罗刚
- 作品数:22 被引量:57H指数:4
- 供职机构:中山大学附属中山医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- UTI对人膀胱癌T24细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂表达的影响被引量:3
- 2004年
- 目的 体外研究尿胰蛋白酶抑制物对人膀胱癌T2 4细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂表达的影响 ,探讨UTI抑制膀胱肿瘤侵袭和转移的机制。方法 采用免疫组化和半定量逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)检测不同量的UTI对体外培养的人移行细胞膀胱癌T2 4细胞uPA表达的影响。结果 免疫组化和RT PCR结果均表明 ,UTI能拮抗uPA的表达并呈负的剂量效应关系。结论 UTI能有效抑制人膀胱癌T2 4细胞uPA的表达 ,为UTI抑制膀胱肿瘤侵袭和转移提供了实验依据。
- 曹正国周四维宋晓东罗刚刘继红叶章群
- MUC1基因疫苗对膀胱肿瘤抑制的免疫学实验研究被引量:4
- 2008年
- 目的:研究人粘蛋白MUC1基因DNA疫苗诱导小鼠细胞毒性T细胞(CTL)及体液免疫应答的作用,为膀胱癌的疫苗治疗提供实验资料。方法:接种pcDNA3.1(+)-MUC1质粒,通过ELISA法检测小鼠血清MUC1抗体生成和脾细胞产生IL-2和IFN-γ的量,通过LDH释放法测定CTL对BIU-87细胞的杀伤活性。结果:接种pcDNA3.1(+)-MUC1疫苗后,小鼠血清中抗MUC1抗体水平明显升高,与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。脾细胞产生的IL-2和IFN-γ水平较对照组高(P<0.01)。在效靶比为100∶1、50∶1、25∶1、12.5∶1时,MUC1基因疫苗免疫组小鼠CTL对BIU-87杀伤率(分别为58.4%、47.2%、35.7%、27.4%),较空载体pcDNA3.1(+)组小鼠和灭菌生理盐水组小鼠(分别为11%、19.2%、9.5%、14%和16.5%、11.9%、8.6%、10.3%)均明显升高,且有显著性差异(P<0.01)。结论:MUC1基因DNA疫苗能够诱导小鼠产生抗MUC1特异性抗体,诱导产生杀伤表达MUC1细胞的CTL,为MUC1基因疫苗用于膀胱肿瘤生物治疗提供了一定的实验依据。
- 罗刚周四维李志坚黎卫周华扩黄红星高新
- 关键词:MUC1DNA疫苗细胞毒性T细胞膀胱肿瘤
- Eag1钾通道在前列腺癌组织中的表达及意义被引量:3
- 2013年
- 目的:研究Eag1钾通道在前列腺癌(PCa)组织中表达的状况,为探讨其与PCa发生、发展机制的相关性及能否作为PCa的诊治靶点提供理论依据。方法:采用RT-PCR和免疫组化的方法,检测Eag1钾通道mR-NA和蛋白在雄激素依赖性前列腺癌(ADPCa)组织、雄激素非依赖性前列腺癌(AIPCa)组织和癌旁非瘤组织中的表达水平。结果:Eag1钾通道mRNA在ADPCa癌旁非瘤组织(A)、AIPCa癌旁非瘤组织(B)、ADPCa组织(C)和AIPCa组织(D)中表达相对系数分别为0.265±0.413、0.167±0.511、2.673±2.988和2.815±2.901,与相应非瘤组织相比,Eag1钾通道mRNA在前列腺癌组织中表达显著增高(P<0.05);Eag1钾通道蛋白在A、B、C和D组中阳性表达率分别为7.4%、6.7%、88.9%和86.7%,与相应非瘤组织相比,Eag1钾通道蛋白在癌组织中表达显著增高(P<0.05)。结论:Eag1钾通道可能参与了PCa的发生和进展的病理生理学过程,有望成为PCa诊治中有价值的靶点。
- 郑轶群李志坚高新张孝斌李法江石映江罗刚黎卫
