石小燕
- 作品数：10 被引量：22H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 凋亡素VP3蛋白的原核表达及纯化
- 2012年
- 目的构建凋亡素VP3蛋白的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化。方法采用PCR法自PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒中扩增VP3基因,运用靶向克隆酶将VP3基因插入线性pET15b,构建重组表达质粒pET-15b-VP3;经测序证实构建成功后转化E.coli Rosetta,表达凋亡素VP3蛋白;经Ni-NTA树脂亲和层析,对纯化产物进行SDS-PAGE、Western blotting分析鉴定。结果成功构建凋亡素VP3蛋白原核表达质粒,表达并纯化了分子量为13.6 kD的凋亡素VP3蛋白。结论凋亡素VP蛋白原核表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化,为体内应用凋亡素VP3蛋白进行抗肿瘤研究奠定了基础。
- 邓守恒柯贤柱石小燕蔡召忠杨敬宁黄永章陈萍
- 关键词：凋亡素VP3提纯
- PAX2特异性siRNA在诱导HEC-1A细胞增殖及凋亡中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的研究靶向全长配对盒基因-2(PAX2)siRNA在诱导子宫内膜癌细胞增殖、凋亡中的作用。方法慢病毒载体介导针对PAX2基因的siRNA转染HEC-1A细胞,Western blot、激光共聚焦显微镜、Annexin-V/PI双标法及四甲基偶氮唑蓝(MTT)分别检测PAX2蛋白表达、细胞凋亡形态学改变、凋亡率及细胞增殖变化。结果 PAX2-siRNA转染后,HEC-1A细胞的PAX2蛋白表达明显降低(P<0.05);细胞早期凋亡率显著增加(22.07±2.17)%,与空载体转染组(1.12±0.37)%及未转染组(0.89±0.52)%比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01);细胞生长速率显著减慢,细胞经Hoechst 33258荧光染色,见转染后细胞的胞核呈浓集固缩改变,而空载体转染组和未转染组细胞的胞核无凋亡形态学改变。结论 PAX2特异性siRNA能明显抑制PAX2蛋白在子宫内膜癌HEC-1A细胞中的表达,抑制细胞增殖并诱导HEC-1A细胞凋亡。
- 张丽萍石小燕刘永珍程萍张志军王锋李莉
- 关键词：子宫内膜癌细胞凋亡
- COX-2在VEGF-C介导的人宫颈癌细胞生物学行为中的作用研究被引量：5
- 2015年
- 目的检测血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和环氧合酶-2(COX-2)在人宫颈癌细胞系中表达,探讨二者之间的关系及COX-2在VEGF-C介导的人宫颈癌细胞生物学行为中的作用。方法用Western blot方法检测VEGF-C和COX-2在HeLa、Siha、C33a和Caski等4株宫颈癌细胞中的表达;用特定浓度的COX-2特异性抑制剂NS398处理HeLa细胞,评估其对HeLa细胞的增殖、转移产生的影响。结果 VEGF-C和COX-2蛋白在4株宫颈癌细胞中均有表达,且在不同细胞株中二者表达强弱一致。用NS398处理HeLa细胞后,其VEGF-C蛋白表达明显降低,且细胞凋亡率增加。NS398可诱导HeLa细胞增殖活性降低(P<0.05),且呈剂量依赖模式。Transwell实验结果显示NS398处理组细胞侵袭力为(25.45±3.67)%,较对照组(40.38±0.72)%明显减弱(P<0.05)。结论 VEGF-C和COX-2均在人宫颈癌细胞中表达,且COX-2与VEGF-C表达之间有一定的相关性。COX-2可能是宫颈癌细胞中VEGF-C表达的一个调节者,其抑制剂NS398对于VEGF-C介导的肿瘤生长和转移有一定抑制作用。
- 石小燕毛晓露彭彩霞谭露张亚东
- 关键词：血管内皮生长因子-C环氧合酶-2生物学行为
- 信号通路抑制剂对两株子宫内膜癌细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2011年
- 目的观察体外表皮生长因子受体(EGFR)信号通路抑制剂RG-14260(RG)单独及RG-14260联合mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素Rapamycin(RA)对两株子宫内膜癌细胞(PTEN缺失的Ishikawa细胞和PTEN表达完整的HEC-1A细胞)生物学行为的影响。方法采用细胞形态学观察和细胞克隆形成法检测抑制剂对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布;Transwell法检测细胞体外侵袭力的改变。结果 RG、RA均可明显增加Ishikawa细胞G1期细胞比例,降低S期细胞比例(P<0.05),RG、RA合用G1期细胞比例增加更明显(P<0.05),S期细胞比例下降更明显(P<0.01);RG、RA单用或联合使用均可诱导Ishikawa细胞凋亡,降低Ishikawa细胞存活率和侵袭力;RG、RA对HEC-1A细胞不敏感,经RG、RA单独或联合作用后各组HEC-1A细胞凋亡率、细胞存活率、侵袭力与相应处理的Ishikawa组细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 PTEN基因缺失使相应信号通路抑制剂作用的子宫内膜癌细胞生物学行为明显改变,对相关信号通路抑制剂的敏感性增加。
