田晓静
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- hsa_circ_0044235对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和迁移的影响及机制
- 2022年
- 目的:探讨hsa_circ_0044235对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和迁移的影响及可能机制。方法:体外培养滑膜成纤维细胞MH7A,分为对照组(Con组)、LPS组、LPS+pcDNA组、LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235组、LPS+pcDNAhsa_circ_0044235+miR-NC组和LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-338-5p组,RT-qPCR检测各组细胞hsa_circ_0044235和miR-338-5p表达,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测细胞E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证hsa_circ_0044235与miR-338-5p的调控关系。结果:与Con组比较,LPS组MH7A细胞hsa_circ_0044235表达和E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),而miR-338-5p表达、细胞克隆形成数、划痕愈合率及N-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),细胞周期G_(0)-G_(1)期缩短(P<0.05),S期延长(P<0.05)。与LPS+pcDNA组比较,LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235组MH7A细胞克隆形成数、划痕愈合率及N-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),细胞周期G_(0)-G_(1)期延长(P<0.05),S期缩短(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-NC组比较,LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-338-5p组MH7A细胞克隆形成数、划痕愈合率及N-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),细胞周期G_(0)-G_(1)期缩短(P<0.05),S期延长(P<0.05),E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,hsa_circ_0044235可靶向结合miR-338-5p。结论:过表达hsa_circ_0044235可能靶向抑制miR-338-5p表达降低LPS诱导的滑膜成纤维细胞增殖和迁移,hsa_circ_0044235/miR-338-5p轴可能为类风湿关节炎治疗提供了新靶点。
- 田晓静薛宏峰蒋辉姚雨叶
- 关键词：类风湿关节炎滑膜成纤维细胞细胞增殖迁移
- 羧甲基茯苓多糖对人外周血源性树突状细胞SOCS-1基因甲基化及体外成熟的影响被引量：1
- 2014年
- 目的：通过检测羧甲基茯苓多糖（ carboxymethytl pachymaram ，CMP）处理后人外周血源性树突状细胞（dendritic cells，DC）中细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）基因甲基化水平及表达情况，探讨 CMP 对 DC 体外成熟的影响。方法通过重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和IL-4体外诱导人外周血源性单核细胞源DC，并促进成熟，分别加入不同浓度的CMP （终浓度为10、50、100 mg/L），应用甲基化特异性PCR（ methylation specific PCR ，MSP）和real-time PCR法分别分析SOCS-1基因甲基化水平及表达情况；应用流式细胞术、混合淋巴细胞反应（ MLR）和ELISA分别检测DC的表面标志、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-12分泌的变化。结果经CMP刺激后DC中SOCS-1基因甲基化水平明显增高，SOCS-1基因表达水平显著降低，表面标志（ CD80、CD83、CD86、HLA-DR）、刺激淋巴细胞增殖能力及IL-12的分泌水平均上调，且呈剂量依赖趋势。50 mg/L和100 mg/L CMP刺激组SOCS-1基因甲基化水平、IL-12分泌量及刺激淋巴细胞增殖指数均显著高于对照组，SOCS-1基因表达水平显著低于对照组。100 mg/L CMP刺激组CD80、CD83和HLA-DR表达水平显著高于对照组。结论 CMP能促进人外周血源性DC中SOCS-1基因甲基化，减少SOCS-1基因表达，进而促进其体外成熟。
- 钱高潮潘薇田晓静丁志祥金文涛张琪
- 关键词：羧甲基茯苓多糖树突状细胞SOCS-1基因
- miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌上皮间质转化的影响被引量：6
- 2020年