- 关键词:前列腺癌雄激素钾通道
- 黏蛋白MUC1/Y在膀胱癌中的表达及其意义被引量:3
- 2005年
- 目的:检测黏蛋白MUC1/Y在膀胱肿瘤病变中的表达,探讨其在膀胱肿瘤诊断和免疫治疗中的意义。方法:采用免疫组化S P法和高清晰度彩色医学图文分析系统,对48例膀胱肿瘤组织、45例腺性膀胱炎组织和10例正常膀胱组织(对照组)黏蛋白MUC1/Y的表达进行检测分析。结果:MUC1/Y仅在膀胱肿瘤中表达,且平均灰度均显著低于腺性膀胱炎组织和正常膀胱组织(P<0.001)。结论:MUC1/Y为一种新型的肿瘤标记物,它在膀胱肿瘤组织的高表达,为膀胱癌诊断和免疫治疗提供了理论依据。
- 罗刚周四维曹正国鲁雄兵孙凯宋晓东叶章群
- 关键词:膀胱肿瘤基因表达MUC1/Y免疫组化
- MUC1及同种型MUC1/Y基因mRNA在膀胱癌中的表达及临床意义被引量:1
- 2007年
- 目的:探讨肿瘤相关抗原MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因在膀胱癌中mRNA的表达及其临床意义。方法:22例膀胱癌的组织样本(实验组)和10例正常膀胱组织样本(对照组)中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测两组样本中MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因mRNA表达水平。结果:膀胱癌组织的MUC1mRNA水平较正常膀胱组织显著增高(P<0.01);Ⅲ-Ⅳ期膀胱癌组织的MUC1/YmRNA水平较Ⅰ-Ⅱ期膀胱癌组织显著增高(P<0.01)。结论:MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因mRNA表达水平与膀胱癌有关,对膀胱癌的诊断和治疗有临床意义。
- 罗刚周四维叶章群李志坚黎卫周华扩高新
- 关键词:肿瘤相关抗原MUC1
- 超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒的制备及其作为基因载体的可行性研究被引量:17
- 2004年
- 背景与目的:磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展。为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamagneticdextranironoxidenanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性。方法:采用化学共沉淀法制作SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离SDION,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对SDION进行分析。以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建SDION-GFP-C2复合物,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测两者的结合率。以脂质体转染作为对照,荧光显微镜分别观察SDION和脂质体体外转染GFP-C2入膀胱癌细胞BIU-87的转染效率。结果:SDION直径在3~8nm之间,有效粒径为59.2nm,比饱和磁化强度为0.23emu/g。分别经10mmol/L的高碘酸钠氧化、0.5mol/L的硼氢化钠还原作用后的SDION和GFP的结合比例最大,SDION对GFPDNA的转染效率为45%左右,明显高于脂质体的转染效率(30%左右)。结论:SDION可通过氧化还原反应与GFP质粒相连,在体外可将GFP基因成功转染入人膀胱癌BIU-87细胞。