- 邓守恒吴亚玲柯贤柱陈萍李芳石小燕
- 关键词：子宫内膜肿瘤雷帕霉素信号通路生物学行为
- 靶向克隆法构建pET15b-VP3原核表达载体被引量：3
- 2012年
- 目的探索利用PCR产物靶向克隆法构建能够表达凋亡素的pET15b-VP3原核表达载体。方法以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b,得到重组表达载体pET15b-VP3,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切,图谱分析和重组质粒核苷酸序列分析以鉴定所构建的原核表达载体。结果 PCR产物经过电泳鉴定可见366bp特征性的VP3片段,重组质粒经双酶切电泳获得了一个大小为366bp的VP3片段,重组质粒测序证实VP3cDNA编码区成功地插入了pET15b,且其序列与GeneBank中VP3cDNA序列完全一致。结论靶向克隆法可快速,高效地构建pET15b-VP3原核表达载体,为进一步研究VP3药用价值奠定了基础。
- 邓守恒柯贤柱石小燕蔡召忠杨敬宁黄永章陈萍
- 关键词：原核表达
- 靶向克隆法构建PEP-1-VP3基因的原核表达载体
- 2012年
- 目的利用PCR产物靶向克隆法构建细胞穿透肽-凋亡素(PEP-1-VP3)的原核表达载体。方法以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b-PEP-1,得到重组表达质粒pET15b-PEP-1-VP3,经过筛选,挑选出阳性克隆进行NdeⅠ和BamHⅠ双酶切图谱分析和重组质粒核苷酸序列分析以鉴定所构建的原核表达载体。结果 PCR产物经过电泳可见366bp特征性的VP3片段,重组的质粒经过双酶切获得了一个大小为440bp的特征性PEP-1-VP3片段,重组质粒测序证实VP3cDNA编码区成功地克隆入了pET15b-PEP-1,且其序列与GeneBank中VP3cDNA序列完全一致。结论靶向克隆法可快速、高效地构建PEP-1-VP3基因的原核表达载体,为制备PEP-1-VP3融合蛋白奠定基础。
- 张蔚蔡召忠邓守恒杨敬宁黄永章石小燕
- 关键词：原核表达
- 在开展高级医学研讨班中培养优秀学生团队的探索
- 2011年
- 本文从培养优秀学生团队的重要性和必要性入手,对在举办高级医学研讨会过程中培养出优秀学生团队的可能性进行了必要的探讨。
- 蔡召忠张蔚石小燕周琦邓守恒
- RG-14260与雷帕霉素联合给药对两株子宫内膜癌细胞的作用被引量：2
- 2012年
- 目的观察体外EGFR信号通路抑制剂RG-14260单独及RG-14260联合mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素对两株子宫内膜癌细胞(PTEN缺失的Ishikawa细胞和PTEN表达完整的HEC-1A细胞)增殖、凋亡、细胞周期及信号通路的影响。方法 MTT法检测抑制剂对细胞增殖的影响,金氏公式评价两抑制剂的协同效果;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布;Western印迹检测细胞信号蛋白的表达。结果 RG-14260与雷帕霉素可抑制Ishikawa细胞增殖、诱导细胞凋亡、减少S期细胞数量、降低pAKT含量,二者联合应用呈协同效应;RG-14260与Rapamycin对HEC-1A细胞上述作用不明显。结论 PTEN基因缺失使相应信号通路抑制剂作用的子宫内膜癌细胞增殖明显受抑,细胞阻滞于G1期,细胞凋亡增加,对相关信号通路抑制剂的敏感性增加。
- 邓守恒喻雄杰曹凤军柯贤柱陈萍石小燕
- 关键词：子宫内膜癌雷帕霉素信号通路
- mTOR信号通路在ishikawa细胞增殖中的作用被引量：4
- 2011年
- 目的:观察经抑制剂作用后人子宫内膜癌细胞株ishikawa细胞生长和mTOR信号通路的变化,了解子宫内膜癌的发病机制。方法:MTT法和细胞克隆形成法检测抑制剂对细胞增殖的影响;RT-PCR和Western blot法从mRNA和蛋白质水平分别检测mTOR mRNA和下游磷酸化靶蛋白S6K1和STAT3表达。结果:雷帕霉素(rapamycin,RA)与酪氨酸磷酸化抑制剂(RG-14260,RG)可抑制ishikawa细胞增殖、降低其存活率,二者联合呈协同效应(P<0.01);ishikawa细胞中存在mTOR mRNA和下游磷酸化靶蛋白S6K1和STAT3高表达,经RA单独或联合RG作用后,各指标均下降,且二者合用效果更明显(P<0.01)。结论:mTOR信号通路参与了子宫内膜癌的形成和发展。
- 邓守恒石建国柯贤柱陈萍李芳石小燕
- 关键词：子宫内膜癌信号通路
- PCR技术对侵袭性真菌感染诊断的研究进展被引量：5
- 2013年
- 侵袭性真菌病（invasivefungaldisease，IFD），又称侵袭性真菌感染，是真菌侵入人体组织和血液，并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理、生理过程。近年来，由于环境因素的危害和药物因素影响（如免疫移植、肿瘤放化疗、大剂量广谱抗生素的长期使用、糖皮质激素和免疫抑制剂的广泛应用等），造成了IFD的患病率和病壳率均呈显著上升趋势。
- 毛晓露石小燕卢忠心胡丽华
- 关键词：真菌病曲霉病念珠菌
