罗海英
- 作品数：10 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 输注CTLA4Ig基因修饰骨髓间充质干细胞诱导大鼠移植肝免疫耐受的实验研究
- 罗海英
- 关键词：CTLA4IG骨髓间充质干细胞免疫耐受
- 文献传递
- 骨髓来源干细胞在肝移植中的应用及其相关机制被引量：3
- 2007年
- 肝脏移植已经日益成为治疗终末期肝病最为有效的方法,而供肝严重短缺、急慢性排斥反应以及长期应用免疫抑制剂所带来的毒副作用一直是肝移植面临的三大难题.骨髓来源的干细胞具有向肝系细胞分化的潜能,参与损伤后肝再生.肝移植术后,急性排斥反应、缺血再灌注、部分肝移植肝量损失、术后肝炎复发及"小肝综合征"等对移植肝造成的损伤环境可对骨髓来源不同干细胞亚群产生趋化作用,动员其进入外周循环并迁移至肝脏,促进移植肝功能修复.此外,骨髓来源干细胞还可参与活体肝移植供者的功能性肝再生.骨髓源干细胞参与肝再生的过程可能是通过SDF-1及其受体CXCR4的相互作用以及HGF,IL-8,MMP9,VEGF/VEGFR-2等因子的参与而实现的.肝移植联合供者来源的骨髓源干细胞移植可以诱导供者特异性免疫耐受,使异体移植肝得以长期高质量存活.总之,无论是从参与再生的角度还是从诱导免疫耐受的角度,无论从受者的角度还是从活体供者的角度,骨髓来源的干细胞移植都显示了辅助肝移植治疗肝衰竭,进而拓宽肝移植发展空间的强大优势,为广大肝病患者带来新的希望.
- 罗海英王韫芳孔维裴雪涛
- 关键词：干细胞肝移植肝再生
- 共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体、重组腺病毒及其应用
- 本发明公开了IRES介导的共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体及重组腺病毒。是先将CTLA4Ig基因、IRES基因和CTLA4基因顺次插入pAdTrack－CMV穿梭载体中巨细胞病毒启动子的下游，得到携带CT...
- 裴雪涛罗海英王韫芳翟树森管利东
- 文献传递
- 共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体、重组腺病毒及其应用
- 本发明公开了IRES介导的共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体及重组腺病毒。是先将CTLA4Ig基因、IRES基因和CTLA4基因顺次插入pAdTrack-CMV穿梭载体中巨细胞病毒启动子的下游，得到携带CT...
- 裴雪涛罗海英王韫芳翟树森管利东
- 文献传递
- 用慢病毒转染RNAi技术沉默胆固醇7α羟化酶的基因表达,降低肝细胞中胆汁酸的分泌
- 2008年
- 为了降低生物人工肝(bioartificial liver system)中肝细胞胆汁酸的分泌,构建了胆固醇7α羟化酶慢病毒RNA干涉载体,并转染人肝脏细胞(L-02)。根据绿色荧光蛋白的表达评估转染效率后进行流式分选,获得高表达慢病毒干涉载体的细胞,并以野生型L-02细胞和仅转染pSicoR空载体的L-02细胞作对照,观察肝细胞胆固醇7α羟化酶的表达以及培养上清中总胆汁酸含量。利用半定量PCR、实时荧光定量PCR及Western-blot等实验方法检测了转染细胞中基因的干涉效果,结果显示:与对照组相比,在mRNA水平,转染慢病毒siRNA载体的L-02细胞,其胆固醇7α羟化酶基因的表达量仅为野生型L-02细胞表达量的31.2%,为转染pSicoR空载体的L-02细胞的34.1%,干涉效率分别为68.8%和65.9%,均具有显著差异(P<0.05);Western-blot结果显示胆固醇7α羟化酶在蛋白质水平表达也明显受到抑制,表明转染慢病毒siRNA下调了肝细胞中胆固醇7α羟化酶基因的表达,减少了胆汁酸的分泌。以上研究结果表明,利用RNAi技术可以获得低表达胆固醇7α羟化酶基因的肝细胞,并有效降低肝细胞中胆汁酸的分泌,为临床上生物人工肝的构建及应用奠定基础。
- 郑吉春裴海云杨印祥姚海雷罗海英王婧陈琳南雪白慈贤王韫芳岳文裴雪涛
- 关键词：RNAI慢病毒肝细胞胆汁酸
- CTLA4Ig基因修饰的骨髓间充质干细胞的应用
- 本发明公开了经CTLA4Ig基因修饰的骨髓间充质干细胞的新用途，其目的是提供经CTLA4Ig基因修饰的骨髓间充质干细胞在制备诱导移植肝免疫耐受药物中的应用。所述经CTLA4Ig基因修饰的重组骨髓间充质干细胞是将分泌性表达...
