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田义

作品数:81 被引量:492H指数:11
供职机构:沈阳农业大学更多>>
发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生理学更多>>

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81 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
一种苹果属植物叶片全蛋白提取方法
一种苹果属植物叶片全蛋白提取方法,具体为:采摘幼嫩叶片,无菌水清洗后快速风干,准确称取2克,用液氮在研钵中迅速研磨成精细粉末;加入4ml的匀浆缓冲液,4℃下涡旋振荡10分钟;匀浆液中加入等体积的Tris-饱和酚,涡旋摇荡...
张彩霞丛佩华张利义康国栋田义王强杨玲
文献传递
苹果LysM基因家族的生物信息学及表达分析被引量:11
2014年
【目的】在苹果全基因组中鉴定LysM,通过基因聚类分析、染色体定位、结构分析以及组织表达分析,为苹果LysM的功能研究和利用奠定基础。【方法】利用已公布的苹果基因组数据库GDR和FEM-IASMA,鉴定苹果LysM基因家族成员,并对其进行编号。MdLysM蛋白氨基酸序列的基本信息通过ExPASy Proteomics Server进行预测,亚细胞定位的预测利用WoLF PSORT进行。采用MEGA5软件构建了进化树。应用Plaza程序绘制基因结构,染色体定位信息取自GMDO,鉴定出的39个基因的染色体定位作图使用MapInspector完成;另外,通过实时荧光定量RT-PCR对各基因的组织表达特性进行分析,差异显著性分析通过SPSS完成。【结果】系统地鉴定了39个苹果LysM家族成员。这39个MdLysM蛋白包含241至1 119个不等的氨基酸残基,等电点分布在4.70—9.60范围内。亚细胞定位结果表明,苹果LysM蛋白在细胞核、细胞质、叶绿体、液泡、胞外基质中均有分布。根据聚类分析可将这些基因分为A、B和C 3组,且A组又可进一步被分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3个亚族,说明它们的功能可能已经发生了分化。MdLysM蛋白结构域的预测结果及基因结构分析结果均与进化树聚类结果吻合。染色体定位表明,MdLysM分布在苹果17条染色体中的13条上,且此家族的基因在13条染色体上的分布为非均匀的,其中以4号染色体上分布最多,达到了9个,而1、5、7和8号染色体上则未见分布。在苹果LysM家族中鉴定出了10对和1组旁系同源基因,MdLysM基因间存在串联重复和片段重复,它们是苹果LysM家族扩张的主要动力。对39个基因在根、茎、叶、花、果5个组织器官中的实时荧光定量RT-PCR结果显示,5个器官中均能检测到MdLysM的表达,这些基因的组织表达模式具有多样性,表明它们在不同组织中可能扮演不同的角色。【结论】苹果LysM基因家族拥有39个成员,进化上可分为3组,基因结构的复
周喆张彩霞张利义王强李武兴田义丛佩华
关键词:苹果系统发育分析
苹果抗病相关基因MdTGA2.1、MdAP2D4与MdAP2D19的克隆与分析
植物在与病原菌漫长的协同进化过程中形成了极为复杂的免疫机制,使其能够针对病原菌类型而激活相应的抗病反应。其中,对抗活体、半活体寄生菌主要依赖于激活水杨酸信号转导途径,而抵御腐生寄生菌则主要依赖于激活茉莉酸/乙烯信号转导途...
田义
关键词:苹果转录因子基因表达
文献传递
两个苹果乙烯反应因子MdAP2D4与MdAP2D19的序列分析及原核表达被引量:2
2013年
【目的】克隆苹果中的两个ERF(ethylene responsive factor)转录因子,对其序列与表达进行分析;并进一步构建原核表达载体,在大肠杆菌中诱导融合蛋白表达,为解析两基因的抗病功能及作用机制奠定基础。【方法】首先,将抑制性消减杂交筛选到的EST序列进行BLAST比对,根据比对获得的MdAP2D4与MdAP2D19的cDNA序列设计引物进行克隆;然后,利用MEGA4.1软件将两个ERF蛋白与拟南芥的AP2家族蛋白进行聚类分析,对保守的AP2功能域的氨基酸序列进行分析;并进一步利用RT-PCR检测两基因对外源MeJA的响应;最后,将两个基因分别连接到原核表达载体PGEX-4T-1上,利用IPTG对转化的大肠杆菌BL21进行诱导。【结果】MdAP2D4与MdAP2D19两个基因均与拟南芥B3组ERF亲缘关系最近,在叶片中表达较高,都能被外源的MeJA诱导表达。SDS-PAGE检测结果表明,两个基因的融合蛋白均能够被IPTG诱导表达。【结论】MdAP2D4与MdAP2D19为B3组ERF转录因子,外源MeJA能够诱导其表达。
