田亚坤 作品数:17 被引量:64 H指数:5 供职机构: 首都医科大学附属北京佑安医院感染中心 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
HIV感染者T淋巴细胞亚群增殖、活化与疾病进展的相关性研究 目的探讨慢性未治疗HIV/AIDS患者T淋巴细胞及其亚群增殖、活化与疾病进展的相关性。方法以16例健康人及49例慢性未治疗的HIV/AIDS患者为研究对象,HIV/AIDS患者根据CD4细胞计数 曹振环 李海英 彭巧丽 田亚坤 师令娴 陈新月关键词:疾病进展 感染者 HIV 淋巴细胞亚群 CFSE标记人T细胞亚群增殖反应及其在病毒感染性疾病中的应用 2008年 目的探讨应用流式细胞术和活体染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记人T细胞亚群增殖反应的方法学及其在病毒感染性疾病中的应用价值。方法用不同浓度的CFSE标记新鲜分离的人外周血单个核细胞(PBMC),分为未刺激组及刺激组。未刺激组加入CD28,刺激组加入CD28及不同浓度PHA,将细胞培养5~7d后进行染色,采用流式细胞仪检测,观察CFSE、PHA标记的最佳浓度及最佳培养时间,采用CellQuest软件及ModFit软件分析T淋巴细胞各亚群的增殖情况,并对两种分析方法进行比较,在上述最佳实验条件下,采用相同的实验方法分析CMV-pp65肽刺激CMV-IgG(+)HLA-A2(+)者外周血单个核细胞(PBMC)后T细胞亚群增殖情况;结果CFSE标记人外周血单个核细胞(PBMC)的最佳浓度是0.5μmol/L,PHA的最佳刺激浓度为2μg/ml,在此浓度下,最佳培养时间为6d,PHA刺激培养6d后T细胞各亚群出现典型的增殖不同步现象,经CMV-pp65肽刺激后CD8+T细胞出现明显的增殖反应,采用CellQuest及ModFit软件联合分析,可实现淋巴细胞增殖分析的可视化及数量化。结论CFSE染色结合荧光抗体标记和流式细胞术是分析淋巴细胞增殖的有力工具,可以有效检测出病毒抗原刺激后T淋巴细胞各亚群的增殖反应及增殖动力学,在探讨病毒感染性疾病的发病机制中具有重要价值。 彭巧丽 李海英 曹振环 田亚坤 陈新月 吴昊 计云霞关键词:T淋巴细胞 CFSE 增殖反应 Alu-反向PCR检测HIV-1整合位点方法的建立 被引量:1 2010年 目的建立Alu-反向PCR检测整合型HIV-1DNA的实验方法。方法收集18例HIV-1感染者及12例健康者的抗凝血标本,根据整合型HIV-1DNA的特点设计引物,第一轮PCR5’端引物来自于人类保守的Alu序列,3’端引物来自于HIV-1gag序列,扩增片段包含了整合位点上游的人类基因组DNA序列和整合的HIV-1DNA序列。经PstⅠ酶切后进行自身片段环化,以此为模板设计针对HIV-1LTR和gag保守区域引物,进行巢式PCR。结果 16例HIV-1感染者成功扩增出目的片段,12例健康者均为阴性。结论本实验建立的检测整合型HIV-1的方法为进一步研究HIV病毒储藏库机制提供了参考。 田亚坤 李侗曾 焦艳梅 李娟 画伟 吴昊关键词:HIV-1 反向PCR HBV感染自然史研究进展 被引量:9 2009年 病毒复制与宿主免疫之间的动态平衡在HBV感染自然史进展和发病机制中起重要作用。多数免疫能力正常的成人感染HBV后呈自限性,而在婴幼儿则多发展成为慢性HBV感染。慢性HBV感染分为4期:免疫耐受期、HBeAg阳性慢性肝炎期、非复制的HBsAg携带期和HBeAg阴性慢性肝炎期。