用磷酸钙转染系统,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215株DNA与PP63LacZE2 DNA共转染Vero细胞,获得SA215(A)1、SA215(A)2和SA215(A)3等12个重组病毒株。以光生物素标记的HCV E...
- 徐志文郭万柱朱玲王印王晓玉
- 关键词：猪瘟伪狂犬病重组疫苗
- 商品肉鸭粪链球菌的分离鉴定被引量：3
- 1997年
- 从四川某商品肉鸭场病鸭中分离到链球菌，通过细菌形态和培养特性观察、生理生化鉴定、药敏实验、动物感染实验，确诊为粪链球菌引起的鸭链球菌病。
- 蒋文灿陈一资王晓玉
- 关键词：鸭病粪链球菌链球菌病
- 荣昌猪白细胞介素-8基因cDNA的克隆及序列分析
- 2007年
- 从体外ConA刺激20 h的荣昌猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增,pMD18-T载体连接,常规转化后,进行酶切及序列测定,并进行鉴定。结果显示:猪IL-8基因与人、猕猴、牛、绵羊和家犬基因序列的同源性分别为81.3%、80.4%、88.9%、88.2%和85.3%。
- 李雯郭万柱陈弟诗王晓玉
- 关键词：荣昌猪白细胞介素-8克隆
- 猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)疫苗株的构建(初报)被引量：5
- 2004年
- 采用磷酸钙转染系统 ,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA2 15株DNA与PP6 3LacZE2DNA共转染Vero细胞 ,获得SA2 15 (A) 1、SA2 15 (A) 2和SA2 15 (A) 3等 12个重组病毒株。以光生物素标记的HCVE2基因为探针进行初步鉴定后 ,挑选SA2 15 (A) 1株作BamHⅠ酶切和southern转印杂交鉴定 ,结果表明构建是成功的 ,将其命名为SA2 15(A)。直接荧光抗体检测、SDS -PAGE电泳和western免疫印迹检测结果表明HCVE2基因在重组病毒内获得表达 ,产生大小约 5 1kd的蛋白。对SA2 15 (A)株进行部分生物学特性研究 ,培养特性观察试验表明该毒株可适应Vero、BHK2 1和鸡胚成纤维细胞等多种细胞 ,但对不同细胞系表现有一定的差异。
- 徐志文郭万柱朱玲王晓玉
- 关键词：猪瘟伪狂犬病重组疫苗