- 曹正国周四维孙凯鲁雄兵罗刚刘继红
- 关键词:基因载体转染效率肿瘤基因治疗GFP基因目的基因超顺磁性
- RT-PCR检测MUC1基因转染树突状细胞的表达
- 2005年
- 目的 向人外周血来源的树突状细胞 (DCs) 转染人MUC1质粒, 使DCs特异性的表达和提呈MUC1。方法 应用脂质体将人MUC1质粒转染体外培养的外周血来源的DCs, RT-PCR检测转染人MUC1质粒DCs的表达。结果 转染MUC1质粒的DCs, RT-PCR检测有一特异性扩增带。结论 用脂质体能成功地将人MUC1质粒转入DCs并表达。
- 孙凯周四维罗刚曹正国鲁雄兵叶章群
- 关键词:转染MUC1基因树突状细胞RT-PCR检测
- 粘蛋白MUC1及同种型MUC1/Y在膀胱癌与膀胱良性病变中的表达及其意义
- 2005年
- 目的:检测粘蛋白MUC1及其同种型MUC1/Y在膀胱癌和膀胱良性病变表达,探讨其在膀胱癌诊断和免疫治疗中的意义。方法:采用免疫组化SP法和高清晰度彩色医学图文分析系统,对48例膀胱癌组织、45例腺性膀胱炎组织和10例正常膀胱组织(对照组)粘蛋白MUC1及其同种型MUC1/Y的表达,进行检测分析。结果:MUC1在膀胱癌组织、腺性膀胱炎组织中的平均灰度均显著低于正常膀胱组织(P<0.001);MUC1/Y仅在膀胱癌中有表达。结论:MUC1、MUC1/Y作为一种新型的肿瘤标志物,它们在膀胱癌组织的高表达及分布特点,可为膀胱癌诊断和免疫治疗提供实验基础。
- 罗刚周四维曹正国鲁雄兵孙凯叶章群庄乾元刘继红张旭
- 关键词:膀胱肿瘤MUC1MUC1/Y
- 人淋巴细胞趋化因子真核表达质粒的构建及体外转染的生物学活性测定被引量:2
- 2005年
- 目的: 构建人淋巴细胞趋化因子(HLptn)真核表达质粒,在膀胱肿瘤细胞株BIU -87中表达重组质粒,并检测趋化活性。 方法: 用RT- PCR法自活化的人外周血淋巴细胞扩增HLptn含编码区序列的cDNA,克隆至pGM TEasyT载体,测序正确后,将目的片段插入pcDNA3. 1( +)载体,获得阳性克隆pcDNA3. 1( +) HLptn;用脂质体介导其转染BIU- 87细胞,用Western -blot检测转染后细胞中HLptn的表达;取转染后的上清液,采用Boyden小室法检测表达的HLptn趋化CD4+、CD8+T淋巴细胞的生物学活性。 结果: 克隆的cDNA序列与GenBank中U23772的序列编码区内第 225位碱基不同,系同义突变,构建了真核重组表达载体pcDNA3. 1 ( +) -HLptn;转染的BIU-87细胞表达HLptn,其培养上清对CD4+、CD8+T淋巴细胞具有趋化活性。 结论: 成功构建的HLptn真核表达系统可在人膀胱肿瘤细胞株BIU- 87中表达。
- 鲁雄兵周四维杨为民宋晓东罗刚孙凯曹正国
- 关键词:淋巴细胞趋化因子真核表达
- 葡聚糖氧化铁磁性纳米颗粒的制备条件对其有效粒径和比饱和磁化强度的影响被引量:5
- 2005年
- 目的探讨葡聚糖氧化铁磁性纳米颗粒(DMN)的制备对其有效粒径和比饱和磁化强度的影响。方法采用化学共沉淀法制作DMN,通过丙烯葡聚糖凝胶S300HR色谱和离心法分离DMN,用透射电镜、粒度分析仪和磁化强度分析仪检测DMN,研究制备过程中葡聚糖用量、铁盐含量、氨水浓度、搅拌速度、离心速度、Fe3+/Fe2+摩尔比、反应温度等条件对DMN的有效粒径、比饱和磁化强度的影响。结果不同制备条件影响着DMN有效粒径和比饱和磁化强度的大小。DMN直径最小为3nm,有效粒径介于42.7~189.1nm,比饱和磁化强度介于0.16~0.38emu/g。结论制备反应条件对DMN有效粒径和比饱和磁化强度的影响符合化学共沉淀反应的一般规律,可以用沉淀反应的理论指导DMN的制备,为DMN作为基因和药物纳米载体的研究提供了实验数据。
- 曹正国周四维刘继红宋晓东罗刚鲁雄兵孙凯
- 关键词:葡聚糖氧化铁磁性纳米颗粒比饱和磁化强度