田义陈可钦安秀红郝红梅刘志丛佩华郝玉金
关键词:抑制性消减杂交茉莉酸甲酯原核表达抗病性
苹果叶片应答斑点落叶病菌胁迫的蛋白质组学分析被引量:6
2014年
苹果斑点落叶病(Apple Alternaria Blotch)又称褐纹病,是目前我国苹果主产区的主要病害之一。病原菌是植物发病的主要生物胁迫因子。目前,植物寄主应答病原真菌胁迫的蛋白质组学研究在拟南芥、水稻等模式植物中已广泛展开。
张彩霞张彩霞田义张利义康国栋田义王强陈莹李武兴
关键词:苹果斑点落叶病蛋白质组学胁迫因子苹果叶片学分
尼泊尔低成本滴灌、传统滴灌与人工灌溉效果的比较
2004年
尼泊尔为了在雨养农业区推广低成本滴灌 ,在JhikhuKhole流域进行了低成本滴灌、传统滴灌和人工灌溉效果的比较。试验中每种灌溉方法设 3个处理 ,各处理间的差异用作物的土壤含水量、作物的生物指标、水分的利用效率以及经济效益来体现。结果表明 ,低成本滴灌和人工灌溉是水资源匮乏、小规模的农业生产地区提高粮食产量行之有效的方法 ,其中低成本滴灌是获得长期经济利益和劳动效益最适宜的方法。
田义黄毅魏忠平
关键词:土壤含水量灌溉方式作物产量
苹果属植物寄主应答病原菌胁迫的蛋白质组学研究进展
2015年
苹果基因组研究的不断深入,为苹果属植物蛋白质组学研究奠定了基础。近年来,蛋白质组学分析方法在探讨苹果属植物应答病原菌胁迫时,所启动的抗病相关蛋白的差异表达,以及相关抗病机制方面发挥了重要作用。本文针对近年来蛋白质组学研究技术在果树上的应用,综述了苹果属植物应答火疫病、褐斑病、黑星病等主要病害胁迫的蛋白质组学研究进展,分析了蛋白质组学分析技术在苹果属植物相关研究中存在的问题,以期为进一步探究苹果属植物抗病的分子机制提供参考。
张彩霞田义张利义肖龙宋成秀丛佩华
关键词:苹果病原菌蛋白质组学
苹果蛋白质提取方法及相关的蛋白质提取液
本发明公开了苹果蛋白质提取方法及相关的蛋白质提取液。本发明公开的蛋白质提取方法,包括:破碎植物组织和/或器官,加入蛋白质提取液在0‑6℃下反应3‑7分钟,除去杂质,得到蛋白质;蛋白质提取液,溶剂为水,溶质及其浓度分别为:...
张彩霞田义张利义丛佩华
文献传递
基于iTRAQ定量蛋白质组技术筛选‘华月’苹果斑点落叶病抗性相关蛋白被引量:4
2018年
为了探讨苹果叶片抗病相关蛋白的表达特性,进一步解析苹果叶片自身防御反应分子机制,本文以抗病苹果品种‘华月’为试材,采用iTRAQ定量蛋白质组技术分析苹果链格孢菌处理前后,苹果叶片总蛋白差异表达情况。结果表明,与无菌水处理的叶片相比,病原菌接种后的叶片共筛选到433个差异表达蛋白,聚类分析结果较好,其中257个蛋白显著上调,176个蛋白显著下调。进一步开展差异蛋白筛选及功能分析,筛选后的53个蛋白依据功能可划分为7类,分别为代谢过程相关,防御或逆境应答反应相关,蛋白质代谢过程相关,细胞分裂相关,细胞壁修饰相关,细胞过程相关及其他功能未知蛋白。代谢通路分析表明,KEGG共富集到7个结果,64个蛋白在7条通路中得到注释,且这些蛋白对这7条信号通路均具有显著影响(P<0.05)。亚细胞定位分析结果表明,共49个蛋白得到成功定位,其中35个蛋白定位于叶绿体,表明叶片细胞中大量的叶绿体蛋白参与了病原菌胁迫应答反应。其他蛋白中,7个定位于细胞质,3个定位于细胞质膜,其余4个分别定位于细胞壁、胞外、过氧化物酶体及内质网。除了防御或逆境反应相关蛋白,光合作用及其他代谢相关蛋白也参与了苹果叶片细胞的防御反应。病程相关的PR类蛋白中包括3个过氧化物酶类蛋白(PR-9)、1个类甜蛋白(PR-5)及1个MLP样蛋白(PR-10),过敏反应相关的MLP样蛋白在果树应答逆境胁迫的研究中的报道较少,MLP蛋白的差异表达可能也与苹果叶片的防御反应相关。本研究进一步证实了苹果叶片应答链格孢菌胁迫的抗性相关蛋白中,PR类蛋白的差异表达可能是影响苹果叶片细胞抗病反应的关键因子,研究结果为进一步解析果树抗病分子机制提供了参考。
张彩霞张彩霞韩晓蕾田义韩晓蕾丛佩华
关键词:苹果抗病蛋白功能
追肥方式对温室滴灌番茄产量和水分利用效率的影响被引量:8
2005年
通过2年的温室小区番茄栽培试验,研究了覆膜滴灌条件下滴灌追肥和刨穴追肥对番茄土壤水分利用率和产量的影响。结果表明,不同追肥方式对番茄产量有较大影响,滴灌追肥可以显著地增加番茄产量、提高水分利用效率。并从田间土壤水分时空变化、土壤养分有效性方面分析了引起差异的可能原因。
虞娜张玉龙邹洪涛黄毅田义张辉
关键词:水分利用效率追肥方式番茄温室滴灌土壤水分利用率养分有效性
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