HBV DNA水平、HBeAg的状态以及ALT水平可以预测HBV感染的长期结局如肝硬化或肝细胞癌。本文对HBV感染自然史分期、慢性HBV感染的结局和预后进行了综述。 柳雅立 田亚坤',孙文锦.,陈新月"" 田亚坤 孙文锦 陈新月关键词:HBV感染 自然史 以纯化的CD4+T细胞DNA扩增HIV-1包膜区全长基因方法的建立 用PCR的方法直接从临床样本扩增人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的全长包膜区基因是非常困难的。本文介绍了一种与其他方法比较相对敏感的从纯化CD4+T细胞中扩增HIV-1全长包膜区基因 田亚坤 焦艳梅 李娟 画伟 吴昊关键词:HIV-1 全长基因 CD4+T 文献传递 人类免疫缺陷病毒感染者T淋巴细胞亚群增殖、活化与疾病进展的相关性 被引量:3 2009年 目的探讨慢性未治疗HIV/AIDS患者T淋巴细胞增殖活化与疾病进展的相关性。方法以16例健康人及49例慢性未治疗的HIV/AIDS患者为研究对象,HIV/AIDS患者根据CD4^+T淋巴细胞计数分为CD4^+T淋巴细胞〈200×10^6/L组、(200350)×10^6/L组、〉350×10^6/L组。分离患者外周血单个核细胞(PBMC),Ki-67标记细胞增殖,CD38标记细胞活化,流式细胞仪检测各项指标。数据采用单因素方差分析。结果CD4^+T淋巴细胞〈200×10^6/L组Ki-67^+CD4^+T淋巴细胞比例为7.92%±4.37%,高于健康对照组的0.39%±0.24%、(200~350)×10^6/L组的2.61%±2.12%和〉350×10^6/L组的2.65%±2.13%,差异均有统计学意义(F=21.961,P〈0.01);CD4^+T淋巴细胞〈200×10^6/L组Ki-67^+CD8^+T淋巴细胞比例为2.87%±1.13%,高于健康对照组的0.15%士0.90%、(200-350)×10^6/L组的1.40%士1.17%和〉350×10^6/L组的1.22%±0.80%,差异均有统计学意义(F=19.203,P〈0.01)。且Ki-67^+CD4^+和Ki-67^+CD8^+T淋巴细胞比例与CD4^+T淋巴细胞计数呈负相关(r=-0.654,r=-0.539;均P〈0.01),而与病毒载量无关。CD4^+T淋巴细胞〈200×10^6/L组CD38^+CD4^+、CD38^+CD8^+T淋巴细胞比例分别为44.14%±20.65%和50.64%±21.08%,健康对照组为10.22%±3.98%和6.46%±3.99%,(200-350)×10^6/L组为16.03%±10.20%和19.33%±13.43%,〉350×10^6/L组为13.69%土10.70%和16.98%±15.75%(F=14.333,F=15,412;均P〈0.01),且CD4^+和CD8^+T淋巴细胞Ki-67的表达程度与CD38呈正相关(r=0.527,r=0.391;均P=0.002)。结论随着慢性HIV/AIDS疾病的进展,T淋巴细胞的增殖与活化均显著增高,T淋巴细胞活化可能是免疫持续激活的结果。 曹振环 李海英 马丽娜 彭巧丽 田亚坤 师令娴 金怡 何智敏 耿楠 陈新月关键词:HIV-1 T淋巴细胞亚群 细胞分裂 淋巴细胞活化 慢性HIV/AIDS患者T淋巴细胞凋亡与疾病进展关系的研究 被引量:1 2009年 目的探讨慢性未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者T淋巴细胞及各亚群凋亡与疾病进展的相关性。