王艳
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 供职机构：东北师范大学生命科学学院遗传与细胞研究所更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 糖皮质激素诱导绿色荧光蛋白在烟草中的表达被引量：4
- 2008年
- 糖皮质激素诱导体系具有操作简单、化学物质稳定、可控性好等显著优点,被认为是最有应用潜力的化学诱导体系。利用农杆菌介导方法,将携带诱导表达元件的双元载体pIndex3-NTR-mgfp5转入野生型烟草,转录因子GVG的基因由35S组成型启动子控制表达,绿色荧光蛋白基因mgfp5作为诱导表达的目的基因在诱导启动子的控制下表达。结果表明:绿色荧光蛋白的转录受到诱导剂的严格调控。同时发现,浸根诱导法对基因表达的调控首先表现在新生叶片上,在老叶片中则相对滞后。此外,在质粒构建过程中,在mgfp5基因两端分别加上马铃薯X病毒(PVX)的非翻译区序列5NTR和3NTR,结果非翻译区序列并未抑制绿色荧光蛋白的表达。在建立的糖皮质激素诱导表达体系中,GVG系统对诱导剂具有很高的专一性,并且对基因表达的控制非常严格,几乎没有本底表达,可以从时间、空间及数量上对目的基因进行精确调控。这一体系的建立为今后利用化学诱导的方法进行理论和应用研究奠定了基础。
- 王俊杰宋晔华范亚军王艳孙少广许多朱筱娟王兴智
- 关键词：地塞米松绿色荧光蛋白非翻译区
- 番茄茄红素β-环化酶基因高效沉默载体构建被引量：12
- 2007年
- 番茄茄红素是番茄果实中含量最多的一种类胡萝卜素,也是植物类胡萝卜素代谢过程中的一个重要中间产物。它的环化是在茄红素β-环化酶(Lyc-b)和茄红素ε-环化酶(Lyc-e)催化下完成的,其中茄红素β-环化酶在番茄茄红素转变为β-胡萝卜素的过程中起主要作用。我们利用RT-PCR方法从番茄叶片中克隆出Lyc-b基因,将PCR产物与pGEM-T载体连接后进行测序,扩增的DNA序列与发表的茄红素β-环化酶序列一致。以此为模板,克隆了400bp左右的目的片段,利用Gateway系统构建Lyc-b基因目的片段的pJawoh18-2b ihpRNA表达载体。经PCR与酶切鉴定的阳性克隆转化农杆菌LBA1100,利用农杆菌叶盘法转化番茄获得了抗性愈伤及再生苗,以检测ihpRNA沉默载体能否降低茄红素β-环化酶基因表达,并为进一步了解该基因在番茄类胡萝卜素代谢过程中的作用奠定基础。这些数据未在本文列出。
- 杨美英贺红霞王艳高倩倩付雷朱筱娟
- 关键词：基因沉默
