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9．1C3单克隆抗体轻、重链可变区基因克隆及序列分析被引量：3: 1996年; ９．１Ｃ３分子是一种参与ＮＫ、巨噬细胞及ＬＡＫ细胞杀伤过程的重要细胞表面分子，主要表达于外周血单个核细胞表面。本文运用分子生物学技术，从分泌９．１Ｃ３ＭＣＡｂ的杂交瘤细胞中提取总ＲＮＡ，经反转录、ＰＣＲ分另１１分离了９．１Ｃ３ＭｃＡｂ轻链可变区（ＶＬ）基因及重链可变区（ＶＨ）基因，并用全自动荧光ＤＮＡ序列分析仪对９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因序列进行了分析。结果表明：９．１Ｃ３ＶＨ基因为３５１ｂＰ，编码１１７ａａ残基，９．１３ＶＬ为３２４ｂＰ，编码１０８ａａ残基；从推导出的氨基酸序列分析证实９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ序列均符合小鼠ｌｇ可变区的氨基酸序列特征；根据Ｋａｂｂａｔ分类体系，９．１Ｃ３ＶＨ隶属Ｉｇ重链第Ⅱ（Ｃ）亚组，９．１Ｃ３ＶＬ隶属小鼠ＩｇＫ链第Ⅴ亚组。９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因的克隆成功为其单链抗体的构建、表达奠定了良好的物质基础。; 夏海滨金伯泉田方张新海张建平; 关键词：抗体单克隆可变区基因克隆

抗人黑素瘤双特异性抗体增强LAK细胞毒效应的实验研究: 1995年; 抗肿瘤单克隆抗体的高度特异性与杀伤细胞对肿瘤的细胞毒效应相互结合起来，是增强ＬＡＫ细胞抗肿瘤作用的重要途径。本研究用化学连接法制备了既可识别淋巴细胞表面ＣＤ３抗原又可识别ＬｉＢｒ黑素瘤细胞表面肿瘤相关抗原的双特异性抗体ＣＤ３－ＨＢ８７５９。ＦＡＣＳ分析证实，ＣＤ３－ＨＢ８７５９具有结合两种抗原的活性。４ｈ５１Ｃｒ释放细胞毒实验结果表明，ＣＤ３－ＨＢ８７５９在诱导相可显著增强ＬＡＫ对ＬｉＢｒ细胞的细胞毒效应，也能使非ＬＡＫ细胞获得细胞毒性；在杀伤相加入ＣＤ３－ＨＢ８７５９对ＬＡＫ细胞的细胞毒作用也具有促进作用。上述结果表明，ＣＤ３－ＨＢ８７５９是一种抗人黑素瘤的双特异性抗体，为体内应用提供了良好的实验基础。; 田方金伯泉刘雪松; 关键词：黑素瘤 LAK细胞免疫导向

9．1C3单克隆抗体可溶性单链抗体基因的表达及其初步鉴定: 1996年; 用噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ构建含９．１Ｃ３单链抗体基因片段的重组表达栽体，经ＩＰＴＧ诱导后可表达一分子量约为３０ｋＤａ的可溶性融合蛋白。体外生物学实验表明，诱导表达的９．１Ｃ３单链抗体，可阻断ＮＫ细胞对靶细胞Ｋ５６２的杀伤。此结果为临床应用９．１Ｃ３单链抗体治疗自身免疫性疾病和预防移植排异反应提供了基础。; 夏海滨金伯泉马文煜田方; 关键词：单链抗体 NK细胞单克隆抗体基因

基因免疫诱导9.1C3分子内影像类抗独特型抗体的产生被引量：1: 1997年; 本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单克隆抗体重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＳ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪分析表明，基因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像类抗独特型抗体的产生。; 夏海滨金伯泉马文煜田方李恩善; 关键词：基因免疫单克隆抗体独特型抗独特型抗体

分泌高效价抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤系的建立及其在APAAP免疫组化研究中的应用被引量：2: 1991年; 用碱性磷酸酶长程多途径免疫BALB/C小鼠,采用反向间接ELISA法筛选融合孔上清,获得2株稳定分泌抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤细胞株,腹水效价比国外报道高15～30倍,在APAAP免疫组化检测CD抗原、病毒抗原、肿瘤抗原以及细菌菌毛抗原等研究中均获得满意结果。; 赵宁刘雪松黄传书田方金伯泉薛采芳陈伯虹舒翠玲; 关键词：单克隆抗体 APAAP 杂交瘤