方法以36例慢性未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者为研究对象,根据CIM细胞计数分为3组:〈200个/μl组,200~350个/μl组,〉350个/μl组,同时选取16例健康志愿者作对照,分离外周血单核细胞(PBMC)后,采用C1M5RO及CD27标记T细胞亚群,AnnexinV标记细胞凋产,用流式细胞仪检测各项指标。其中4例患者及4例健康志愿者的PBMC在体外培养,比较分析体外培养0、3、6、12、24h不同时间点T细胞凋亡的变化情况。结果(1)HIV/AIDS患者CD4^+、CD8^+T细胞及各亚群上AnnexinV表达百分比均显著高于健康人(P〈0.05),但3组患者之间比较差异无统计学意义(P〉0.05);(2)HIV/AIDS患者CD4^+、CD8^+T细胞及各亚群上AnnexinV表达百分比与CD4^+T细胞计数及病毒载量均无显著相关性(P〉0.05);(3)随着体外细胞培养时间的延长,HIV/AIDS患者CD4^+T细胞的凋亡及死亡细胞百分比均显著高于健康人(P〈0.05),并且HIV/A1DS患者CD4^+T细胞较CD8^+T细胞更易发生凋亡和死亡。结论HIV/AIDS患者的T细胞凋亡水平显著高于健康人,并且CD4^+T细胞较CD8^+T细胞更易发生凋亡和死亡,但是T细胞凋亡水平与HIV的疾病进展程度并没有相关性。 彭巧丽 李海英 田亚坤 曹振环 张彤 陈新月 吴昊关键词:HIV-1 T淋巴细胞 细胞凋亡 2016版美国《成人和青少年HIV感染者机会性感染防治指南》中巨细胞病毒病的解读 被引量:9 2017年 巨细胞病毒(CMV)是一种常见的人类疱疹病毒,通常为无症状感染,但对于获得性免疫缺陷综合征患者CMV感染可引起明显器质性损害,尤其是CD4细胞计数极低者。CMV病的诊断困难,通常需要根据器官受累表现、机体免疫情况及特殊检查,如眼底及内镜检查等。本文将阐述人类免疫缺陷病毒患者相关的CMV病的流行病学、诊断、治疗等方面,希望给临床医师提供参考。 赖曼 张玉林 田亚坤 画伟 吴昊 郭彩萍关键词:人类免疫缺陷病毒-1 巨细胞病毒 共感染 HIV感染者并发鸟-胞内复合分枝杆菌感染的防治进展 被引量:2 2010年 艾滋病(AIDS)发展至艾滋病期可以出现多种机会性感染,鸟-胞内分枝杆菌是播散性细菌性感染的常见原因。自从高效抗反转录病毒治疗(HAART)应用以来,鸟-胞内分枝杆菌的发生率有了实质性的减少,但是对于CD4细胞计数较低的病人仍然有一定的风险。该文就近些年来AIDS病人并发鸟-胞内复合分枝杆菌感染的流行病学、临床表现、治疗和预防进展进行综述。 田亚坤 焦艳梅 吴昊关键词:艾滋病 2016版美国《成人和青少年人类免疫缺陷病毒感染者机会性感染防治指南》结核病部分解读 被引量:6 2016年 结核分枝杆菌感染所致的结核病是 HIV 感染者重要和常见的机会性感染(opportunistic infections,OI)之一。首先,由于结核病(主要肺结核)具有传染性,对其及时、正确的诊断和合理、有效的治疗与管理比其他 OI 显得更为重要;其次,由于 HIV感染者细胞免疫功能缺陷,结核病肉芽肿不易形成,使得结核病的临床表现不典型,易于误诊和漏诊;再次,抗结核病治疗药物与联合抗反转录病毒治疗(combined antiretroviral therapy,cART)药物之间存在相互作用,给结核病的治疗带来一定的困难。 张玉林 田亚坤 吴昊 郭彩萍关键词:抗结核病 机会性感染 病毒感染者 人类免疫缺陷 抗反转录病毒治疗 青少年