王艳 作品数:108 被引量:427 H指数:10 供职机构: 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家重点实验室开放基金 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 艺术 政治法律 更多>>
一种采用多重内引物进行恒温扩增核酸的方法及应用 本发明公开了一种恒温扩增核酸的方法及应用,所述方法对传统LAMP扩增原理进行改进,包括六条核心引物,四条为内引物,命名为FIP1,FIP2,BIP1和BIP2;两条为外引物,命名为F3和B3,另外的四条环引物加入到反应体... 叶长芸 王毅 王艳文献传递 限制性内切酶介导的依赖于PCR扩增的实时核酸检测技术 本发明公开了一种聚合酶链扩增方法,在所述方法中,在用于扩增的上游引物或下游引物的5’端添加一种限制性内切酶序列,在所述引物的5`端标记荧光基团,在引物的中间位置标记能够特异性地猝灭5`端所述荧光基团的猝灭基团,在所述聚合... 叶长芸 王毅 王艳文献传递 呼吸道感染患者奈瑟菌属致病性相关基因的检测 2012年 目的检测呼吸道感染患者分离奈瑟菌属的致病性相关基因,探讨非淋病奈瑟菌、非脑膜炎奈瑟菌的致病性。方法采用PCR扩增和序列分析技术,对慢性呼吸道感染患者下呼吸道分离奈瑟菌属致病性相关基因orf1与nspA进行检测。结果从呼吸道感染患者标本分离的230株奈瑟菌属,orf1基因阳性35株,序列比对与淋病奈瑟菌TCDC-NG08107 orf1序列同源性达95.0%~99.0%;nspA无阳性反应。结论人体上呼吸道正常菌群奈瑟菌属缺乏nspA基因,少数菌株可具有淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌致病性相关基因orf1。 罗振华 王和 易旭 佘晓玲 王涛 王艳 叶长芸关键词:奈瑟菌属 淋病 致病基因 聚集性事件中分离的生化不典型宋内志贺菌的鉴定及研究 2012年 宋内志贺菌为志贺菌属4个菌群之一,只有1个血清型,典型菌株的生化特点与其他3个菌群明显不同。当菌落发生光滑型变异为粗糙型(S—R变异)时,常伴有生化反应、抗原结构和致病性的变异^[1]。2011年,马鞍山市从一起聚集性病例标本中共分离到9株生化不典型的宋内志贺菌, 陈道利 金东 沈荣柴 程险峰 夏燕 陈谨 陶勇 王利 王艳 孙强正 景怀琦关键词:宋内志贺菌 聚集性病例 生化特点 志贺菌属 抗原结构 一种李斯特菌增菌培养基及制备方法 本发明公开了一种用于致病性李斯特菌选择性分离的培养基,所述培养基除基础组分胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钠外,还含有β‑D‑阿洛糖,更为优选地,所述培养基还含有盐酸吖啶黄、萘啶酮酸和氯化锂。与传统的增菌培养... 叶长芸 刘东鑫 王艳文献传递 食物中毒鸭沙门菌的生物学特性及分子分型研究 被引量:1 2013年 目的对一起食物中毒分离的鸭沙门菌进行生物学特性和分子分型研究。方法菌株分离、生化鉴定和血清型确定参照GB/T4789.4-2010方法进行,用VITEK-32全自动微生物鉴定系统检测菌株药物敏感性,鲎试验检测内毒素、PCR检测沙门菌侵袭相关基因invA和invE,用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)方法进行分子分型。结果 11份样品检出8株肠炎沙门菌;其中5株菌内毒素为阳性;所有菌株均携带侵袭相关基因invA和invE;该次食物中毒样品中分离得到的8株鸭沙门菌PFGE图谱完全相同,但有别于其它地区分离的鸭沙门菌。结论 PFGE可有效用于沙门菌食物中毒细菌同源性的分析。本次食物中毒有相同的鸭沙门菌克隆系来源。 汪永禄 沈荣柴 王多春 陶勇 王利 王艳 刘力彰 娄静 闫梅英 阚飙关键词:食物中毒 脉冲场凝胶电泳 分子分型 多交叉恒温扩增结合金纳米生物传感检测志贺菌的方法 本发明公开了一种多交叉恒温扩增结合金纳米生物传感检测志贺菌的方法,所述方法在多交叉置换恒温扩增中的交叉引物CP1或CP2的5’端标记半抗原,D1或D2的5’端标记生物素,所述方法针对志贺菌ipaH的多交叉置换恒温扩增产物... 叶长芸 王毅 王艳文献传递 一组核苷酸序列及在伊氏李斯特菌鉴定中的应用 本发明公开了一种核苷酸序列组合,由SEQ ID NO:1-6组成。所述组合中的核苷酸序列分别作为环介导恒温扩增技术中的外引物、内引物和环引物用于伊氏李斯特菌的鉴定方法。与普通PCR和Real-time PCR检测方法相比... 王毅 叶长芸 王艳马鞍山市食品中单核细胞增生李斯特菌污染调查及分子生物学特征 被引量:4 2010年 单核细胞增生李斯特菌(listerial monocytogenes,LM)在自然界分布广泛,主要以家畜、家禽为宿主,可引起人和动物脑膜炎、败血症、流产等症状,是人畜共患病的致病菌,病死率达20%~30%.近30年来,国外多次报道由LM引发的食物中毒事件.目前,国内虽没有LM引起食物中毒暴发的相关报道,但食品监测显示食品中LM污染情况较为严峻,同时我周也曾报道多起由该菌引起临床感染的病例报告。 汪永禄 王艳 郑锦绣 詹圣伟 金东 叶长芸 刘燕 陶勇 石志峰 王利关键词:单核细胞增生李斯特菌 食品监测 分子生物学特征 污染调查 食物中毒事件 污染情况 多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价 被引量:2 2018年 目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。 李慧 王毅 王艳 李华 陈峥宏 叶长芸关键词:单增李斯特菌