人血小板/T细胞活化抗原PTA1/Ig融合蛋白表达载体的构建、表达及鉴定被引量：5: 1998年; 目的：获得人血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ｐｌａｔｅｌｅｔａｎｄＴｃｅｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ１，ＰＴＡ１）胞膜外区与人ＩｇＧ１Ｆｃ段融合蛋白，为ＰＴＡ１配体的鉴定及其功能的研究提供有力的工具。方法：针对人ＰＴＡ１ｃＤＮＡ序列设计３段引物，通过反转录、半套式ＰＣＲ方法从活化Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出ＰＴＡ１胞膜外区基因片段，并将其克隆入融合蛋白表达载体ｐＩＧ中，通过酶切、ＰＣＲ及序列测定鉴定重组表达载体。重组载体通过ＤＥＡＥｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，经夹心ＥＬＩＳＡ及亲和层析、ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定融合蛋白的表达及免疫学活性。结果：经序列测定后证实重组表达载体含有正确的ＰＴＡ１胞膜外区序列及剪接供体序列，转染ＣＯＳ７细胞后，通过亲和层析纯化证实融合蛋白的Ｍｒ为８３０００，并能被抗ＰＴＡ１胞膜外区单抗及抗人ＩｇＧＦｃ的单抗同时识别。结论：ｐＰＴＡ１／Ｉｇ融合表达载体的构建及表达成功，为ＰＴＡ１的功能及配体（ＰＴＡ１Ｌ）的研究打下了良好的基础。; 孙凯金伯泉孙忱田方朱勇杨琨刘雪松; 关键词：人血小板 PTA1 融合蛋白

一种新的免疫球蛋白超家族成员PTA1的细胞分布及表达的研究被引量：19: 1996年; ＰＴＡ１分子是一种新的人类Ｔ细胞活化抗原，同时表达于血小板表面，最近基因克隆序列表明，ＰＴＡ１分子属于免疫球蛋白超家族中一个新的成员。ＰＴＡ１分子与杀伤性Ｔ淋巴细胞的分化密切相关，并参与血小板的凝集和活化。本文应用ＰＴＡ１单克隆抗体间接免疫荧光染色和流式细胞仪分析，对ＰＴＡ１抗原在正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）、人胎儿胸腺细胞及各种血液细胞系的分布及表达进行了较系统的观察。结果表明，正常人ＰＢＭＣ经ＰＨＡ刺激后ＰＴＡ１有较高水平表达，并与Ｔａｃ抗原（ＣＤ２５）表达具有良好的相关性；ＰＭＡ刺激的胎儿胸腺细胞、ＰＭＡ刺激的Ｊｕｒｋａｔ细胞和Ｔ淋巴细胞杂交瘤细胞系４７Ｃ７均有高水平的表达，而Ｂ淋巴细胞系和绝大多数髓样细胞系则不表达该抗原。此结果对于进一步研究ＰＴＡ１分子的功能，以及对ＰＴＡ１配体的鉴定具有重要的价值。; 田方金伯泉姜绍谆刘雪松申立中夏海滨; 关键词：抗原淋巴细胞免疫球蛋白超家族 PTA1

抗黑色素瘤单克隆抗体介导细胞毒效应的实验研究被引量：3: 1992年; 为了探索黑色素瘤单克隆抗体特异性治疗的机理,为临床治疗提供依据,我们应用Leo Me13、HB59和HB603种抗人黑色素瘤单克隆抗体进行了补体依赖性细胞毒(CDC)以及抗体依赖性LAK细胞介导的细胞毒作用(ADCC)实验研究。; 田方金伯泉黄传书刘雪松赵宁李恩善; 关键词：单克隆抗体黑色素瘤细胞毒效应

一种新的恒河猴T淋巴细胞活化抗原PTA1被引量：2: 1997年; 本文应用抗人Ｔ细胞活化抗原ＣＤ２５和ＰＴＡ１ＭｃＡｂ对恒河猴ＰＢＭＣ进行间接免疫荧光染色和流式细胞仪分析，结果发现，恒河猴静止ＰＢＭＣＣＤ２５和ＰＴＡ１均为阴性，而ＰＨＡ活化后或经连续２个月注射ｒＨｕＴＮＦ－α恒河猴ＰＢＭＣ均表达高比率的ＣＤ２５和ＰＴＡ１阳性细胞。此结果表明，ＰＴＡ１抗原可作为恒河猴活化Ｔ淋巴细胞的一种有用标志，为ＰＴＡ１分子结构和功能研究以及采用恒河猴作为灵长类动物模型，观察细胞免疫功能状态提供了有用的资料。; 刘雪松金伯泉田方赵宁王增禄曹云新; 关键词：恒河猴 PBMC CD25 T淋巴细胞活化 PTA1 细胞免疫功能状态

金黄色葡萄球菌A型肠毒素单克隆抗体的制备被引量：3: 1992年; 金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)A型肠毒素(SEA)是金葡菌产生的一种水溶性胞外蛋白质,能引起人和某些哺乳动物的急性胃肠炎。SEA的致病作用机理目前尚不清楚。最近研究发现SEA还具有对人和小鼠等某些动物T淋巴细胞的多克隆丝裂原效应。因此,制备抗SEA单克隆抗体。; 董邦全李恩善汪美先田方许辉雷祚荣; 关键词：葡萄球菌肠毒素单克隆抗体

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田方

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