- 裴雪涛罗海英王韫芳翟树森管利东
- 文献传递
- 眼结膜印迹细胞法在儿童亚临床型维生素A缺乏早期筛查中的应用研究
- 维生素A缺乏在发展在中国家一直是影响儿童健康的重要因素之一.目前,与典型的维生素A缺乏相比,起病隐匿的亚临床型维生素A缺乏(SVAD)在相当比例的儿童中发生.本研究采用结膜印迹细胞法(CIC法),对438例3~7岁龄前儿...
- 罗海英
- 关键词：维生素A缺乏症儿童健康
- 文献传递
- 腺病毒介导CTLA4Ig及CTLA4双基因在骨髓间充质干细胞中的表达
- 2008年
- 目的制备CTLA4Ig及CTLA4双基因共表达腺病毒载体,检测重组腺病毒在骨髓间充质干细胞(BMMSCs)中的表达。方法构建大鼠CTLA4Ig融合基因,将CTLA4Ig及CTLA4基因经IRES2连接,通过同源重组获得重组腺病毒表达载体,并在293细胞中进行病毒包装和扩增。检测CTLA4Ig和CTLA4在BMMSCs中的共表达情况及其免疫抑制功能。结果通过同源重组获得携带CTLA4Ig-IRES2-CTLA4的重组腺病毒表达载体,PacⅠ酶切鉴定正确,与脂质体共转染293细胞获得重组腺病毒。用重组腺病毒感染的BMMSCs可同时表达CTLA4Ig及CTLA4,且此类细胞具有明显抑制淋巴细胞反应的功能。结论重组腺病毒感染的BMMSCs可同时表达分泌型CTLA4Ig和膜结合型CTLA4,通过阻断协同刺激通路方式进一步增强BMMSCs的免疫抑制功能。
- 罗海英王韫芳南雪白慈贤施双双尉承泽孔维裴雪涛
- 关键词：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4腺病毒科间质干细胞免疫抑制
- 大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立与评价
- 2008年
- 目的:建立大鼠肝脏移植急性排斥反应模型,并对所建模型进行评价。方法:采用改良Kamada"二袖套"法,以近交系大鼠Dark Agouti(DA)为供体、Lewis(LEW)为受体(A组)建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,通过观察手术情况、生存情况及肝功能和病理学检查对此模型进行评价,同时以LEW→LEW作为对照组(B组)。结果:手术成功率为91.3%;手术时间为(90.70±5.68)min;无肝期时间(9.96±1.19)min;平均存活时间A组为(12.44±3.43)d,B组超过100d;A组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及血清总胆红素术后不断升高,在第10～14d最为明显,血清白蛋白在术后第3d开始逐渐降低,在相同时相点,与B组相比差异显著;A组移植肝脏病理检查有明显的排斥反应,而B组没有。结论:DA→LEW为稳定、强烈的大鼠肝移植急排模型,是研究肝移植排斥及免疫耐受的理想动物模型。
- 罗海英翟树森张玉君白慈贤尉承泽孔维王韫芳裴雪涛
- 关键词：肝移植排斥反应近交系
- CTLA4基因修饰骨髓间充质干细胞向肝细胞诱导分化及其免疫抑制功能研究被引量：1
- 2008年
- 用携带CTLA4Ig基因的重组腺病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs),体外向肝细胞诱导分化,并检测其免疫抑制功能.用含有HGF等细胞因子培养液诱导重组腺病毒Ad-CTLA4Ig感染大鼠BMMSCs向肝细胞分化.诱导后的细胞可表达AFP、Alb和CK18等肝细胞标志,同时还具有储存糖原和摄取、排泌靛青绿等肝细胞功能.转基因BMMSCs在未经诱导和诱导后均可表达CTLA4Ig,诱导14天时表达量有所减弱.单向混合淋巴细胞反应证实,诱导7天的转基因BMMSCs具有明显的抑制淋巴细胞反应的作用,其抑制作用明显高于未转基因BMMSCs,且CTLA4Ig基因修饰BMMSCs输注还可以明显延长肝移植大鼠的存活时间.用重组腺病毒Ad-CTLA4Ig对BMMSCs进行基因修饰,一方面不会影响BMMSCs的肝细胞分化潜能,另一方面使BMMSCs的免疫抑制特性得到进一步强化.
- 罗海英王韫芳翟树森张玉君南雪白慈贤施双双尉承泽岳文孔维裴雪涛
- 关键词：CTLA4IG腺病毒分化免疫抑制