- 目的:探讨miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)的影响及其可能的作用途径。方法:收集2017年1月至2018年12月我院手术切除的NSCLC组织和癌旁组织标本65例,采用RT-PCR检测miRNA-200a在NSCLC组织和癌旁组织中的表达水平;构建miRNA-NC和miRNA-200a稳定细胞系,采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析miRNA-200a和BRD4的靶向关系;pcDNA空载和pcDNA-BRD4过表达载体分别转染miRNA-NC和miRNA-200a细胞,采用Western blot检测miRNA-200a靶向BRD4对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响;采用Transwell分析miRNA-200a靶向BRD4对NSCLC细胞侵袭能力的影响。结果:miRNA-200a在NSCLC组织中的相对表达水平显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析表明BRD4可能是miRNA-200a的一个作用靶点;双荧光素酶报告基因结果显示,在过表达BRD4-WT的细胞中,miRNA-200a组细胞的相对荧光素酶活性显著低于miRNA-NC组细胞(P<0.05);而在过表达BRD4-MUT的细胞中,miRNA-200a组和miRNA-NC组细胞的相对荧光素酶活性无显著性差异(P>0.05)。Western blot结果显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞BRD4和Vimentin的蛋白表达水平显著下降,E-cadherin的蛋白表达显著增加(P<0.05);与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组细胞中Vimentin的蛋白表达水平明显回升,E-cadherin的蛋白表达显著回落,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞的侵袭个数显著下降[(83.66±9.25)个比(32.73±6.02)个,P<0.05];与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组个细胞的侵袭个数明显回升,差异有统计学意义[(35.06±5.84)个比(62.02±7.28)个,P<0.05]。结论:miRNA-200a在NSCLC组织中高表达,过表达miRNA-200a可靶向下调BRD4的表达,从而抑制NSCLC中BRD4诱导的EMT和侵袭迁移。
- 田晓静周伊兰薛宏峰
- 关键词：非小细胞肺癌上皮间质转化
- 活动期类风湿性关节炎患者IL-17和IL-27水平变化及其临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的分析活动期类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)患者血清和关节液中白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)和白细胞介素-27(Interleukin-25,IL-25)水平,探讨IL-17和IL-27在活动期RA患者中的临床意义及其与相关实验指标的相关性。方法选择56例活动期RA患者为实验组,30例健康体检者为对照组,采用免疫散射比浊法测定血清C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF)的浓度,用魏氏法测定红细胞沉降率(ESR),用化学发光微粒子免疫检测法检测抗环胍氨酸多肽抗体(CCP)浓度,用ELISA法测定健康体检者血清和RA患者血清及关节液中的IL-17、IL-27水平。结果 RA患者血清和关节液中IL-17和IL-27水平明显高于对照组;RA患者血清IL-17水平与ESR、CRP、CCP呈正相关性,关节液中IL-17水平与ESR、CRP呈正相关性,与RF无相关性;RA患者血清及关节液中IL-27水平与ESR、CRP、RF和CCP无明显相关性;RA患者血清及关节液中IL-17与IL-27水平呈正相关性。结论 IL-17和IL-27在RA患者的血清和关节液中过度表达,提示IL-17和IL-27参与了RA的免疫性致病机制,其具体作用尚待进一步研究。
- 田晓静史兵伟丁志祥钱高潮
- 关键词：类风湿性关节炎白细胞介素-17白细胞介素-27
- IL-12基因修饰DC中SOCS1基因沉默对体外诱导特异性CTL的影响被引量：1
- 2015年
- 利用重组腺病毒载体pAd CMV/V5-DEST-IL-12转染小鼠骨髓来源的树突状细胞(IL-12/DC),探讨SOCS1基因沉默IL-12/DC在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的效能,及其免疫杀伤肺癌细胞株LLC的能力。采用重组腺病毒介导IL-12基因和SOCS1SiRNA基因共同修饰C57BL/6小鼠骨髓来源的DC,经反复冻融法提取LLC抗原,致敏基因修饰的DC;用ELISA法检测各组DC分泌IL-12和IL-10的水平,及各组DC刺激后的T细胞分泌IFN-γ的水平;MTT法检测DC刺激同源小鼠T细胞的增殖能力,微量细胞毒法检测CTL的活性并收集刺激后的T细胞,流式细胞术分析CD8+/CD4+比例和CD4+CD25+Treg的水平;统计学分析各组间的差异。SOCS1SiRNA和IL-12基因共同修饰能有效下调DC中SOCS1蛋白的表达并上调IL-12蛋白的表达;IL-12的分泌水平也明显高于SOCS1SiRNA或IL-12单基因转染组;基因共同修饰的DC表型更加成熟,能明显促进CTL的增殖和活化,减少Treg的生成;CTL分泌高水平的IFN-γ,产生对LLC特异性的细胞免疫。
- 田晓静史兵伟韩金玲金文涛钱高潮
- 关键词：白介素-12SOCS1
